分光光度法保温时间对于血栓通含量测定的影响

分光光度法保温时间对于血栓通含量测定的影响

黄伟可

黄伟可（广西梧州中恒集团梧州制药股份有限公司543000）

【摘要】目的通过不同的保温时间对血栓通含量的影响，来验证所采用的分析方法的科学性、准确性和可行性，以充分表明该检验方法的适用性。方法用不同的保温时间所测得的分光光度法结果与高效液相色谱法的结果相比对。结论分光光度法的保温时间对于三七总皂苷的含量测定有比较大的影响，并且在15至30分钟的时间内较为精确。

【关键词】分光光度法保温时间血栓通注射液含量

【中图分类号】R927.2【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2013）13-0310-02

血栓通注射液主要成份为五加科植物三七主根提取的三七总皂苷，经用现代科学方法加工提炼而制成的中药水针剂，具有活血祛瘀、扩张血管、改善血液循环的功效。[1]为了控制该药的质量，本研究对该药中的三七总皂苷含量保温时间不同对其含量的影响与用高效液相色谱仪所测的含量结果进行比对。

1仪器与试药

1.1仪器安捷伦Agilent-1200高效液相色谱仪；紫外分光光度计：UV－2550；百万分之一天平AT006。

1.2试药血栓通注射液梧州制药集团股份有限公司产品；人参皂苷Rg1(C42H72O14)对照品购于中国药品生物制品检定所；其它化学试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1分光光度法

2.1.1方法

a)测定波长：560nm

b)对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品10mg，精密称定，置100ml量瓶中,用无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得每1ml含0.1mg对照品的对照品溶液。

c)供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，加无水乙醇至刻度,摇匀，精密量取2ml，置25ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。

d)测定方法：精密量取无水乙醇、供试品溶液各1ml，和对照品溶液0.4ml;0.6ml;0.8ml;1.0ml;1.2ml分别置10ml具塞试管中，在水浴上蒸干，放冷，加入5%香草醛冰醋酸溶液0.2ml，再加入高氯酸0.8ml，于60℃保温0；15；30；60；240分钟，冷却至室温，加冰醋酸5ml，摇匀，以无水乙醇管作空白对照。

e)本品每支含三七总皂苷以人参皂苷Rg1(C42H72O14)计，应为标示量的90.0～110.0%。[2]

2.1.2结果：见表1

表1.分光光度法在不同保温时间下测定结果

2.2高效液相色谱法：

2.2.1方法：分别用两台仪器对同一批产品各平行检测三次（2×3），按照高效液相色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥD）[3]测定。

2.2.2结果：见表2

表2.高效液相色谱法测定结果

结果表明：人参皂苷Rg1在保温15～30分钟中氧化还原反应稳定、完全，结果与高效液相色谱法偏差最小。

3.讨论

从实验的结果可以看出，未经过保温时含量出现严重偏差（RSD%=4.0%），这是由于香草醛的显色不够充分所致；

在15至30分钟两个时间段内，结果与液相色谱法测定的结果无较大偏差（RSD%＜2.0%），说明在这个时间段内的测量值是比较精确的，但是从结果我们又可以看出30分钟时测得的含量有一个下降的趋势，而且到了60分钟再次测量的结果比液相色谱法的测量值有明显的降低，这有可能是待测溶液在放置之后，其中的三七总皂苷有一个缓慢的水解过程；

当测定时间为240分钟时，待测溶液中的含量出现一个非常大的反跳，并且与液相色谱法的含量有明显的区别，这可能是放置过长的时间后，香草醛被空气氧化，导致颜色加深。

从以上结果讨论中可以看到这样一个现象，分光光度法的保温时间对于三七总皂苷的含量测定有比较大的影响，并且在15至30分钟的时间内较为精确，因此建议在使用分光光度法测定三七皂苷的含量时，保温时间以15分钟为宜，并且测定的时间要尽可能减短，以免受到其他因素的影响。

参考文献

[1]陈旭,吴旭霞,赵喜荣.注射用血栓通联合抗生素引起五粒不良反应分析[J].实用药物与临床.2(15),2002:102-103.

[2]《国家药品标准》WS3-B-3829-98-2011.

[3]《中国药典》2010年版一部ⅥD.36-38.