应用磁分离酶联免疫法测定甲状腺功能及其临床应用

应用磁分离酶联免疫法测定甲状腺功能及其临床应用

焦化平

焦化平（黑龙江省农垦北安分局赵光农场疾控中心154006）

【中图分类号】R581【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)14-0030-02

【摘要】应用磁分离酶联免疫测定法测定血清中TSH、T3、T4、FT3、FT4五项指标。健康人组(n=100)，建立本实验室正常参考值。各型甲状腺机能亢进人组(n=68)，甲状腺机能减退人组(n=22)；各种急性或慢性全身性疾病的患者，其中，心肌梗塞12人；充血性心力衰竭8人；肝炎、肝硬化10人；脑血管疾病11人；呼吸道感染21人。结果表明：健康人组血清TSH水平略呈偏态分布，第2．5～97．5百分位数范围为(0．29～5．70)mIU／L；血清T3水平呈正态分布，X=2.76、S=1.02、正常参考值(1.74～3.78)mmol／L；血清T4水平呈正态分布X：84．82、S=26．23、正常参考值范围(58．59～111.05)mmol／L；血清FT3水平呈正态分布，X=2.06、S=0．88，正常参考值范围(1.18～2.94)pmoL／L；血清FT4水平呈正态分布X=8.53、S=3.03，正常参考值范围(5.5～11.56)pmol／L。甲亢初诊患者TSH水平降低，T3、T4、FT3、FT4有不同程度升高；甲状腺机能减退患者TSH水平升高，T3、T4、FT3、FT4有不同程度降低；各种急性或慢性全身性疾病患者TSH水平与正常组无显著差异，T3、FT3、FT4正常或略低，T4正常或升高；另外，实验观察TSH、FT3、FT4三项指标诊断甲功在敏感性和特异性上超过T3、T4两项指标。磁分离酶联免疫法是一种灵敏、特异、有效、且无放射污染的免疫化学检测技术。

【关键词】腺原氨酸(T3)四碘甲状腺原氨酸(T4)游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)

1对象与方法

1.1研究对象

正常人组100例，年龄19～71岁，男42例，女58例，来自体检血标本。本院门诊及住院病人142例，其中甲亢68例、甲减22例、心肌梗塞12例、心力衰竭8例、肝病10例、脑血管病11例、呼吸道感染21例，年龄14～75岁，女95例，男47例。

1.2方法

(1)血标本。真空管采静脉血、离心分离血清、4℃贮存、五天内完成检测。

(2)测定方法。SEROZYME-Ⅱ型内分泌定量测定仪、TSH-MAIA试剂盒、T3-MAIA试剂盒、T4-MAIA试剂盒、FT3-MAIA试剂盒、FT4-MAIA试剂盒。加拿大BiochemImmunosystems公司生产，北京倍爱康生物技术有限公司提供，用荧光素、碱性磷酸酶分别标记的单克隆(TSH、T3、T4、FT3、FT4)抗体与样本中的TSH、T3、T4、FT3、FT4结合，继而用抗荧光素抗体偶联的磁性微粒分离结合及游离碱性磷酸酶标记抗体，经洗涤后加单磷酸酚酞底物，加NaOH终止酶反应、用SEROZYME-Ⅱ型内分泌定量测定仪同时测定三波长(492nm／550nm／630nm)下的吸光度，仪器内微机软件自动拟合标准曲线，计算并打印出待测样本结果。

2结果

健康人血清TSH、T3、T4、FT3、FT4水平，例数100人。

(1)血清TSH水平经频数分布表观察略呈偏态分布，采用95％可信限2．5％～97．5％范围值，为0．29～5．70mIU/L。

(2)T3、T4、FT3、FT4进行频数分布D检验，其D值分别为D1=0．2833，D2=0.2798，D3=0.2814，D4=0.2836、当∑f=100时，D0.05(0.2745～0.2860)、D0.01(0．2714～0．2896)，可见P>0.05，故认为T3、T4、FT3、FT4来自正态分布总体，其平均值±标准差得正常参考值，分别为：T3(1．74～3．78nmol/L)、T4(58.59～111.05nmol/L)，FT3(1．18～2．94pmol/L)，FT4(5.5～11.56pmol/L)。

