清毒口服液质量标准研究

清毒口服液质量标准研究

荣志宏

荣志宏（广东省广州市第一人民医院广东广州510180）

【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）32-0273-02

【摘要】目的建立清毒口服液的定性鉴别方法，提高对该药物的质量控制，确保用药安全。方法采用薄层色谱法对清毒口服液中的板蓝根，知母，连翘进行定性鉴别。结果供试品色谱中斑点的位置及颜色与对照色谱一致，阴性对照品色谱图中未见干扰。结论该方法简单易操作、稳定性好、重现性好、专属性强，可用于该制剂的质量控制。

【关键词】清毒口服液薄层色谱板蓝根知母连翘

QualityStandardForLaryngomalaciaPills

【Abstract】ObjectiveToestablishaclearmethodofidentifyingqualitativeofQingduoralLiquid,toimprovethismedicinequalitycontrol,ensurethemedicationsecurity.Method:ToemployTLCforidentifyingRadixIsatidis,Anemarrhenae,forsythiainQingduOralLiquid.Result:Thesamplewaschromatographyspotsofthelocationandcolorconsistentwiththecontrolchromatographyandnegativereferencesubstancewasnointerferenceinthechromatograms.Conclusion:Themethodissimpleandeasytooperate,stable,reproducible,specific,andcanbethemethodofqualitativeidentification.

【Keywords】QingduoralTCLRadixIsatidisAnemarrhenaeForsythia

清毒口服液是在传统抗病毒口服液的启示下，改变部分成分而得，由广州市第一人民医院生产，为处方药。清毒口服液是由板蓝根，连翘，知母，芦根，广藿香，生地黄，甘草7味中药制成的口服液制剂，具有清热祛湿，凉血解毒的功效，用于风热感冒，温病发热，上呼吸道感染，腮腺炎，流行性乙脑等病毒感染疾病。

1资料

1.1仪器

电子天平（AL204）、超声波提取器(天津奥特赛恩斯)、电热恒温水浴锅（上海跃进医疗器械厂)、电热恒温干燥箱（东方-A型直热式)、薄层层析缸(200×200mm)、YOKO-PX喷雾显色抽气箱（武汉药科新科技开发公司)、SPⅡ薄层色谱点样板（上海科哲生化科技有限公司)、HY-5回旋振荡器（金坛市富华仪器有限公司）。

1.2试剂和试药

精氨酸对照品（110872-200505，中国药品生物制品检定所）；连翘对照品（110821-200711，中国药品生物制品检定所）；菝契皂苷元对照品（110744-200509，中国药品生物制品检定所）；硅胶G（青岛海洋化工有限公司）、硅胶GF254（青岛海洋化工厂）、羧甲基纤维素钠(上海化学试剂厂)。

2方法和结果

2.1板蓝根的薄层色谱鉴别供试品溶液的制备：取本品50ml，至水浴上蒸干，残渣加乙醇30ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取5种批号样品分别依照上述步骤制备供试品溶液①（批号：N01002），供试液②（批号：N01003），供试液③（批号：N01004），供试液④（批号：N01005）供试液⑤（批号：N01006）。知母阴性对照溶液的制备：按清毒口服液生产工艺，按其处方量，除板蓝根外，按供试品溶液制备项下的方法制备阴性对照溶液。精氨酸对照品溶液的制备。取精氨酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5g的溶液，作为对照品溶液。薄层层析定性：吸取精氨酸对照品溶液、供试品溶液①②③④⑤、板蓝根阴性对照溶液各10uL，吸取上述4种溶液各10μl点于硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（19：5：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试药，在105℃加热至斑点显色清晰[1]。

结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫色斑点，Rf值完全一致。阴性无干扰。

2.2知母的薄层鉴别供试品溶液的制备：参考文献[1]的方法，取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣加乙醇10ml、盐酸1ml，加热回流1h后浓缩至约5ml，加水10ml，用石油醚（60～90℃）振摇提取两次，每次10ml，合并石油醚液，水浴蒸干，残渣加甲苯1ml溶解，作为供试品溶液。取5种批号样品分别依照上述步骤制备供试品溶液①（批号：N01002），供试液②（批号：N01003），供试液③（批号：N01004），供试液④（批号：N01005）供试液⑤（批号：N01006）。知母阴性对照溶液的制备：按清毒口服液生产工艺，按其处方量，除知母外，按供试品溶液制备项下的方法制备阴性对照溶液。菝葜皂苷元对照品的制备：取菝葜皂苷元对照品，加甲苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。薄层层析定性：参照薄层色谱法(中国药典2005版1部附录VIB)试验[2]，吸取上述供试品溶液和阴性对照溶液各10μl，菝葜皂苷元对照品溶液5μl，分别点于同一硅G薄层板上，以甲苯-丙酮（19：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰[2]。

