艾滋病抗体阳性患者T淋巴细胞和白细胞检测结果的分析

艾滋病抗体阳性患者T淋巴细胞和白细胞检测结果的分析

徐彩姝王茸

沈阳市第四人民医院辽宁沈阳110031

摘要：目的通过沈阳市三所三级医院HIV抗体阳性患者CD4＋与CD8＋数量之间的关系，分析HIV感染患者T淋巴细胞与白细胞的关联。方法将HIV抗体确证实验结果为阳性的患者的全血标本分别用流式细胞仪和全自动五分类血细胞分析仪进行CD4+与CD8+T淋巴细胞检测和白细胞数量检测，根据CD4+T淋巴细胞绝对值的大小将检测结果进行分组，并将CD4+与CD8+的比值和白细胞的数值分组进行Spearman秩和相关分析，研究CD4+与CD8+T淋巴细胞的比值和白细胞数值的相关性。结果三组分组数据提示CD4+与CD8+T淋巴细胞数的比值和WBC数量两变量间有相关性，且为正相关。结论白细胞数量与CD4+/CD8+T淋巴细胞比值成正相关，白细胞减低可更简单直观的作为HIV感染患者的监测和判断免疫功能的指标。

关键词：艾滋病患者；T淋巴细胞；白细胞；感染监测；免疫功能

目前治疗HIV感染和艾滋病最有效的疗法是HAART，即高效抗逆转录病毒治疗法，能够在短时间内迅速升高患者的CD4+T细胞数并且降低病毒复制，为延长患者寿命改善患者病情提供帮助。感染HIV的患者出现进行性CD4＋T淋巴细胞减少以后，随即表现出与CD8＋T淋巴细胞比值减低甚至倒置的现象，艾滋病时期其比值通常小于0.5，此时提示患者体内细胞免疫功能严重受损，因此，CD4＋与CD8＋T淋巴细胞的比值是评估细胞免疫功能常用的重要指标。通过对患者CD4＋和CD8＋T淋巴细胞的测量发现，其比值可能与机体白细胞数存在一定关联。

1.研究对象与方法

1.1研究对象

本研究针对沈阳市三所三级医院即沈阳军区总院（三级甲等）、解放军第463医院（三级甲等）、沈阳市维康医院（三级乙等），2016-2018年三年内进行手术前强制筛查的患者以及门诊自愿进行艾滋病抗体筛查实验并且HIV抗体确证实验结果为阳性患者患者中展开研究。

1.2研究方法与实验

将HIV确证实验结果为阳性的患者的全血标本分别用流式细胞仪和全自动五分类血细胞分析仪进行CD4+与CD8+T淋巴细胞检测和白细胞数量检测，根据CD4+T淋巴细胞绝对值的大小将对应数据分组，并将CD4+与CD8+的比值与白细胞的数量分组做Spearman秩和相关分析，资料中的数值采用均值±标准差形式表示，研究比值与白细胞数量的相关性。

1.2.1主要仪器、试剂及耗材

⑴BC-6800血液细胞分析仪（迈瑞生物医疗公司）

⑵M-68DS稀释液（迈瑞生物医疗公司）

⑶M-68DR稀释液（迈瑞生物医疗公司）

⑷M-68FD染色液（迈瑞生物医疗公司）

⑸M-68FN染色液（迈瑞生物医疗公司）

⑹M-68FR染色液（迈瑞生物医疗公司）

⑺M-68LD溶血剂（迈瑞生物医疗公司）

⑻M-68LB溶血剂（迈瑞生物医疗公司）

⑼M-68LH溶血剂（迈瑞生物医疗公司）

⑽M-68LN溶血剂（迈瑞生物医疗公司）

⑾BDFACSCalibur流式细胞仪（美国BD公司）

⑿鞘液（美国BD公司）

⒀T淋巴细胞亚群检测试剂盒（美国BD公司）

⒁FALCON管（美国BD公司）

⒂溶血素（美国BD公司）

⒃PBS清洗液（美国BD公司）

1.2.2检测原理和方法

⑴白细胞的检测：BC-6800全血细胞仪采用鞘流阻抗法和激光散射方法，并用荧光染色的流式细胞技术将细胞进行计数和分类

⑵淋巴细胞检测：免疫荧光法，将单克隆抗体用荧光素加以标记加入全血中，抗体与白细胞膜上对应的抗原相结合，经洗涤、溶血等多个步骤反应后进行流式细胞测量，进而得到T淋巴细胞亚群的百分比，再通过计算得到具体数值。

