高胆红素对ADVIA2120i全自动血细胞分析仪检测WBC、RBC、PLT、Hb的影响

高胆红素对ADVIA2120i全自动血细胞分析仪检测WBC、RBC、PLT、Hb的影响

冉芬黄丽程树强彭晓峰张晓雅

贵州医科大学附属医院贵州贵阳550004

摘要：目的：研究高胆红素对ADVIA2120i全自动血细胞分析仪检测WBC、RBC、PLT、Hb的影响。方法：选择住院胆红素升高患者30例（高胆红素组），同期体检健康者30例（对照组）。同时采用血细胞分析仪和手工检测WBC、RBC、PLT及Hb并对两者的检测结果进行比较和统计分析。结果：实验组中WBC、Hb的检测结果明显高于手工法，有统计学意义（P<0.05），RBC、PLT的检测结果差异无统计学意义（P>0.05）。对照组四个参数均无统计学意义（P>0.05）。结论：高胆红素会导致ADVIA2120i全自动血细胞分析仪检测WBC、Hb假性增高、对RBC、PLT无明显影响。

关键词：高胆红素；WBC；RBC；PLT；Hb；ADVIA2120i

Abstract：Objective：TostudytheeffectofhighbilirubinonPLT，RBC，HbandWBCbyautomaticbloodcellanalyzerofADVIA2120i.Methods：30cases（highbilirubingroup）and30healthypersons（controlgroup）wereselected.Atthesametime，thedetectionresultsofHb，RBC，PLTandWBCwerecomparedandanalyzedbyusingthebloodcellanalyzerandmanualtesting.Results：thedetectionresultsofHbandWBCintheexperimentalgroupweresignificantlyhigherthanthoseofthemanualmethod，andtherewasstatisticalsignificance（P<0.05）.TherewasnosignificantdifferenceinthedetectionresultsofRBCandPLT（P>0.05）.Thefourparametersofthecontrolgroupwerenotstatisticallysignificant（P>0.05）.Conclusion：highbilirubinwillleadtoADVIA2120iautomaticbloodcellanalyzertodetectWBC，Hbpseudoincreased，PLT，RBCnosignificantimpact.

Keywords：highbilirubin；WBC；RBC；PLT；Hb；ADVIA2120i

1前言

20世纪50年代初美国库尔特先生研制电阻抗法血细胞分析仪以来一直在改变实验室检验方法与检验流程。从单一的电阻抗法，发展到与电学，光学，细胞化学等多项技术综合运用，其检测性能越来越强大，检测参数越来越多，特别是具有白细胞分类技术仪器的普及应用及全自动流水线化的血细胞分析系统的使用，使得实验室越来越依赖这样的设备来完成大量的血常规检验工作。但是自动化的仪器检验也存在局限性，某些疾病因素会影响血细胞分析仪检测结果的正确性，高胆红素、高血脂等疾病因素会影响检测结果的正确性。高胆红素对不同的血细胞分析仪的检测结果的影响也报道较多，但对ADVIA2120i全自动血细胞分析仪检测结果的影响报道较少。因仪器的检测原理不同，高胆红素对其影响程度也可能不同，因此本研究拟对高胆红素对ADVIA2120i全自动血细胞分析仪检测WBC、RBC、PLT、Hb的影响做系统分析，现报告如下。

2材料和方法

2.1一般资料

选择贵州医科大学附属医院2016年3月中旬至月底住院部总胆红素值大于正常值在25.2―464.26μmol/L的患者30例（高胆红素组），不分年龄、不分病种。另选择同期30名健康体检者（对照组），血清总胆红素均在正常范围。

2.2仪器及试剂

西门子ADVA2120i全自动血细胞分析仪，奥林巴斯AU5400全自动生化分析仪，所用试剂为原装配套检测试剂和质控品。奥林巴斯光学显微镜、721分光光度计、改良Neubauer计数盘、一次性微量吸管、试管、1000ｕ加样枪、定量加样器、2％冰醋酸、1％草酸铵、郝姆液、HiCN试剂。

2.3方法

2.3.1所用分析仪严格按照室内质量控制制度定期定标，每天进行室内质控，仪器运行状态良好。

2.3.2抽取30例高胆红素患者的静脉血4.0mL（高胆红素组），EDTA-K2抗凝血2.0mL用于血细胞分析仪进行血常规检测，另一管不抗凝血2.0mL用于全自动生化分析仪胆红素的测定。选取30例同期体检无异常，胆红素在正常参考范围的健康体检者的血常规（对照组）。同管血采用双盲法在低倍镜下选择计数池四角的四个大方格计数WBC，在高倍镜下选择计数池中央大方格位于正中及四角的5个中方格计数RBC，在高倍镜计数中央大方格内四角及正中共5个中方格的PLT，每管血同一项目计数2次取平均值，在721分光光度计采用氰化高铁血红蛋白法分光光度法（HiCN法）在5440nm波长处测标本的吸光度，间接从标准曲线中查出Hb。

