皱皮木瓜注射液镇痛抗炎作用的实验研究
杨兴海(三峡大学医学院湖北宜昌443002)
【中图分类号】R969.4【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2009)05-0007-02
【摘要】目的观察皱皮木瓜注射液(MGI)的镇痛抗炎作用。方法采用热板法测定MGI对小鼠镇痛阈值的影响,扭体法测定MGI对小鼠扭体反应的潜伏期和扭体次数的影响;观察醋酸致炎后MGI对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响;采用蛋清致大鼠足肿胀关节炎模型,观察MGI对大鼠足肿胀的影响。结果MGI对小鼠热板法和扭体法疼痛模型均有显著镇痛作用;0.80g/kg对热板法90min时的痛阈提高率达49.5%;对醋酸致小鼠扭体疼痛痛阈提高率达88.7%;对小鼠毛细血管通透性增高和大鼠蛋清性足肿胀均有显著的抑制作用。结论MGI具有肯定的抗炎镇痛作用。
【关键词】MGI镇痛作用抗炎作用
皱皮木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomelesspeciosa(Sweet)Nakai的成熟果实,分布广泛,主产于安徽、湖北、四川等地,经植化研究分析,皱皮木瓜的主要化学成分为有机酸、皂甙及黄酮类[1-3]。皱皮木瓜作为一种常用中药,味酸、温,入肝、脾经,有舒肝止痛、祛风除湿之功效,可用于治疗风湿病、痢疾和肠炎等。皱皮木瓜成分复杂,药理作用广泛。本实验利用皱皮木瓜注射液(MGI),观察其镇痛及抗炎作用,为抗炎镇痛、抗风湿等疾病提供临床佐证。
1实验材料与仪器
1.1药物MGI由宜昌民康药业公司代为加工,每毫升含生药0.25g,质量控制符合《中国药典2000年版中药注射剂部颁标准》。阿斯匹林胶囊,浙江医药股份有限公司新昌制药厂。
1.2动物昆明种小鼠和Wistar大鼠,清洁级,由三峡大学实验动物中心提供。
1.3仪器PV-200型鼠足跖容积测量仪(成都泰盟科技有限公司);UV-2100型紫外可见分光光度计(尤尼科仪器有限公司);LDZ5-2型自动平衡离心机(北京医用离心机厂)。
2实验方法与结果
2.1对小鼠热致痛的影响(热板法)[4]
在55±0.5℃的恒温水浴中,置烧杯1只,每次取雌性小鼠1只,放入烧杯内,记录小鼠自放入烧杯至出现舔后足所需时间(s),作为该鼠正常痛阈值。凡30s不出现舔后足者,弃之不用。取合格雌性小鼠30只,体重18-22g,随机均分3组,分别按表1腹腔注射供试液,对照组给予等量生理盐水(NS),给药后30、60、90min测定各鼠痛阈值,并计算用药后痛阈提高百分率。结果见表1。
表1MGI对热致痛(热板法)致小鼠疼痛反应的影响(x±s,n=10)
组别剂量/(g/kg)痛阈值/s痛阈提高率%
30min60min90min30min60min90min
NS/12.8±2.715.4±3.215.9±1.9///
MGI0.8017.5±3.627.0±7.3**31.5±3.1**26.8±4.043.0±2.6**49.5±3.6**
MGI0.4015.0±3.320.0±3.8*29.0±4.9**16.1±1.623.8±2.845.2±3.1**
与NS比较:*P<0.05;**P<0.01
表1说明,热板法镇痛实验表明MGI对小鼠有显著的镇痛作用,且有一定的剂量依赖性。
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2.2扭体法镇痛实验
小鼠30只,雌雄不拘,体重18-22g,随机均分3组,各组小鼠按表2腹腔注射给予供试液,给药30min后,各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml/只,观察注射醋酸后30min内出现扭体反应次数及出现扭体反应时间,并计算镇痛百分率。结果见表2。
表2MGI对醋酸致小鼠扭体疼痛实验的影响(x±s;n=10)
组别剂量/(g/kg)扭体次数扭体出现时间/min镇痛率%
NS/27.3±12.63.6±2.40
MGI0·82.6±2.7**8.9±2.7*90.4**