1.3数据的整理和分析

采用Excel表格、智方LIS系统和SPSS20软件进行计算和统计学分析。Spearman秩和相关分析中，гS<0提示负相关，гS>0提示正相关，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2.结果

根据患者的CD4+T淋巴细胞数绝对值，按照每微升CD4+<200、200≤CD4+<500、CD4+≥500分为三组（细胞流式图见图1），将各组对应的CD4+与CD8+T细胞的比值和WBC数进行相关分析，Spearma秩相关系数гS分别为0.457、0.392、0.349，均大于0为正相关，且三组数据的相关系数гS对应的P值分别为0.028、0.008、0.019，有统计学意义。结果提示CD4+和CD8+T细胞的比值与白细胞数值两个变量之间存在正相关（详情见表1）。

表1不同CD4+分组时CD4+与CD8+T淋巴细胞的比值与WBC的相关性

图1患者全血CD4/CD8/CD3细胞流式检测结果图

3.讨论

艾滋病的防治不仅要重视治疗，治疗监测也是重要的环节。早发现、早诊断、早治疗是艾滋病防治工作的重要措施，CD4+T淋巴细胞数是反应机体免疫状况及判定是否开始HARRT抗病毒治疗和治疗监测的参考指标[1，2]。晚期艾滋病患者CD4+T淋巴细胞数可降至200个/μL以下，此期主要临床表现为HIV相关症状、各种机会性感染及肿瘤，并且此时在并存其他感染的情况下推荐先抗HIV治疗；CD4＋T淋巴细胞计数在200～500个/μL的患者建议每12个月检测1次，此时若合并其他病毒感染，可先抗其他病毒感染治疗；CD4＋T淋巴细胞计数>500个/μL的患者可选择性进行CD4＋T淋巴细胞计数检测。并且被感染患者体内的HIV病毒载量越高CD4+T淋巴细胞数量越少，呈负相关，是对病毒载量有间接评价的指标。但CD4+T淋巴细胞数容易受到各种原因的干扰，因此与其他项目联合检测更有助于掌握和观察HIV患者的病情变化并及时整改救治措施[3-5]。CD4+与CD8+T淋巴的比值通常在1：1-3：1，小于1意味着免疫缺陷严重，因此，他们的比值也为治疗艾滋病和评价艾滋病患者的治疗效果提供有力依据[6]。而CD4+与CD8+T淋巴的比值也容易受到多种因素的影响，比如年龄差异的影响，资料表明[7-9]，可能因为患者年龄越高免疫功能逐渐减退，加剧了CD4+细胞水平的下降导致，导致年龄越高其比值越低，因此其比值作检测指标也需要与其他指标联合诊治。本实验结果表明，CD4+/CD8+T淋巴细胞数量的比值与白细胞数有一定的关联，因此白细胞减低可简单直观的作为提示临床早发现早治疗和治疗监测的重要参考指标。

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[4]StiksrudB，LorvikKB，KvaleD，et，al.PlasmaIP-10isincreasedinimmunologicalnonrespondersandassociatedwithactivatedregutlatoryTsellsandpersistinglowCD4counts.JAcquirImmuneDeficSyndr，2016，73：138-148.

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[9]徐亮，刘国生，邓俊兴.韶关市老年HIV/AIDS人群首次CD4+/CD8+T淋巴细胞计数分析.中国热带医学，2017，17（10）：1009-1011.