贵阳市2010-2013年活禽市场外环境禽流感病毒监测分析

贵阳市2010-2013年活禽市场外环境禽流感病毒监测分析

俞玫1洪峰1石作宏2陆朝国2陈梅2喻仙2

俞玫1洪峰1石作宏2陆朝国2陈梅2喻仙2杨鋆2

(1贵阳医学院公共卫生学院贵州贵阳550004）

（2贵阳市疾病预防控制中心550000)

【摘要】目的了解贵阳市活禽市场外环境禽流感病毒H5、H7、H9亚型污染状况，评估贵阳市市民发生人禽流感的风险。方法2010、2011、2012和2013年在全市活禽宰杀销售市场外环境采集笼具擦拭、粪便和污水标本，用实时荧光定量PCR法检测禽流感病毒FluA、H5、H7、H9核酸。结果2010年采集活禽市场外环境标本607份，FluA阳性179，阳性率为29.49%；2011年采集活禽市场外环境标本368份，FluA阳性82份，阳性率为22.28%；2012年采集活禽市场外环境标本468份，FluA阳性163份，阳性率为34.83%；2013年采集活禽市场外环境标本921份，FluA阳性82份，阳性率为8.90%。3种类型的标本中，污水的阳性率最高，其次是笼具擦拭标本，粪便的阳性率较低；各年各季节间标本阳性率差异有统计学意义。4年活禽市场外环境禽流感病毒检测均未检测出H7亚型。结论H5和H9亚型是主要的病原体，冬春季节是禽流感病毒的高检出季节，贵阳市活禽市场环境普遍存在高致病性禽流毒的污染，存在人感染高致病性禽流感的风险，应做好人禽流感的预防和应对。

【关键词】禽流感病毒活禽市场监测

【中图分类号】R195【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）28-0372-03

MonitoringandanalysisoflivebirdmarketexternalenvironmentofthebirdfluvirusinGuiyangcityfrom2010to2013

YUMei1,HONGFeng1,SHIZuo-hong2,LUChao-guo2,CHENMei2,YUXian2,YANGJun2

1.GuiyangMedicalUniversity,Guiyang550004；2.GuiyangCenterforDiseaseControlandPrevention550000

【Abstract】ObjectiveTounderstandthesituationofavianinfluenzavirussubtypeH5,H7,H9inlivebirdmarketofGuiyang,assessmentingtheriskofhumanavianinfluenzainGuiyangcity.MethodToCollectetheSewage,cagewipe,stoolsamplesoflivebirdmarketofGuiyangin2010,2011,2012,2013years.DetectingthenucleicacidofavianinfluenzavirusFluA,H5,H7,H9.ResultTocollecte607,368,468,921specimensoftheoutsideenvironmentoflivebirdmarketsrespectivelyIn2010,2011,2012,2013years,thenumberofpositiveFluArespectivelywere179,82,163,82.thepositiveraterespectivelywere29.49%,22.28%,34.83%,8.90%.ThepositiverateofSewage,cagewipe,stoolwererespectivelyhighest,second,lowest.Therewasstatisticalsignificanceinthedifferenceofpositiverateofspecimensofeachyeareachseason.TheavianinfluenzavirusH7werenotdetectedin4years.ConclusionTheavianinfluenzavirusH5H9subtypewerethepredominantpathogens,winterwasthehighseasonindetectingofavianinfluenzavirus,therewashighriskofhumaninfectionwithpathogenicavianinfluenza,thepreventionandresponseofhumanavianinfluenzashouldbedone.

【Keywords】Birdfluvirus;Livebirdmarket;Monitoring

禽流行性感冒（简称禽流感）是甲型流感病毒亚型引起的传染性疾病[1]。自从1997年以来发生的高致病性禽流感（H5N1）感染人类[2]以及2013年在我国首次发现的人感染H7N9禽流感病例表明，禽流感病毒可演化为人禽流感病毒而对人类造成严重威胁，对其疫情进行研究，结果表明人患禽流感主要与发病前2周内暴露于活禽市场有关[3-4]。2009年以来贵阳市共报告4例人禽流感病例（H5N1），其中3例明确发病前2周内到过禽类交易市场并在这些市场外环境中检测出H5亚型阳性[5]，故了解贵阳市活禽市场禽流感病毒的污染状况，可对贵阳市市民发生人禽流感风险做出科学的评估。对此，贵阳市疾控中心于2010年开展了活禽宰杀销售市场外环境禽流感病毒检测，现将结果报告如下。

1.材料与方法

1.1标本采集

在10个区县121个活禽市场选取30个作为监测点，根据《全国职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案》的要求，由专业人员采用拭子涂抹方法采集外环境笼具擦拭、粪便、污水标本。

1.2标本检测

根据《全国职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案》的要求，采用实时荧光定量PCR（聚合酶链反应）检测方法，用流感病毒A型通用引物分型，具体操作见全国流感/人禽流感监测与防治技术培训材料和相关商品化产品说明书。阳性结果用H5、H7、H9特异性引物进行病毒分型。灭活抗原、A型流感病毒核酸检测通用引物、探针和H5、H7、H9亚型用流感病毒禽流感病毒核酸检测引物、探针均由国家流感检测中心提供。

