毛鸡药酒的检测方法研究

毛鸡药酒的检测方法研究

宋丽莉

宋丽莉（广州王老吉药业股份有限公司广东广州510450）

【中图分类号】R284【文献标识码】B【文章编号】1672-5085（2013）20-0391-02

【摘要】目的研究制定毛鸡药酒的检测方法。方法采用薄层色谱法对毛鸡药酒中红花和赤芍药材进行鉴别；采用高效液相法对白芷药材中欧前胡素进行含量测定；流动相：甲醇-水（65∶35）；流速：1.0ml/min；柱温：40℃；检测波长：300nm。结果薄层色谱专属性强，方法可行；欧前胡素：在1.8752～120.0112μg之间呈良好的线性关系，回归方程为Y=29.145x－12.663，R2=0.9998（n=7），平均回收率为99.33%，RSD=1.74%（n=6）。结论本方法简便、准确，专属性强，为提高毛鸡药酒质量标准提供依据。

【关键词】毛鸡药酒红花赤芍欧前胡素薄层色谱法高效液相法

StudyOntestmethodsofMaojiyaojiu

SongLili（GuangzhouWanglaojiPharmaceuticalCompanyLimited,GuangzhouGuangdong510450）

【Abstract】ObjectiveOurpurposeistoestablishtestMethodsforMaojiyaojiu.MethodWeuseTLCtoidentifytheCarthamiFlosandthePaeoniaeRadixRubra.WeuseHPLCtodeterminethecontentofImperatorinwithintheAngelicaeDahuricaeRadix.Mobilephase:Methanol–Water(65:35);Flowrate:1.0ml/min;Columntemperature:40℃;Detectionwavelength:300nm.Results:TheTLCmethodisspecificandfeasible.FortheImperatorin,itshowsagoodlinearrelationshipintherangeof1.8752～120.0112μg.TheregressionequationisY=29.145x－12.663，R2=0.9998（n=7）andtheaveragerecoveryis99.33%,RSD=1.74%(n=6).ConclusionMethodsweusearesimple,accurateandspecific.TheycanbeusedtoasabasisfortheimprovementofthequalitystandardofMaojiyaojiu.

【Keywords】MaojiyaojiuCarthamiFlosPaeoniaeRadixRubraImperatorinTLCHPLC

毛鸡药酒是由干毛鸡、当归、川芎、白芷、红花、赤芍、桃仁、千年健和茯苓等9味药材制成的酒剂。温经祛风，活血化瘀。用于产后眩晕，四肢酸痛无力，痛经。收载于卫生部《药品标准》中药成方制剂第2册[1]。关于白芷中欧前胡素成分的测定已报道多种方法[2-3]。为提高该酒剂的质量标准,本文初步对红花和赤芍进行薄层色谱鉴别，对白芷采用高效液相色谱法进行含量测定的研究。以更精确的控制和监测药材的投料量，并以其为更好地控制毛鸡药酒的内在质量提供实验基础研究。

1.仪器、试剂与药品

Agilent1100高效液相色谱仪；电子天秤：Sartorius-CPA225D，十万分之一；CMAGREPROSTARⅡ型号成像系统；硅胶G板（烟台市化学工业研究所）；甲醇（色谱纯），水（超纯水）；其余试剂均为分析纯；红花对照药材（中国药品生物制品检定所，批号：120907-200609供鉴别用），芍药苷和欧前胡素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110736-201035、110826-2005117供含量测定用）；毛鸡药酒和缺红花、赤芍、白芷阴性样品（由我公司提供）。

2.实验方法与结果

2.1薄层色谱鉴别

2.1.1红花：取本品50ml，置水浴中蒸干，残渣加80%丙酮1ml溶解，作为供试品溶液。同法制成缺红花的阴性对照溶液。另取红花对照药材0.5g，80%丙酮5ml，超声处理10min，静置，取上清液，作为对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录ⅥB）试验，吸取上述溶液各6μl，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－甲醇－水（5：1：5）的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。结果见附图1。