结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点，Rf值完全一致，说明本品含知母。阴性对照无干扰。

2.3连翘的薄层鉴别供试品溶液的制备：参考文献[1]的方法，取本品20ml,用醋酸乙酯提取3次，每次20ml,合并醋酸乙酯液，水浴挥干，残渣加甲醇溶解并定容至1ml，作为供试品溶液。取5种批号样品分别依照上述步骤制备供试品溶液①（批号：N01002），供试液②（批号：N01003），供试液③（批号：N01004），供试液④（批号：N01005），供试液⑤（批号：N01006）。连翘阴性对照溶液的制备：按清毒口服液生产工艺，按其处方量，除连翘外，按供试品溶液制备项下的方法制备阴性对照溶液。连翘对照药材溶液的制备：取连翘对照药材3g,加水煎煮1.5h,滤过,滤液经醇沉后滤过,蒸干滤液,残渣加水溶解后按供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。连翘苷对照品溶液的制备：取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。薄层层析定性：照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VIB）试验[2]，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液和阴性对照溶液各10μl，连翘苷对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿－甲醇－冰醋酸(85∶10∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛溶液，在95℃加热至斑点显色清晰[3]。

结果：供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色斑点，Rf值完全一致，所以说明本品含有连翘。阴性对照无干扰。

3讨论

展开剂的选择与色谱行为，板蓝根鉴别的展开剂最先用正丁醇一无水乙醇一氯仿一乙酸一水(5：5：2：1：1)［3］，薄层板用硅胶G，展开后喷茚三酮试液显色，观察到一个紫色和一个黄色斑点。但此方法重现性不好，在多次重复试验中供试品都没有出现相对应的斑点。后来以正丁醇-冰醋酸-水（19：5：5）为展开剂，展开后喷茚三酮试液显色，在105℃加热至斑点显色清晰。用不含板蓝根的处方制备缺板蓝根的阴性对照品溶液作对照试验，结果呈阴性，说明本法具有较高的专属性。

知母鉴别尝试过两种展开体系：（a）甲苯-丙酮（19：1），（b）苯-丙酮（9：1）结果对照品和供试品色谱中，均呈现一个紫红色的斑点，两者Rf值一致，均为0.5，且斑点规则。鉴于苯毒性大，本试验选择后者为鉴别知母的展开剂。本文将盐酸用量为1ml。样品的TLC鉴别实验结果表明，其特征斑点稍浅，空白样品无干扰。用不含知母的处方制成缺知母阴性对照溶液，结果呈阴性，说明本法具有较高的专属性。

连翘鉴别刚开始照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，分别吸取供试品溶液、连翘苷对照品溶液、阴性对照品溶液，分别点于同一以3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿－甲醇－冰醋酸(85∶10∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热，结果薄层板面完全焦化，造成此现象的原因可能是显色剂浓度或者加热温度过高。后用同上条件，在90℃加热，结果斑点显色清晰。

4小结

本文采用薄层色谱鉴别法对清毒口服液中的板蓝根（精氨酸）、知母（菝葜皂苷元）、连翘（连翘苷）进行鉴别，实验结果表明专属性强，分离效果好，操作简便。从以上可以看出，对清毒口服液处方的分析及有效成分的鉴定以及含量测定的方法较多，对其定性鉴别，质量标准的研究较少，为更好的保证其药用功效与治疗作用，扩大治疗适用范围，研究其定性鉴别及质量标准意义重大。

参考文献

[1]张军平，黄小兰，乐海平．抗病毒口服液的质量标准研究[J].中成药学刊，2004，09：13.

[2]国家药典委员会编．中国药典(一部)[M]．北京：化学工业出版社．2005．79．

[3]肖培根．新编中药志(第一誊)[M].北京：化学工业出版社．2001：862-875.