2.4统计学处理

应用SPSS19.0统计软件分析，所有数据以均数±标准差（ⅹ±s）表示，两个独立样本比较用t检验，以P＜0.05为有统计学意义。

3结果

3.1血细胞分析仪法与人工计数法结果：

高胆红素组WBC血细胞分析仪法高于人工计数法，两组比较有统计学意义（P＜0.05）；PLT、RBC血细胞分析仪法与人工计数法比较无统计学意义（P＞0.05）。对照组血细胞分析仪法与人工计数法结果比较均无统计学意义（P＞0.05），见表1。

4讨论

ADVIA2120i全自动血细胞自动分析仪是采用流式细学和光散射及过氧化物酶染色的原理来进行WBC的计数和分类。血液先用溶血素溶解红细胞后再进行过氧化物酶染色，当染色后的细胞快速通过光检测区时，入射到细胞上的激光首先在细胞表面产生散射，由此获得有关细胞的大小和数量信息。本研究用ADVA2120i全自动血细胞自动分析仪和手工法分别对30例高胆红素血进行血常规检查，发现WBC检测的结果仪器法明显高于手工法并有统计学意义（P<0.05），与文献[1-2]所报道的结果一致，其原因可能为胆红素能够生成稳定的自由基，当胆红素浓度越高产生的自由基量越多[3]。自由基与红细胞膜脂质成分的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应后，导致膜不饱和脂肪酸减少，RBC脆性减小，从而使溶血剂的阳离子表面活性剂对结构发生改变的红细胞膜上的磷脂溶解能力减弱，磷脂与红细胞膜上的蛋白分离作用也减弱，最终导致红细胞膜不能被溶血剂破坏[4]，未被溶解的RBC在通过过氧化物酶通道时被误认为WBC，造成WBC计数的假性增高；而人工计数法是用的是冰醋酸，冰醋酸对RBC有很强的溶解能力，同时采用的是形态学这一客观指标进行计数和分类。本研究还发现Hb的检测的结果仪器法也高于手工法并有统计学意义（P<0.05），与文献[5]所报道结果也一致，其原因可能是一方面因为ADVIA2120i血细胞分析仪血红蛋白检测方法是从氰化高铁血红蛋白法改良而来，其吸光度为546nm，而胆红素的吸光度在400-600之间，仪器无法排除胆红素对血红蛋白的干扰。

本研究发现高胆红素对ADVIA2120i血细胞分析仪检测RBC和PLT均无影响，而宋静、钱英超等报道胆红素增高会使血常规PLT减低[5]，这可能与仪器的检测原理不同有关。本研究的仪器采用的是光散射法检测RBC和PLT，检测时先将细胞等体积的球形变化及固定后，再从反映细胞体积与总数的低角度和反映细胞内容物的高角度同时进行散射光的检测，在消除细胞形态对测定影响的同时也减少其他因素对检测结果的干扰，而后者使用的ABXpentra60仪器采用的是电阻抗和双鞘流技术的原理进行计数和分类。

综上所述，高胆红素使ADVIA2120i血细胞分析仪在检测WBC和Hb时出现假性增高，而对RBC和PLT均无影响。对于高胆红素血症的患者，采用ADVA2120i血细胞分析仪检测血常规时，如检测结果中出现WBC、Hb异常增高者，应及时进行手工复查，以防由于不同原因造成的WBC和Hb假性增高，给临床治疗带来不良的后果，给病人带来额外的经济负担。

参考文献：

[1]詹灵凌，吕小平，李山，唐劲光.慢性重型肝炎高胆红素对白细胞计数及其分类的影响[J].广西医科大学学报，2008.25（2）：230-231.

[2]刘然.MEK-6318K型血液分析仪对黄疸型肝病患者白细胞的检测[J].现代生物医学进展，2006.6（2）：69-70.

[3]宋克征，沈瑛援.胆红素及检测方法研究的进展［J］.国际检验医学杂志，2002，24（5）：283-284.

[4]王梅，尹铁英，陈宏础．红细胞膜脆性与白细胞计数假性增高的关系［Ｊ］重庆医科大学学报，2003．28（5）：635—655.

[5］宋静，刘宁，彭素芳.胆红素对血常规各项参数的影响［J］.临床和实验医学杂志，2012，11（16），1311-1315.