江智辉(绵阳市疾病预防控制中心四川绵阳621000)
【中图分类号】R516【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)21-0253-02
【摘要】目的了解慢性腹泻中侵袭性大肠杆菌的感染状况及生物学特点,为预防控制提供依据。方法用普通培养法分离,用生物酶里埃E:21作生化后用血清学作分离鉴定,用KB法作药敏试验。结果从5份来自同一家庭成员的腹泻便中检出4株EIECO28ac均出现高度的耐药性。结论EIECO28ac可在家庭内人员中传播感染。
【关键词】EIEC感染
EIECO28ac自80年代被明确证实为腹泻病原菌以来,在我国不少地区相继报道了由该菌引起的不同感染[1],我们于近期开展了此项工作,从慢性腹泻患者大便中检出了该菌,同时在5位家庭成员中4位检出了该菌,现将结果报告如下:
1材料与方法
1.1材料来自慢性腹泻1年,大便呈粘液带脓血标本1份,患者家庭成员的正常大便样5份。伊红美蓝、SS琼脂粉,细菌生化反应微量发酵管,由浙江军区总后勤部卫生防疫检验所提供。EIEC全套诊断血清(10种和39种)由中国药品生物制品检定所和卫生部成都生物制品研究所供给。沙门菌属、致病性大肠杆菌、志贺菌属等诊断血清均由卫生部成都生物制品研究所供给。健康家兔由本市卫生学校动物室供给,共5只。药敏纸片由上海新芦生物化学试剂厂及本市中心医院供给,共22种。
1.2方法每份标本同时直接划线接种在伊红美蓝,SS琼脂平板上,37℃培养24h,挑取平板上的菌落作革兰染色镜检及血清学试验,染色为阴性杆菌与OK多价1-3血清凝集者,再转种双糖铁琼脂斜面作分离并进一步进行生化及血清学鉴定。每份标本接种上述平板的同时,再分别按文献[2]作空肠弯曲菌、耶尔森氏菌、志贺菌、沙门菌等的分离培养。
2结果
2.1细菌分离5份大便中共分离出4株EIEC。O28ac的特点是:革兰阴性杆菌,在伊红美蓝琼脂平板上为中等大小,凸起、边缘整齐、带金属光泽的典型大肠杆菌菌落;在SS琼脂平板上不生长。标本中未检出其他病原菌。
2.2生化反应结果所分离菌株能分解葡萄糖,乳糖产酸产气。鸟氨酸、赖氨酸、硫化氢、苯丙氨酸、尿素、动力、V-P、枸橼酸盐等为阴性反应;靛基质、甲基红、卫茅醇、甘露醇、阿拉伯胶糖、醋酸钠等试验为阳性反应。
2.3血清学试验结果所分离菌株能与北京产诊断血清多价1及O28ac和成都产诊断血清OK多价2及O28ac因子血清出现明显凝集。能与沙门菌属0:A-F多价及0:1单价血清出现明显的交叉凝集反应。与志贺菌属4种多价及鲍氏13型不出现交叉凝集。盐水对照均为阴性反应。菌液经100°C加热1h仍能与O28ac因子血清及沙门菌0:A-F价血清出现明显凝集。
2.4家兔角膜试验选用4只家兔,用菌苔直接涂抹每只兔的右眼角膜,左眼为对照。另选1只家兔用相同方法接种1株O111:K38作侵袭性对照。结果4只实验兔右眼角膜在72h内均出现充血及脓性分泌物。采集脓性分泌物分离培养,均为EIECO28ac纯菌生长,对照组均为阴性反应。
2.5药敏试验结果见表1
表14株EIECO28ac的药敏结果
R:耐药M:中度敏感S:敏感
从表1结果可见,该4株EIECO28ac除对氯霉素高敏感外,对其他抗菌药物均是低度敏感或耐药。
3讨论
3.1EIECO28ac引起的腹泻及食物中毒等国内外均有报道,而由它所致的家庭内集体感染尚未见报道。本资料表明,全家共5人,从4人的大便中均检出该菌,其中1人长期慢性腹泻(大便呈粘液伴有脓血,直肠镜检发现结肠部位有溃疡面)。4份大便样品培养均为纯菌生长。根据以上检测结果可确定EIECO28ac是该家庭集体感染的病原菌。
3.24株EIECO28ac的形态和生化特点与国内外有关文献[1-2]的描述均不相同。
3.3有关文献[2]指出,EIECO28ac与志贺菌属鲍氏13型有相关抗原,但本文报道的EIECO28ac的菌株与志贺菌属无相关抗原,与沙门氏菌属0:A-F多价及0:1单价有相关抗原,属国内首次报道。
3.4药物的敏感性也与国内有关文献的报道不同[3],4株EIECO28ac只对氯霉素高度敏感,对其他十几种抗菌药物均是低度敏感或耐药。这可能与患者因长期慢性腹泻使用多种抗菌药物治疗有关,也说明不同地方的菌株耐药性也不相同。
参考文献
[1]徐文杰,等.致泻性大肠杆菌病原学调查[J].中国卫生检验杂志,1999,9(4):294.
[2]李仲兴等著.临床细菌学[M].北京:人民卫生出版社,1986:179-182.
[3]杨正时等.国内所见侵袭性大肠杆菌血清型[J].中华流行病学杂志,1988,9(2):84.
[4]WHO.Bull,1980,58:23.