清喉消炎颗粒提取的正交试验

清喉消炎颗粒提取的正交试验

伍月红１黄乐珊黄汉辉１吴丽敏２

伍月红１黄乐珊?黄汉辉１吴丽敏２１．广州医科大学附属第三医院药学部广东广州５１０１５０;２．广州医科大学广东广州５１０１８０基金项目:广东省中医药局赞助项目(编号:２０１２１１２６)作者简介:伍月红,女,(１９６５－),本科学士,副主任中药师研究方向:中药药剂学及临床使用.通讯作者:黄乐珊?,女,(１９６９－),主任药师研究方向:医院药学

【摘要】目的探索清喉消炎颗粒的最佳提取条件,为清喉消炎颗粒的制备、质量控制和临床应用提供理论依据.方法以出膏率为指标,采用正交试验法对清喉消炎颗粒提取进行优选,实验选择浸泡时间、煎煮时间、含醇量三个因素,每因素三个水平,用L９(３３)正交表进行实验设计.结果清喉消炎颗粒的最佳提取工艺是:加水煎煮两次,浸泡时间１??５h、煎煮时间１h和２/３h、含醇量５５％.结论在优选条件下,清喉消炎颗粒出膏率高,以此条件制备清喉消炎颗粒,并对处方中主药板蓝根和岗梅根进行定性鉴定,进一步证明此提取工艺的合理可行.【关键词】清喉消炎颗粒;正交试验法;定性鉴定TheOrthogonalTestofXiaoYanQingHouGranulesextractionWUYue－hong,HUANGLe－shan,HUANGHan－hui,WULi－min(Dept??ofPharmaＧcy,TheThirdaffiliatedHospitalofGuangzhouMedicaluniversity,Guangzhou５１０１５０,China;GuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou５１０１８０,China)【Abstract】Objective:ThroughexploretheextractionprocessofXiaoYanQingHougranulestoprovideatheoreticalbasisfortheXiaoYanQingHougranulespreparation,thequalitycontrolandtheclinicalapplication??Methods:UsingtherateofextractionasindexandbasingontheorthogonaltestmethodtooptimizeXiaoYanQingHougranules’extractionprocess??TherewerethreemainfactorsintheExperiment:soakingtime,decoctingtime,alcoholcontent,andeachfacＧtorhadthreelevels??TheexperimentaldesignusedL９(３３)orthogonaltable??Results:Theoptimizedextractiontechnologyfollowedas:decoctingtwotimes,soaＧkingtime１??５hourdecoctingtime１hourand２/３houralcoholcontent５５％??Conclusion:,Undertheoptimizationconditions,XiaoYanQingHougranules’rateofextractionwashigh,toproduceXiaoYanQingHougranules,sowemakesomequalitativeidentificationofmaindrugsintheprescriptionofRadixIsatidisandGang【KMeeyigweonrtdos】provethisprocessarerationalityandfeasibility??XiaoYanQingHougranules;Orthogonaltest;Qualitativeidentification【中图分类号】R２９１【文献标识码】A【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－０６１２－０２

清喉消炎颗粒具清热解毒作用,主要用于治疗咽喉炎、扁桃体炎、声音嘶哑、感冒咳嗽等症.处方由板蓝根、岗梅根、地胆草、甘草组成.组方简单、合理,经临床使用多年,疗效显著.本文采用正交试验法探究其最佳提取条件,并对处方的主药进行定性鉴定.

１仪器与药品

１??１仪器JS－８１９多功能中药煎煮仪(以下简称中药煎煮仪)(广州市今健医疗器械有限公司)、六孔水浴锅(上海羌强仪器设备有限公司)、１０１A－３烘箱(中华人民共和国上海市实验仪器总厂)、比重计(沈阳玻璃仪器厂)１??２药品岗梅根(产地广东)、板蓝根(产地安徽)、地胆草(产地广东)、甘草(产地内蒙),由本院药房提供,经鉴定均为正品[１].２方法２??１水提工艺按处方组成比例,秤取药材共九份,每份约４２０g.药材适量粉碎后,加７倍水量按提取因素A(浸泡时间)水平进行浸泡.为寻找最佳提取条件,采用正交设计实验[２],对主要影响出膏率的三个水平因素,即浸泡时间、煎煮时间、含醇量进行考察[３].浸泡时间水平分别为０??５h、１h、１??５h,浸泡完毕后置于中药煎煮仪煎煮,煎煮时间水平分别为０??５h、１h、１??５h,煎煮完毕后过滤药液,备用;药渣再次加入５倍水量第二次煎煮,煎煮时间水平分别为１/３h、２/３h、１h,煎煮完毕后过滤药液,备用;合并两次药液.将药液于抽滤机上抽滤,滤液于中药煎煮仪进行浓缩,浓缩至流浸膏状,相对密度约１??２,备用.