图1：红花薄层色谱图

溶剂前沿→

12345

1、2、3毛鸡药酒（批号；111101、111201、111202）;4、红花对照药材;5、阴性对照溶液。

2.1.2赤芍：取本品60ml，置水浴中蒸干至约5ml，加在中性氧化铝柱（100～200目，5g，内径1.5cm）上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。同法制成缺赤芍的阴性对照溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录ⅥB）试验，吸取上述溶液各8μl，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见附图2。

图2：赤芍薄层色谱图

溶剂前沿→

12345

1、2、3毛鸡药酒（批号；111101、111201、111202）4、芍药苷对照品5、阴性对照溶液

2.2白芷含量测定

2.2.1色谱条件及系统适应性试验：色谱柱：Diamonsil-C18（250mm×4.6mm×5mm），流动相；甲醇—水(65∶35)，流速：1ml/min，柱温：40℃，检测波长为300nm，。理论板数以欧前胡素计算应不低于3000。欧前胡素峰与相邻峰之间的分离度均＞1.5[4]。对照品、样品溶液和阴性对照溶液色谱图见图3。

图4：从上至下为：对照品溶液、样品溶液和阴性对照溶液色谱图

2.2.2检测波长的确定：Agilent高效液相色谱仪，DAD检测器，对欧前胡素对照溶液进行光谱扫描，波长范围为200～400nm，结果欧前胡素在300nm处有最大吸收，故确定欧前胡素测定波长为300nm。结果见图4。

图5：欧前胡素光谱扫描图

2.2.3溶液配制

2.2.3.1对照品溶液的配制：取欧前胡素对照品适量，精密称定，加甲醇配制成每1ml含15μg的溶液，即得。

2.2.3.2供试品溶液的配制：取本品5ml，精密量取，置10ml量瓶中，加入50%乙醇至刻度，摇匀，即得。

2.2.3.3阴性对照溶液的制备：取缺白芷药材的阴性样品，同法制成阴性对照溶液。

2.2.4线性关系考察

取欧前胡素对照品适量，分别配制成每ml各含1.8752μg，3.7504μg，7.5007μg，15.0014μg，30.0028μg，60.0056μg，120.0112μg，进样量为10μl。以对照品量（μg）为横坐标（x），峰面积为纵坐标（y），绘制标准曲线；欧前胡素的线性方程：Y=29.145x－12.663，R2=0.9998。结果欧前胡素在1.8752～120.0112μg范围内呈良好的线性关系。

2.2.5重复性试验

精密称取同一批号样品，按供试品溶液制备方法平行制备6份，并测定，计算。欧前胡素含量的RSD为1.02%。

2.2.6稳定性试验

取同一供试品溶液，在0、4、8、16、24h分别进样，测定峰面积值，结果欧前胡素含量的RSD为1.08%。说明制备的供试品溶液至少在24h内稳定。

2.2.8加样回收率考察

取毛鸡药酒样品5ml（已知含量），精密称定，分别精密加入一定量的欧前胡素对照品，测定，并计算回收率，结果见表1。

表1毛鸡药酒加样回收率考察结果

3讨论

毛鸡药酒为作为酒剂产品含乙醇量为35～45％，浸泡时间约30天。处方中白芷药材具有解表散寒，袪风止痛、燥湿止带、消肿排脓的作用，上述方法检测白芷中欧前胡素含量的转移率仅为40%。当浸泡时间约60天时，转移率为50%，浸泡时间约90天和120天时，转移率均为65%。因些本文为毛鸡药酒工艺制备提供合理的依据。

参考文献

[1]中华人民共和国卫生部药品标准－中药成方制剂（第2册）[s].1990.6.

[2]肖永庆，李丽，游小琳，张村，谷口牙彦，马场きみ江.白芷质量标准研究，《中国中药杂志》[J].2004.7,654-657.

[3]赵渤年，刘青，丁晓彦.HPLC法测定九味羌活颗粒中欧前胡素的含量，《药物分析杂志》[J].2007.27（12）1967-1968.

[4]国家药典委员会.中国药典（.2010年版.）一部[S].北京：化学工业出版社，2010：附录ⅥB、ⅥD.