人参皂苷改善葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠结肠炎的研究

人参皂苷改善葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠结肠炎的研究

时潘刘家言

时潘刘家言

（南京医科大学康达学院江苏连云港222000）

【摘要】目的：研究人参皂苷对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠结肠炎的防治作用。方法：健康昆明种小鼠，随机分为正常组N、模型组M、人参皂苷组G，建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎模型。正常组、模型组用0.9％氯化钠溶液灌胃，人参皂苷组用人参皂苷溶液灌胃。结果：与模型组相比，人参皂苷组小鼠结肠炎疾病活动度指数DAI评分和结肠粘膜组织学损伤评分(CMDI)明显下降(P<0.05)。结论：人参皂苷可减轻由DSS诱导的小鼠结肠炎的炎症症状。

【关键词】结肠炎；葡聚糖硫酸钠；人参皂苷

【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）27-0037-02

StudiesontheimprovementofGinsenosideonthecolitisinducedbyDextransulfatesodium(DSS)inmice

PanShiJiayanLiu

(KangdaCollegeofNanjingMedicalUniversityJiangsuLianyungang222000)

【Abstract】ObjectiveTostudythepreventiveandtherapeuticeffectofGinsenosideonthecolitisinducedbyDextransulfatesodium(DSS)inmice.MethodsHealthyKunmingmicewererandomlypidedintonormalgroupN,modelgroupMandginsenosidegroupG.ThecolitisinducedbyDextransulfatesodium(DSS)wasestablishedinmice.Thenormalgroupandthemodelgroupweretreatedwith0.9%sodiumchloridesolution,andtheginsenosidegroupwasirrigatedwiththeginsenosidesolution.ResultsComparedwiththemodelgroup,DiseaseActivityIndex(DAI)andColonMucosalDamageIndex(CMDIweresignificantlydecreased(P<0.05).ConclusionGinsenosidecanreducetheinflammatorysymptomsofthecolitisinducedbyDSSinmice.

【Keywords】Colitis;Dextransulfatesodium;Ginsenoside

前言

结肠炎是一种常见的肠道疾病，其常见临床症状为腹泻、腹痛、黏液便、血便[1]。引起的结肠炎的原因主要为遗传、自身免疫反应和神经精神因素[2]。随着现代快节奏生活和压力增多，结肠炎患者增多。因而寻找能有效治疗结肠炎的药物成为现代药学的焦点。人参皂苷是从人参中提取的固醇类化合物，具有抗炎，抗肿瘤等生物活性。人参皂苷的抗炎作用提示我们其在肠膜炎中是否能发挥作用。由葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的肠膜炎可以模拟患者肠膜炎的疾病症状，本实验将建立DSS诱导的肠膜炎模型研究人参皂苷对肠膜炎的防治作用。

实验部分：

1.材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物

昆明小鼠，由南京医科大学实验动物中心提供，生产许可证：SCSK(苏）20020031。

1.1.2药品与试剂

0.9%氯化钠注射液，辰欣药业股份有限公司，产品批号：1404242143；葡聚糖硫酸钠（DSS），北京联立信生物技术有限公司，产品批号：0216011050；人参皂苷，南京森贝伽生物科技有限公司，产品批号：52286596。

1.2方法

1.2.1实验动物分组

利用统计学软件随机生成数字，将30只健康昆明种小鼠，以每组10只随机分为正常组N、模型组M，人参皂苷组G。

1.2.2DSS诱导的结肠炎模型建立及给药

正常组小鼠自由饮用蒸馏水；模型组、人参皂苷组小鼠自由饮用5%（W/V)DSS溶液7d。于造模第一天开始，正常组、模型组小鼠灌胃给予0.4ml0.9%氯化钠注射液，人参皂苷组小鼠灌胃给予0.4ml人参皂苷溶液（5mg/ml)。