MGI0·43.5±2.1**5.5±1.7*87.1**
与NS比较:*P<0.05;*P<0.01
从表2可见,MGI扭体法镇痛实验表明,该药与NS比较,不仅有显著的镇痛作用,且对醋酸所致疼痛时间明显延长。
2.3对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响[4]
小鼠40只,雌雄不拘,体量18-22g,随机均分4组,分别腹腔注射供试液,给药后1h,各鼠尾静脉注射2%伊文斯蓝0.1ml/只,并同时腹腔注射0.6%醋酸0.2ml/只,20min后断头处死小鼠,剪开腹腔,用蒸馏水冲洗数次,收集冲洗液体积为达10.0ml,离心5min(1000r/min),用UV-2100型紫外可见分光光度计在590nm处测定吸光度。结果见表3。
表3MGI对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(x±s;n=10)
组别剂量/(g/kg)吸光度(x±s)
NS/0.23±0.031
MGI0.800.13±0.04*
MGI0.400.15±0.03*
阿斯匹林0.300.12±0.05**
与NS比较:*P<0.05;**P<0.01
表3表明,MGI两个剂量组对小鼠腹腔毛细血管通透性增高均有显著的抑制作用。
2.4MGI对蛋清所致大鼠足肿胀的影响[3]
取Wistar大鼠24只,雌雄兼用,体重160-180g,随机分成4组,给药前用成都泰盟科技有限公司产PV-200型大鼠足跖容积测量仪测定各鼠右后足跖的体积。按表4腹腔注射供试液,给药后30min,于右后足跖皮下注射新鲜鸡蛋清0.1ml/只,分别测定致炎后1、2、
4、6h大鼠原发侧足跖体积,计算足肿胀百分率,结果见表4。
表4说明MGI对大鼠蛋清性足肿胀有显著的抑制作用,但不及阿斯匹林。
表4MGI对蛋清所致大鼠足肿胀的影响(x±s,n=6)
组别剂量/(g/kg)致炎后不同时间肿胀率(%)
1h2h4h6h
NS/-55.3±7.055.5±11.356.2±10.757.4±8.6
MGI0.8051.8±8.341·3±7·6*31.6±7.3**23.1±7.6**
MGI0.4053.8±6.351·7±9·343.7±6.6**37.3±8.3**
阿斯匹林0.3037.5±8.2**31·8±8·8**17.5±3.1**16.8±5.1**
与NS比较:*P<0·05;**P<0·01
3讨论
本研究采用热板法(热刺激)和扭体法(化学刺激)不同动物模型观察了MGI的镇痛作用。热板法反映的是躯体体表痛,而扭体法代表的是内脏化学性刺激痛。热板法引起的是时相性急性痛,而扭体法引起的是紧张性的病理性疼痛[5]。本实验中,MGI无论对醋酸所致小鼠扭体反应的内脏痛,还是对热板法所致躯体体表痛均具镇痛作用。提示MGI在镇痛作用上无特异性,即对紧张的
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病理性疼痛(内脏痛)和对时相性急性痛或体表痛无明显差异。
MGI对小鼠毛细血管通透性增高、大鼠蛋清性足肿胀均有显著的抑制作用,由此表明了资木瓜的临床应用基础。皱皮木瓜化学成分复杂,其中的物质基础和深入的药理学机制是本实验室正在研究的方向。
参考文献
[1]杨兴海,柳蔚,钱京萍.资木瓜乙醇提取物对胃肠道平滑肌的实验研究[J].四川中医.2004,22(3).
[2]刘朝霞,杨兴海,邹坤,等.大孔吸附树脂分离纯化资木瓜黄酮的研究[J].中国中药杂志,2008,31(1).
[3]吴虹,魏伟,吴成义.木瓜化学成分及药理活性的研究[J].安徽中医学院学报,2004;23(2):62-64.
[4]陈奇主编.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1993.384.
[5]Cull-CandyS,BrickleyS,FarrantM.NMDAreceptorsubunits:persity,developmentanddisease.CurrOpNeuro?iol?200?,11?3):?27.?