(3)病人血清TSH、T3、T4、FT3、FT4五项指标观察甲亢组68例、其中60例TSH下降，占88．24％，5例上升，3例正常；T3测定，其中65例上升，占96％；T4测定，其中60例上升，占88％；FT3测定，其中67例上升，占98％；FT4测定，其中61例上升，占89％；甲减组22例，TSH测定，其中21例上升，占95．5％；T3测定，其中17例下降，占77％；T4测定，其中20例下降，占90％；FT3测定，其中18例下降，占81％；FT4测定，其中20例下降，占90％。各种急性或慢性全身性疾病患者、心肌梗塞12人，TSH测定11人正常，1人下降；T3测定，8人正常，4人略低；T4测定，7人上升，5人正常；FT3测定，11人正常；FT4测定，9人正常，4人上升。肝病10人，TSH测定，1人下降，9人正常；T3测定，7人正常，3人略低；T4测定，5人上升，5人正常；FT3测定，9人正常；FT4测定，9人正常，1人下降。脑血管病11人，TSH测定，8人正常；T3测定，9人正常；T4测定，7人正常；FT3测定，11人正常；FT4测定，9人正常，2人上升。心力衰竭8例，TSH测定，8人正常；T3测定，8人正常；T4测定，4人上升；FT3测定，8人正常；FT4测定，7人正常，1人上升。呼吸道感染21例，TSH测定，18人正常，3人下降；T3测定，12人正常，2人上升，7人略低；T4测定，13人上升，8人正常；FT3测定，20人正常，1人上升；FT4测定，18人正常，3人上升。各种急性或慢性全身性疾病患者，87％TSH正常；T3测定，70％正常；T4测定，50％上升；FT3测定，95％正常；FT4测定，85％正常。

3分析与讨论

本实验室于1998年引进了SEROZYME-Ⅱ型内分泌定量测定系统，通过对100例正常人血清TSH、T3、T4、FT3、FT4进行严格规范测定、建立了本实验室的MAIA正常参考值范围，并参考放射免疫法的参考值，对临床患者进行测定，结果表明对各型甲亢、甲减的诊断具有较高的可靠性，特异性。本次实验结果显示，甲功五项指标在临床分析方面的综合性很强，不同检测指标测定值的增减反应的临床甲亢类型不同，如：TSH下降、T3升高、T4正常、FT3升高、FT4正常。在甲亢早期T3首先升高，随病情变化T4与FT4均升高。本实验显示，FT3、FT4比T3、T4敏感，灵敏度高。垂体分泌TSH肿瘤，下丘脑性甲亢，TSH、T3、T4、FT3、FT4均升高。患各种急性或慢性疾病的患者，T4水平升高，但TSH、T3、FT3、FT4基本正常。甲减患病组TSH升高95.5％，T4、FT4首先下降，早于T3、FT3。

SEROZYME-Ⅱ型内分泌定量测定系统，免除了对人和环境有害的放射性物质污染，各项测定指标可与放射免疫法相媲美，具有较高的精密度和灵敏度。采用630nm、550nm、492nm三波长测定，消除了干扰，拓宽了线性测量范围，显色稳定，因此是一项很有发展前途的检测方法。

参考文献

[1]侯永健，赵燕琴，朱新民，等．TSH、FT3、FT4诊断甲状腺功能亢进的评价与T2、T4比较．中华内分泌代谢杂志，1993，233～235.

[2]史爱兰，王麒玉，罗素珍．TSH、MAIA、FT3、FT4、T3、T4联合检测甲状腺功能．中华医学杂志，1991，11(增刊)：31.