关于纳氏试剂优化配制及验收的探讨

关于纳氏试剂优化配制及验收的探讨

王汉青

王汉青

（南京市溧水区疾病预防控制中心211200）

【中图分类号】R123.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）24-0348-02

引言

纳氏试剂比色法因其操作简便、灵敏度高，稳定性好，是目前广泛用于测定污水和清洁水中氨氮的标准方法。在氨氮实际监测分析中，空白值的大小对分析结果的准确性有很大影响，特别是对清洁水样尤为重要。因实验用水、化学试剂的纯度、玻璃器皿的洁净度及分析人员的水平和经验等等都会影响空白值的大小，而纳氏试剂的配制是影响空白值的主要因素[1]。市售分析纯试剂常达不到要求，只有通过预实验检验才能判断。《实验室资质认定评审准则》[2]中规定实验室采购品和试剂需验收合格后才能投入使用，并作为室内质量管理的重要一环，但如何验收及相应合格标准却无具体描述。笔者在长期工作实践中，参阅文献，优化纳氏试剂的配制方法过程和明确了本实验室的验收方法。

1实验原理和材料

1.1实验原理

水中氨与纳氏试剂（K2HgI4）在碱性条件下生成黄至棕色的化合物（NH2HgOI），其色度与氨氮含量成正比。

1.2仪器与主要试剂

722分光光度计（上海精密仪器有限公司）

酒石酸钾钠(KNaC4H4O6.4H2O)、氢氧化钠(NaOH)、碘化钾(KI)、二氯化汞(HgCl2)、无氨水、氨氮标准储存溶液（1.00mg/ml）临用前纯水稀释定容至10μg/ml为氨氮标准使用液.

1.3仪器工作参数

420nm，3cm比色皿，纯水作参比

2配制方法过程及讨论

2.1实验用水（无氨水）的制备

氨氮实验用水要求为无氨水。实验室中因使用氨水或铵盐等试剂容易造成污染，所以实验前需开窗通风，使用新开封的纯水；也可用一般纯水通过强酸型阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后重蒸馏制得。

2.2酒石酸钾钠溶液的配制

称取50克酒石酸钾钠溶于100ml纯水中。市售酒石酸钾钠可能含有铵盐，国标方法[3]中用加热煮沸的方法并不能完全除去，可采取以下两种方法：（1）向定容后的酒石酸钾钠溶液加入5ml纳氏试剂，沉淀后取上清液使用。（2）向酒石酸钾钠溶液中加少量碱，煮沸蒸发至50ml左右，冷却后定容至100ml.一般第二种方法优于第一种。

2.3纳氏试剂的配制

纳氏试剂本身是一种络合物，它可以与氨氮显色的基团为[HgI4]2-络离子，因此要保证纳氏试剂具有良好的性能，必须使[HgI4]2-络离子达到较好的浓度[4]。纳氏试剂的传统配制方法有两种。方法一是100g碘化汞及70g碘化钾溶于少量纯水，将此液缓缓倾入已冷却的500ml氢氧化钠溶液（320g/L）中，不停搅拌，再以纯水稀释至1000ml。方法二称取20g碘化钾溶于100ml无氨水中，边搅拌边逐步加入二氯化汞结晶粉末（约10克），至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液，保持搅拌，到出现少量朱红色沉淀不易溶解时，停止滴加饱和二氯化汞溶液。然后把该溶液缓慢注入上述已冷却的氢氧化钠溶液(240g/L)中，边注入边充分搅拌，并用无氨水稀释至400ml，然后静置过夜。一般常用第二法。该法关键在于把握HgCl2的加入量，决定着获得显色基团含量多少，进而影响方法的灵敏度。因采用汞盐试剂，加入过多易造成汞的污染，危害分析人员。参阅文献[5]并通过实验论证稍作改变，把二氯化汞和碘化钾的用量比改为0.41:1（即8.2g二氯化汞溶于20g碘化钾）。改进后的配置法减少了二氯化汞的用量，配制过程中可在通风柜内低温加热促进二氯化汞溶解，还可防止HgI2红色沉淀提前出现，静置后生成的沉淀除去。二氯化汞为微溶于水的毒害无机物，实验条件允许还可用超声波加速其溶解[6]。

3验收方法及结论

3.1空白值的测定

实验空白值反映实验过程中各种因素对物质分析的综合影响，空白值过高影响实验的精密度和准确度，氨氮实验空白值吸光度一般要求≤0.030.以实验用水代替样品，如标液操作，每批做平行双样测定，隔天重复测定一批，共测定三批。

3.3最低检测质量浓度计算

最低检测质量浓度反映实验方法的灵敏度。根据GB/T5750-2006《生活饮用水标准检验方法水质质量控制》中最低检测质量浓度的定义[3]：分光光度法中按净吸光度0.020对应的质量浓度。把净吸光度0.020代入上述回归方程计算得本次实验的氨氮最低检测质量浓度为0.024mg/L，与国标方法中提供的最低检测质量浓度吻合，表明具满意灵敏度。

3.4使用中纳氏试剂的验证

储存已久的纳氏试剂，使用前应先用已知浓度的氨氮标准溶液显色，核对吸光度是否偏离过大；加入试剂后2h内不得出现浑浊，否则应重新配制。

4小结

优化纳氏试剂的配制过程及方法，并通过空白值测定、校准曲线线性好坏及最低检测质量浓度来验收新购买或配制的氨氮纳氏试剂是否合格，保证精密度、灵敏度满足实验要求，以达到严格的实验室室内质量管理。

参考文献

[1]张瑶霞纳氏试剂配制中新技术应用的探讨[J]，能源与节能2012，01：57-58.

[2]刘卓慧李雨田等实验室资质认定工作指南第二版[M].

[3]生活饮用水标准检验方法［S］GB/T5750-2006.

[4]陈跃文田杉水中氨氮测定用纳氏试剂配制的探讨[J]，黑龙江环境通报2008，01.

[5]冯立顺刘洪燕纳氏试剂配置过程中的几个问题，德州学院学报[J]，2002，18（4）:43-44.

[6]崔临红超声波配制纳氏试剂的应用[J]，盐业与化工，2011，09（2）:39-40.