丹参对扑热息痛致小鼠肝损伤的保护研究

丹参对扑热息痛致小鼠肝损伤的保护研究

陈頔郭云李正勇肖敏彭淑仪刘莹罗佳

长沙医学院湖南长沙410219

【摘要】目的研究丹参对扑热息痛诱导的化学性肝损伤的保护作用。方法用150mg/kg扑热息痛灌胃造模后，测定小鼠体重并计算肝脏系数。检测小鼠血清肝功能指标。结果中浓度与高浓度均能明显降低血清中ALP，LDH含量，低浓度降低的不明显。结论丹参对扑热息痛诱导的肝损伤具有一定的保护作用与保护效果。且高浓度丹参组较为明显，中浓度丹参组次之。

【关键词】丹参；扑热息痛；肝损伤

扑热息痛（Acetaminophen，APAP）又称对乙酰氨基氛，是替代阿司匹林的解毒镇痛药，大剂量或长期服用时，可导致严重毒性效应。特别是以肝脏小叶中央型坏死为常见。在摄入量超过机体代谢限度时，有毒代谢产物未能及时处理，就与肝细胞膜结合，引起细胞膜脂质过氧化反应，破坏细胞内钙离子平衡，导致细胞死亡，造成肝损伤。目前以丹参为原料的中药制剂、西药注射剂和保健产品在市面上已经出现，为推广其应用范围，本文从实验角度通过建造小鼠肝损伤模型对中药丹参不同剂量保护方面的作用进行了研究。

1.材料与方法

1.1试剂与设备

扑热息痛（Sigma公司）、丹参（生产厂家：吉林省鑫辉药业有限公司），4%多聚甲醛，苏木素染料（Hematoxylin，H），1％伊红染料（Eosin，E），苦味酸——酸性品红（Van.Gieson，VG）染色试剂盒，石蜡切片机，光学显微镜。

1.2动物

成年健康昆明小鼠50只，雌雄各半，体重18-22g，购于湘雅二医院动物房。

2方法

2.1分组与造模

将昆明小鼠随机分成5组，即空白对照组，模型对照组，低浓度丹参组，中浓度丹参组，高浓度丹参组，每组10只，雌雄各半。各给药组每日按100mg/kg，200mg/kg，400mg/kg三个剂量的丹参灌胃两次，连续8周。末次给药后，出空白对照组外，其余各组均灌胃扑热息痛混悬液（150mg/kg，1%CMC-Na配成2.5%的混悬液）20ml/kg，14h后脱颈椎处死小鼠。

2.2小鼠血清的制备

摘除小鼠眼球取血，静置，3000转/min，离心10min，分离血清，冷藏备用。

2.3测定指标与方法

碱性磷酸酶（ALP）乳酸脱氢酶（LDH）使用试剂盒检测

3实验结果

下表为5组小鼠的肝脏重量以及肝脏脏器指数

以上结果表明，给予扑热息痛后，肝损伤组的ALP，LDH含量均明显升高，与正常对照组比较有明显差异（P<0.01），说明造模成功。各给药组的ALP，LDH含量以高浓度丹参组较为显著（P<0.01），中浓度丹参组次之。

4讨论

APAP是导致急性肝衰竭的主要原因，其机制是：扑热息痛进入体内在磺基转移酶和UDP-葡萄糖醛酸转移酶的催化下，90%的APAP分别与硫酸盐和葡萄糖醛酸结合，形成无毒物质从尿液中排出，约有5%未参与生物转化的APAP以原形从尿液中排出，余下的部分排肝细胞内质网中的细胞色素P450酶系统所代谢。【1】在有NADPH的存在下，APAP【2】可转化为肝毒性物质N-乙酰对苯醌亚胺（NAPQI），GSH可与其结合减轻肝毒素作用。当APAP过量时，大量的磺基转移酶和UDP葡萄糖醛酸转移酶被消耗，使得肝细胞中的NAPQI过度集中，与肝脏中的酶系统和非酶系统结合，形成肝毒性产物，形成肝损伤。而作为血清中检测肝脏的指标，LDH与ALP同样起到了重要作用，正常小鼠的LDH与ALP维持130.00以内，当数值大于范围则可推断小鼠的肝发生病变（肝硬化，肝炎，肝癌等等）

参考文献：

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通讯作者：罗佳

基金项目：湖南省大学生创新课题，项目基金编号：湘教通【2016】185-769