复方羊角片中白芷含量的测定方法探讨

复方羊角片中白芷含量的测定方法探讨

卢小玲

卢小玲

湖南省涟源市人民医院湖南涟源417000

摘要：目的：采用高效液相色谱法（HPLC法）对复方羊角片中的白芷含量进行测定。方法：采用HPLC法测定复方羊角片中的白芷含量，将甲醇/水（55/45）作为流动相，十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，使用超声提取，设置检测波长为300nm流速为1ml/min。结果：欧前胡素浓度在0.0406~0.1979mg/m时，浓度与峰面积具有较好的线性关系。回归方程为，r=0.99896。平均回收率为99.43%。RSD=0.67%＜2.0%。结论：对复方羊角片中白芷含量采用HPLC法进行检测，优势明显，具有分辨率高、重复性好、速度快、可控性好等特点，对提高复方羊角片的质量具有十分重要的作用。

关键词：复方羊角片；白芷；HPLC法；含量

复方羊角片由川芎、羊角、白芷与制川乌制成，在《卫生部药品标准》中药成方制剂第8册中收载，具有平肝、镇痛之功效，可用于治疗紧张性头痛、心血管性头痛、偏头痛与神经性头痛等[1,2]。复方羊角片为纯中药制剂，现行质量标准中并无标准的含量检验方法，2010年版中国药典中涉及白芷检验采用了高效液相色谱法（HPLC法）检测[3]，因此为有效地进行该药物有效成分含量的质量控制，本研究采用HPLC法对复方羊角片中的白芷含量进行测定，具体报告如下。

1材料与仪器

1.1材料

复方羊角片（国药准字Z23020138哈药集团三精制药四厂有限公司提供规格0.31g/片），欧前胡素标准品（南京森贝伽生物科技有限公司提供）。

1.2仪器

Agilent1200高效液相色谱仪（由美国安捷伦公司生产），UV-2550紫外分光光度计（由日本岛津公司生产），MettlerToledoXS205DualRange电子分析天平，数显恒温水浴锅，水为纯化水，甲醇为色谱纯试剂，其他试剂为分析纯。

2结果

2.1色谱条件

流动相选择：对同一样品分别采用3种流动相进行检测，即甲醇/水：45/55，甲醇/水：50/50,甲醇/水：55/45。根据日常操作经验，选择流速1ml/min。采用波长232，276，218，248与300nm进行紫外扫描，确定检测波长为300nm。分别采用上述3种流动相对样品进行检测（进样量均为20μl）。结果显示，选择流动相甲醇/水：55/45配比，其理论塔板数为5690，＞2000，拖尾因子为0.98，介于0.95~1.05之间，满足要求，复方羊角片中白芷分离效果较好。

2.2提取方法

取同一批样品，设置为2组平行样，均进行超声与回流，时间分别为60min，经检测2组结果无明显差异。另取同一批样品分别进行超声检测，时间依次为20min、40min、60min与80min，结果显示，样品在超声60min时有效成分基本完全溶出，因此确定超声提取时间为60min。

2.3精密度检测

准确称取欧前胡素标准品，制得标准品溶液，取样10μl，重复进样5次，测定峰面积，结果测得RSD为0.22%，结果＜2.0%，因此复合精密度要求。

2.4线性关系

将配制的不同浓度标准溶液进样，表1为具体测定结果。根据测样结果建立回归方程：，r=0.99896。结果表明，欧前胡素浓度在0.0406~0.1979mg/m时，浓度与峰面积具有较好的线性关系。

2.5专有性试验

将处方中药味中不含白芷作为阴性模拟制剂，并以同样方法制得缺欧前胡素阴性对照溶液。精密吸取20μl供试样品溶液、欧前胡素对照溶液及阴性对照溶液。试验结果发现，供试样品与标准品具有相同的保留时间，且峰形一致，阴性对照液无吸收，样品中辅料此条件下并无产生干扰，因此专有性较强。

2.6稳定性试验

取样品一批制成供试样品液，取样5份，分别放置0h、3h、6h、12h与24h，在上述确定的色谱条件下进行进样分析，测定峰面积积分值，结果依次为487，485，481，483，486，测定结果RSD=0.55%，结果显示，供试样品在防治24h内具有较好的稳定性。

2.7准确度试验

精确称取样品5份，质量分别为1.0272g、1.0293g、1.0286g、1.0295g、1.0301g，均加入0.1950mg欧前胡素对照品，在上述色谱条件下测定，其回收率分别为99.25%，99.56%，99.17%，100.23%，98.92%，平均回收率为99.43%。RSD=0.67%＜2.0%。结果显示，该测定结果十分接近真实值。

2.8重复性试验

准确称取5份样品，制成5份供试试验品进行检测，表2结果显示RSD=1.2%＜2.0%，满足重复性要求。

3讨论

复方羊角片为纯中药制剂，现行质量标准中并无标准的含量检验方法，本试验通过对HPLC法检测复方羊角片的白芷含量进行线性、稳定性、重复性、准确度等方法学验证[4,5]，确定选择流动相甲醇/水：55/45配比，流速为1ml/min，检测波长为300nm，样品超声提取时间为60min。通过该检测方法，可对复方羊角片的质量起到控制与提高的作用，本试验中的HPLC法用于检测复方羊角片的白芷含量回收效率高，分离效果良好，操作简单易行，方法可行。对复方羊角片中白芷含量采用HPLC法进行检测，优势明显，具有分辨率高、重复性好、速度快、可控性好等特点，对提高复方羊角片的质量具有十分重要的作用。

参考文献

[1]罗德全.复方羊角片中白芷含量的测定[J].中国药物经济学,2014,(4):234-235.

[2]李婕,黄海伟,张红等.复方利血平片中硫酸双肼屈嗪含量测定方法的探讨[J].中国药品标准,2014,(5):363-365.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010:38.

[4]李有富.复方氯霉素洗剂中氯霉素含量测定方法的探讨与改进[J].中国当代医药,2012,19(28):61-62.

[5]巴小翠.HPLC法测定复方羊角片中阿魏酸的含量[J].齐鲁药事,2010,(12):721-722.