２??２正交试验以浸泡时间、煎煮时间和含醇量为变量因素,运用正交法试验,设计L９(３３)正交试验[４],因素水平见表１.综合上述分析并结合实际经验,确定清喉消炎颗粒的最佳提取条件是A３B２C１,即:浸泡时间为１??５h、煎煮时间为１h和２/３h、含醇量５５％,此时清喉消炎颗粒的出膏率为５??２％.以最佳提取条件制备的干膏进行定性鉴别.４定性鉴别

４??１板蓝根的TLC鉴别取本品干膏５g,加入硫酸钠饱和的水溶液６０mL溶解,移至分液漏斗中,用乙醚振摇提取３次,每次２０mL,合并乙醚液,用１％的氢氧化钠溶液洗涤３次,每次２０mL,再用水洗涤３次,每次２０mL,取乙醚液于水浴上蒸干,残渣加二氯甲烷约０??５mL使其溶解,作为供试品溶液.按最佳提取条件制备的除去板蓝根的阴性样品,同法制备阴性对照溶液.另取板蓝根对照药材１５g加无水乙醇适量,加热回流１h,滤过,滤液于水浴上蒸干,残渣加入硫酸钠饱和的水溶液２０mL溶解,同法制成对照药材溶液.另取靛玉红０??３mg加２mL二氯甲烷溶解,作为对照品溶液.吸取供试品溶液、阴性对照溶液、对照药材溶液各１０ul,标准品溶液２ul,分别点于同一以０??３羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯－二氯甲烷－丙酮(５:４:１)为展开剂,展开,展距约为７??３cm.取出,晾干,日光下检视.结果,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上显相同的红色斑点[８],阴性对照无干扰.４??２岗梅根的TLC鉴别取本品干膏５g,加５％盐酸１００ml溶解,过滤,滤液移至分液漏斗中,加乙醚振摇提取２次,每次３０ml,分离出水层,合并水溶液,并加入碳酸钠调至PH１０,再以氯仿萃取２次,每次３０ml,合并氯仿液,水浴上蒸干,残渣加无水乙醇２mL使其溶解,作为供试品溶液.按最佳提取条件制备的除去岗梅根的阴性样品,同法制备阴性对照溶液.另取岗梅根片２０g,加无水乙醇１５０ml回流２次,每次１小时,滤过合并滤液,水浴浓缩成浸膏,加５％盐酸５０ml溶解,同法制成对照药材溶液.吸取供试品溶液、阴性对照溶液、照药材溶液各１０ul,分别点于同一以０??３羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板(厚５００m)上,以环已烷－氯仿－丙酮(５:３:０??５)为展开剂,展开,展距约为８??５cm.取出,晾干,结果,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的荧光斑点[９],阴性对照无干扰.

５讨论

本实验采用正交试验法对清喉消炎颗粒提取工艺的最佳条件进行探究,为清喉消炎颗粒的制备、质量控制和临床应用提供理论依据.由直观分析结果表明:影响本制剂提取工艺大小顺序为:浸泡时间＞含醇量＞煎煮时间;由效应曲线图可知,在一定范围内,影响本制剂提取工艺的因素中,出膏率与浸泡时间成正比、与含醇量成反比,而煎煮时间控制在１h内,出膏率最高;由方差分析可见,浸泡时间各水平间有显著性差异(F＞１９).因此,综上所述和结合实际可得,本制剂提取工艺的最佳条件为:浸泡时间１??５h、煎煮时间１h和２/３h、含醇量５５％.以清喉消炎颗粒处方的主药板蓝根、岗梅根作定性实验,进一步证明最佳提取条件制备工艺的合理、可行.将实验数据经过系统分析,结合实际经验选择优化条件,结果可靠,建议在制剂研究中推广使用.参考文献[１]国家药典委员会??中华人民共和国药典一部[S]??北京:中国医药科技出版社,２０１０:８０－８１,１９１－１９２附录Ⅲ:２３－２４??[２]鲁湘鄂??岗梅根中总皂苷的提取工艺研究[J]??制剂技术??２０１０,１９(２２):[５７－５５??３]赵奎,周家齐,张华翔,等??复方岗梅根颗粒制备工艺的研究[J]??黑龙江医学,２００６,１９(２):１１２－１１３??[４]沈群??中药研究中的正交设计问题[J]??数理医药学杂志,２０１１,２４(１):[１９－２０??５]肖琼,沈平??中药醇沉工艺的关键影响因素[J]??中成药??２００５,２７(２):[１４３－１４４??６]李尧,尹英,王延波,等??水提醇沉工艺中用醇量的经验公式[J]??牡丹江医学院学报,２００２,２３(３):４６－４７??[７]孙月霞,吴淑娥??初膏浓度对醇沉效果的影响[J]??基层中药杂志,２０００,[１４(５):３６??８]方锦霞,严鹏科,江莲娣,等??清喉消炎颗粒质量标准研究[J]??检验医学与临床,２００９,６(１２):９３１??[９]广东省食品药品监督管理局??广东省中药饮片炮制规范第一册[S]??广东:广东科技出版社,２０１１(５):２１４－２１６