1.2.3结肠炎疾病活动度指数(DiseaseActivityIndex，DAI)评分

造模开始每天记录小鼠体重变化，并使用大便隐血试纸测定小鼠大便隐血程度。DAI评分=体重减失率分数+大便隐血分数，分值在0～8之间。体重下降评分：0分，无减轻；1分，减轻5％～9％；2分减轻10％～14％；3分减轻15％～20％；4分减轻大于20％。大便隐血评分：0分，隐血阴性(一)；1分，隐血弱阳性(+)；2分，隐血阳性(++)；3分，隐血强阳性(+++)；4分，肉眼可见血便。造模结束，脱颈处死小鼠，取出小鼠结肠并记录小鼠结肠的长度(自盲肠至肛门)。

1.2.4小鼠远端结肠组织切片评分

造模结束，脱颈处死小鼠，取出各组小鼠远端结肠进行固定（4%多聚甲醛）、石蜡包埋、切片及HE染色。对小鼠远端结肠组织HE染色切片进行组织学损伤评分(ColonMucosalDamageIndex，CMDI）。评分标准：0分，结肠黏膜正常；1分，少量隐窝丢失；2分，大量隐窝丢失；3分，隐窝全部丢失，黏膜上皮完整，伴有少量炎细胞浸润；4分，隐窝全部丢失，黏膜上皮破坏、糜烂，伴有大量炎细胞浸润。

1.3统计学处理方法

所有实验数据均以mean±s表示，运用SPSS11.5统计软件处理分析，采用方差分析和t检验进行组间差异分析，以P<0.05为有统计学意义。

2.实验结果

2.1结肠炎疾病活动度指数(DiseaseActivityIndex，DAI)评分

模型组小鼠DAI评分明显高于正常组，并持续整个造模过程（P<0.05)，见图A；说明由DSS诱导的小鼠结肠炎模型建立成功。人参皂苷组小鼠在灌胃给予人参皂苷溶液4天后，小鼠DAI评分明显低于模型组，并持续至整个造模结束（P<0.05)，见图A；说明人参皂苷可以减轻由DSS诱导的小鼠结肠炎疾病症状。模型组与正常组比较小鼠结肠长度明显降低（P<0.05)，人参皂苷组与模型组比较小鼠结肠长度明显升高（P<0.05)，见图B。

2.2小鼠远端结肠组织切片评分

对比各组小鼠远端结肠组织切片，正常组远端结肠组织可见粘膜上皮完整，隐窝结构完整、排列整齐，未见炎症细胞浸润(图C1)。模型组远端结肠组织表现可见粘膜上皮结构完全破坏、糜烂，隐窝结构完全缺失，伴有大量炎症细胞浸润(图C2)。人参皂苷组远端结肠组织表现可见黏膜上皮相对完整，隐窝结构部分缺失，伴有少量炎症细胞浸润(图C3)。CMDI评分可见，模型组明显高于正常（P<0.05)；人参皂苷组明显低于模型组（P<0.05)，见图D。

3.讨论

本研究通过建立DSS诱导的小鼠结肠炎模型，以探究人参皂苷对小鼠结肠炎的保护作用。在造模过程中，模型组小鼠DAI评分随小鼠饮用DSS溶液时间增长而升高，同时，小鼠结肠的CMDI评分明显高于正常组小鼠，说明所建立的小鼠结肠炎模型是成功的。而灌胃给予人参皂苷溶液可以降低DAI和CMDI评分，减轻小鼠肠道的炎症，说明人参皂苷对DSS诱导的结肠炎小鼠的结肠具有一定的保护作用。综上所述，人参皂苷可为临床治疗结肠炎提供的新的研究方向。

【参考文献】

[1]邓长生，夏冰.炎症性肠病[M].北京：人民卫生出版社，1998，125．

[2]中华中医药学会脾胃分会．溃疡性结肠炎中医诊疗共识(2009)[J].中国中西医结合杂志，2010，30(5)：527-532．