1.3资料分析标本信息录入Excel表格后应用SPSS21.0进行统计分析，采用卡方检验比较不同标本类型、不同季节标本阳性率的差异。设检验水准α=0.05，P＜0.05差异有统计学意义。

2.结果

2.1活禽市场外环境标本检测结果

2010-2013年4年共采集活禽市场外环境标本2364份，其中FluA阳性506份，各年采集的样本均有阳性，其阳性率在8.90%-34.83%之间，详见表1。

表12010-2013年活禽市场外环境标本检测结果

*表示：对FluA阳性进行分型，未能进一步分出其他亚型。

**表示：对FluA阳性进行分型，H5、H9亚型均阳性。

2.2不同类型外环境标本检测结果

2010-2013年4年共采集污水标本638份，阳性225份，阳性率在14.50%-51.61%之间；采集笼具擦拭标本988份，阳性187份，阳性率在6.91%-45.04%之间；采集粪便标本738份，阳性94份，阳性率在4.55%-18.78%。各年3种类型标本之间阳性率差异有统计学意义。详见表2。

2.3不同季节标本检测结果

2010-2013年各年各季节采集的标本均有阳性，其阳性率在3.24%-55.34%之间；各年各季节间标本阳性率差异有统计学意义。详见表3。

3.讨论

人感染高致病性禽流感病死率高，同时使家禽及相关产品的贸易受到很大的影响，引起世界各国政府和科技人员的关注[6]。自1997年香港发生人禽流感（H5N1）病例以来到2013年我国部分地区出现H7N9死亡病例，说明禽流感病毒不断发生变异，广泛感染人的风险在增加[7]。有研究表明，和禽类密切接触会增加感染的风险[8]-[9]，说明城乡活禽市场已成为禽流感病毒传播的重要渠道[10]。

2010-2013年贵阳市活禽市场外环境禽流感病毒标本检测阳性率分别为29.49%、22.28%、34.83%和8.90%，除2012年阳性率较高外，呈逐年下降趋势，但在活禽交易市场环境标本中，经检测均发现有禽流感病毒存在，说明贵阳市活禽宰杀销售市场存在人感染高致病性禽流感的风险；同时，贵阳市是贵州省的省会，是交通和经济的中心，人群密集，活禽交易市场人员流动大，人群购买活禽，普遍以点杀为主，禽类从业人员和市民均可以与禽类有密切接触，到过活禽交易市场是感染人禽流感的危险因素。政府应加强活禽市场的管理，建立健全活禽市场“三分离制度”，推行禽类定点屠宰，不准在农贸市场供应活禽，实施“白条禽”销售，减少普通人群与活禽接触的机会。有研究结果显示，市场一个星期开放7天是危险因素，每星期关闭1天以上，每天清洁和消毒是保护因素[11]，故应在农贸市场分类分区制定执行每周活禽休市制度，制定市场日常卫生消毒制定，安排专人负责每日对禽类市场进场彻底的清洁和消毒，减少禽流感病毒对环境的污染。

从活禽市场外环境4年的监测结果来看，3种类型标本中，污水的阳性率最高，其次是鸡笼涂抹标本，粪便的阳性率较低；由于污水样本是混合样本，故应加强对污水样本的采样监测，发现阳性结果后，科学合理地指导活禽市场进行消毒、杀菌、休市，降低人感染高致病性禽流感的风险；同时，该监测结果可用于评价活禽市场清洗消毒是否合格的敏感指标之一。

贵阳市2010-2013年不同季节外环境的监测结果说明，冬春季节是禽流感病毒的高检出率季节；我市4例人禽流感（H5N1）病例均发生在此季节，提示该季节是人禽流感发生的高危时期；由于该期间包含春节这一重大节日，到集贸市场采办年货的人员数量急剧增多，造成人感染高致病性禽流感的机会增加，应在各类人群中加强禽流感防控知识宣传力度，以改变人群点杀活禽的生活习惯为重点。

从贵阳市活禽市场的监测结果可知，活禽市场存在禽流感病毒的污染，评估贵阳市市民有发生人禽流感的风险。贵阳市相关部门应加强监测，规范化采样，提高病毒含量。贵阳市卫生部门应加强与农业部门的联系及沟通，加强信息交流，资源共享，建立部门之间的联防联控机制，科学应对人禽流感。

参考文献

[1]王陇德主编．人感染高致病性禽流感［M］．北京：人民卫生出版社，2007.4.

[2]张贵生.人禽流感流行病学特征分析．疾病监测，2007，22(1)：62-64.

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[6]黄建龙，范仲鑫，何世成，王洪冰，等.长沙市活禽批发市场鸡鸭禽流感病毒H5抗体监测[J].动物医学进展，2013,34（5）：131-133.

[7]朱军礼，张子根，王凤英，等.职业暴露人群人感染高致病性禽流感H5N1风险研究进展[J].中国预防医学杂志，2012,13(10)：799-802.

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[9]王敏,许培扬,池慧,等.中国大陆H5N1亚型人禽流感流行病学分型[J],2009,38(4)：3-6.[10]陈华兰.禽流感监测及研究进展[J].中国家禽，2010,32（22）：33.

[11]GarberL,VoelkerL,HillG,etal.DecriptionoflivepoultrymarketintheUnitedStatesandfactorsassociatedwithrepeatedpresenceofH5/H7low-pathogenicityavianinfluenzavirus[J].AvianDis,2007,51:S417-S420.