冰冻机采血小板解冻致絮状物析出情况分析与对策

冰冻机采血小板解冻致絮状物析出情况分析与对策

徐燕刘保霞敖常青

徐燕刘保霞敖常青（河南省焦作市中心血站河南焦作454000）

【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）32-0146-02

【摘要】目的分析冰冻机采血小板解冻情况。方法分析683U冰冻机采血小板解冻过程中出现絮状物凝块的原因。结果血小板收集浓度不同，析出发生率的差异有显著性；融化温度、DMSO加入速度对血小板质量有显著影响；血小板采后震荡可明显降低冰冻机采血小板融化析出率。结论冰冻血小板采集、制备、冻融等各个环节必须严格质量控制，规范操作规程以确保血小板质量。

【关键词】冰冻机采血小板解冻絮状物

成分输血已在临床得到普及与推广，血小板的输注已成为治疗各种血小板减少或血小板功能障碍等疾病的重要治疗手段。冰冻机采血小板因其可大量储备、有效期长、止血效果理想等特点，成为临床输血不可或缺的采集手段。但冰冻机采血小板的制备技术要求高、操作严格，在解冻冰冻机采血小板时极易致使絮状物析出。笔者自2009年6月—2011年6月通过对683U冰冻机采血小板解冻致絮状物析出情况进行总结，分析析出原因及对策，浅议如下。

1一般资料

1.1仪器试剂血细胞分离机trimaaccel（科安比斯特公司），-80℃超低温冷冻冰箱（SANYO）、澳斯帮PC1200i血小板振荡仪、PH-IA恒温循环解冻箱、百级净化台、一次性注射器、二甲基亚砜（DMSO）、上海康德来集团生产的加样件。样本来源：2009年6月—2011年6月采集的683U冰冻血小板。

1.2血源筛选血小板供者的选择符合国家规定的《献血者健康检查标准》，血常规检查各项正常：血红蛋白男≥120g/L，女≥110g/L，血小板计数≥150×109/L，红细胞压积0.35－0.50，血小板形态和功能正常，体重≥50kg，ALT≤40IU，采血前72h禁服阿司匹林类药物；机采血小板间隔时间≥1个月。

2方法和结果

2.1机采血小板的制备应用血细胞分离机trimaaccel采集。选择合适的穿刺点，严格无菌操作并确保进针顺利。按照血细胞分离机的操作规程选择体重、身高、性别、血小板计数、压积、采血量等技术参数。保证机采整个过程的顺利，确保新鲜机采血小板的质量。

2.2机采血小板置于（22±2）℃血小板振荡保存箱水平振荡至血小板完全解聚，保存有效期内在百级超净工作台内按无菌操作要求以1ml/min速度缓慢加入DMSO，使最终浓度达到（5±1）%，并使DMSO与机采血小板悬液体充分混匀。加药后的机采血小板迅速平放于-80℃的低温冰箱内冻存血用。

2.3冰冻保存机采血小板的解冻方法复融时，从-80℃的低温冰箱内冻存成制品的冰冻机采血小板，立即放置于40℃恒温循环解冻箱中解冻，使机采冰冻血小板在5分钟融化，观察解冻机采冰冻血小板，正常应为无溶血、无气泡、无变色、无凝块、均匀一致的混悬液。我们在683U冰冻机采血小板的解冻过程中，发现出现絮状物析出有58U例，析出率8.5%。

3讨论

根据冰冻机采血小板制备、保存、复融过程及机采血小板本身的特点，分析总结出现絮状物析出的原因有：1）机采血小板献血员本身因素。如机采前的饮食致脂肪血、因红细胞混入出现血小板计数不准确、血小板计数分布出现双峰或多峰等，都是影响冰冻机采血小板溶解后是否出现絮状物的原因；2）制备机采冰冻血小板过程中DMSO的浓度影响，有文献报导5%浓度的DMSO可以较好的对冰冻血小板起到保护作用；3）制备冰冻机采血小板时加入DMSO的速度和摇匀情况对絮状物凝块的影响，注射时注意保持匀速，并且过程中应充分摇匀，避免因加药速度过快致血浆蛋白变性；4）（22±2）℃血小板振荡保存箱保存时间，发现保存时间越长，冰冻机采血小板复融后越容易出现絮状物凝块；5）机采血小板存储温度和冻存中的袋与袋间的的放置也是影响冰冻机采血小板复融后絮状物出现的因素，制备后的机采血小板保存温度不高于-65℃，最好存放在-80℃的专用冰箱，袋与袋间就留有空隙，并加以平放，尽量减少堆码层数，使血小板尽快降温至-80℃。使其快速通过冰点，彻底停止细胞代谢，瞬间达到冷冻效果，最大程度地保持细胞活性；6）解冻过程慢或水温不稳定都可导致冰晶形成而影响冰冻机采血小板质量，造成絮状物析出。

总之，造成冰冻机采血小板解冻后絮状物析出的原因是多方面的，通过对冰冻机采血小板的采集、制备、保存和解冻过程的观察分析，笔者认为DMSO的注入是关键。因此，加强该环节的监控，增强员工的责任心，严格执行操作规程，并提升技术操作的自动化，能够有效控制絮状物析出。