日常饮用水中微生物的检验

日常饮用水中微生物的检验

郑立军

讷河市质量技术监督检验检测中心

摘要：水是生命之源，每个人都离不开水。目前人们的日常饮用水都是经过一定特殊工艺处理而成的自来水，会经过沉淀、过滤和消毒等程序。但是尽管经过多道工序，依然会有少量微生物存在。若微生物超标，就会对饮用水的质量产生很大影响。为此在自来水处理中，必须要加强对微生物的检验。现本文就主要探讨了日常饮用水中的微生物检验问题。

关键词：饮用水；水质；微生物；检验

目前受各种工业建设与发展的影响，很多地方的地下水都被污染严重。为了保证人们的正常饮用水供应，需要对饮用水进行一定的消毒杀菌处理。在这一过程中，微生物的处理也是一项十分重要的工艺，若处理不当，使得微生物含量超标，也会对人们的生活造成极大影响。为此必须要加强对饮用水中的微生物检验。目前常采用的微生物检测方法主要有多管发酵法、滤膜法等。本文就对其具体检验方法进行探讨。

一、样品的采集

在生活饮用水检测中，应确保所采集的样品具有较强的代表性。进行样品采集时，应注意在无菌条件下进行操作。测试试验中所采用的容器必须经过严格的消毒和杀菌，在水样的采集、运输以及保存的全过程中，应确保水样不受到任何的污染。

（一）日常饮用水样品的采集

在进行自来水样品的采集时，应先用酒精灯对水龙头进行灼烧，主要目的是灭菌，灭菌以后，应将水龙头完全打开，并放水5-10min，当水管中积流的水完全排净以后再进行取样

（二）地面水水样的采集

在进行井水、江水、河水、湖水以及水库水等地面水水样的采集时，应在距离水面深度为10-15cm处进行采样。对于含有余氯的水样的采集，采样瓶在灭菌前应先沮洳一定量的硫代硫酸钠溶液，按照500ml的采样瓶1ml30g/LNa2S2O3溶液的比例加入，以将容器中可能存在的余氯还原。水样的采集、运输和保存均应做详细记录，如采样的地点、采样时间、采样人、样品来源、PH、水温、保存条件以及运输方式等。水样采集后4小时内应完成检验。

二、菌落总数的检验

菌落总数的检测方法一般以平皿计数法进行测定。需要同水源水细菌总数检验。首先，应在无菌条件下用灭菌吸管量取充分混合的水样1ml，并将其注入灭菌的平皿中，再倾入15ml左右的已融化且已冷却至45℃左右的营养琼脂，并立即将其充分摇匀。应注意的是，在每一次试验时，都应做一组平行接种试验，并用另一个只含有营养琼脂的平皿作为空白对照。待培养基冷却凝固以后，将平皿反转过来，使其底面朝上，并将其置于37℃左右的培养箱中培养48小时，然后进行菌落数的计量，也就是1ml的水样中细菌的总含量。

三、总大肠菌的检验

总大肠菌群主要包括柠檬酸杆菌属、埃希氏菌属、肠杆菌属以及克雷伯氏菌属，常用的检测方法有多管发酵法、滤膜法、酶底物法。

（一）多管发酵法

分别在2个已灭菌的50ml烧瓶或者大试管中加入一定量的三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液，并在无菌操作条件下向其中加入100ml的水。然后，在10支已灭菌的试管中分别加入5ml上述培养液，并在无菌条件下加入10ml水样，将其摇匀，然后将其置于温度为37℃的恒温箱中恒温培养24个小时。完成恒温培养后，计量总大肠菌数。

（二）滤膜法

滤膜法主要采用微孔滤膜（孔径为0.45μm）对水样进行过滤。微孔滤膜应粘贴在含有乳糖的选择培养基上，在温度为37℃条件下恒温培养24h，这种培养方法可以形成一类特殊的菌落，即需氧型和兼性厌氧型的革兰氏阴性无芽胞杆菌，可用于检测水中的大肠菌群的总量。

（三）酶底物法

在测定总大肠菌群时，常采用的一种方法是酶底物法。酶底物法是指在选择性的培养基上，通过培养可以产生一系列β-半乳糖苷酶的细菌群组。这种细菌群组能够对色原底物进行分解处理，同时释放出色原体，释放出来的色原体能够使培养基的颜色发生变化。可以利用这种性质来检测水样中的总大肠菌群。

酶底物法一般采用MMO-MUG培养基，测定方法有定性测定法和定量测定法两类。其中，定量测定法又可以分为51孔定量法和10管法，一般在37℃左右培养24小时，培养后能够产生β-半乳糖苷酶的细菌群组，这些细菌群组可以产生并分解出ONPG，从而使使培养基呈黄色。

采用酶底物法对引用水进行检测时，可以同时判断水中的大肠埃希氏菌以及大肠菌群。且该方法的检测时间比较短，一般情况下只需18-24小时即可，最长不超过28小时。并且不需要对试验进行验证，操作过程较为简便，对试验人员及试验条件等要求较低，但该方法需要采用压膜机，检测成本较高，在具体的检测项目中未广泛应用。

四、耐热大肠菌群的检测

耐热大肠菌群主要是指耐热克雷伯氏菌以及埃希氏菌属。一般采用滤膜法和多管发酵法进行测定。对于耐热大肠菌群的检测一般是通过提高培养的温度，是粪便中大肠菌群与自然环境中的大肠菌群区分开来，一般将44.5℃下仍能存活和生长的大肠菌群称为耐热大肠菌群。

五、大肠埃希氏菌的检测

大肠埃希氏菌的检测一般采用酶底物法、滤膜法或者多管发酵法。

（一）多管发酵法

采用多管发酵法检测大肠埃希氏菌时，总大肠菌群呈阳性。主要是在44.5℃条件下，在培养基中加入适量的荧光底物，在此基础上培养24小时可产生β-葡萄糖酫酸酶，β-葡萄糖酫酸酶能够将荧光底物分解，并释放出荧光产物，可以通过紫外灯照射从而使培养基产生一系列具有特征荧光的细菌群，从而对水中的大肠埃希氏菌进行检测。

多管发酵法一般采用EC-MUG作为培养基，在44.5℃左右培养约24小时，并用功率为6W的紫外灯在366nm下照射，是大肠杆菌生成β-葡萄糖酫酸酶，并进一步分解为MUG，在366nm的紫外光照射下，这些菌落产生蓝色的荧光，从而荧光强度及吸收值来测定大肠埃希氏菌。

（二）滤膜法

采用滤膜法检测水样时，先在培养基中加入有荧光底物，并将总大肠菌群置于阳性的滤膜上进行培养，菌群可以产生β-葡萄糖酫酸酶，可以对荧光底物进行分解，从而释放出荧光物质，可以使菌落在紫外光照射下产生一种特殊的荧光，可据此对水中的大肠埃希氏菌进行检测。该法一般也采用NA-MUG作为培养基，并在37℃条件下培养4小时左右，同样采用功率为6W的紫外灯在366nm下进行操作。

六、结束语

综上所述，在对日常饮用水进行检测的过程中，对微生物的检测具有重要意义。在实际检测工作中，我们要结合实践经验仔细分析各菌落群的检测方法，加强技术应用能力以合理准确地选择检测方法，确保人们生活用水的质量。

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