特殊染色在肝脏活检病理诊断中的应用

特殊染色在肝脏活检病理诊断中的应用

马洪霞

黑龙江省伊春市中心医院病理科153000

摘要：目的：对应用特殊染色后，肝脏活检组织的病理形态学变化予以探讨。方法：以本院2012年6月-2016年6月间的62例肝病患者的肝组织活检标本作为研究对象，均对其予以铁染色、Masson染色、D-PAS染色与网状纤维Gordon-Sweets嗜银染色，对肝脏组织的各部位所显示的颜色变化进行观察。结果：经铁染色后，肝脏部位的含铁血黄素会呈现出蓝色；经Masson染色后，胶原纤维组会呈现出蓝或绿色，而肌纤维呈现出红色，上皮组织与细胞核则分别呈现出淡红色与蓝黑色；经D-PAS染色后，胆汁、卟啉、脂褐素、铜与铜结合蛋白依次呈现出褐色、深红棕色、红色、紫色；网状纤维经Gordon-Sweets嗜银染色后，会呈现出黑色细丝网状。结论：经特殊染色后，肝脏组织中的不同色素颗粒与组织会显示出不同颜色，对相关疾病与以判断具有重要的指导意义。

关键词：特殊染色；肝脏活检；病理诊断；应用价值

在医学技术不断进步的今天，免疫组化与分子生物学技术在各类临床实践中都得以广泛应用，无论在病情诊断还是治疗过程中都有着不可或缺的作用，因而在临床上愈加受到医学人士的推崇。但作为传统病研究手段之一的特殊染色，对病理诊断而言依旧有着重要的应用价值，其重要性从病理检验类论著中的相关介绍可见一斑。本文以肝组织活检标本作为研究对象，就特殊染色在肝脏活检病理诊断中的应用予以探讨，现简述如下。

1材料和方法

1.1材料

取本院2012年6月-2016年6月间收治的62例肝病患者的肝组织活检标本为研究对象，经浓度为4%的甲醛固定液予以固定，采用常规石蜡进行制片，切片厚度在4-6μm之间。

1.2方法

按照相应求配置染色液，对前述所制切片分别进行铁染色、Masson染色、D-PAS染色与网状纤维Gordon-Sweets嗜银染色，并通过显微镜对相应组织的染色结果予以观察。

2结果

观察结果显示，经铁染色后，肝脏组织中的含铁血黄素显示为蓝色；经Masson染色后，胶原纤维组织会呈现出蓝或绿色，而肌纤维呈现出红色，上皮组织与细胞核则分别呈现出淡红色与蓝黑色；经D-PAS染色后，胆汁、卟啉、脂褐素、铜与铜结合蛋白依次呈现出褐色、深红棕色、红色、紫色；网状纤维经Gordon-Sweets嗜银染色后，会呈现出黑色细丝网状。

3讨论

3.1铁染色

此染色手段常采用普鲁士蓝（Perls）染色法，其作用机理在于含铁血黄素以及蛋白当中的铁元素经普鲁士蓝液染色后，会显示为蓝色，而铜与胆汁经此反应分别会呈现出金褐色与绿色，而对于普通的HE染色而言，含铁血黄素、铜与胆汁的染色结果相近，颜色难以区别，故易被忽略，对结果的准确性影响很大。上述铁染色颗粒于功能正常的肝脏组织中储存量极少，只以铁结合蛋白的形式存在于肝细胞内，而当其中铁含量过多时，就易出现各类血色病，即有继发性血色病、色素性肝硬化、酒精性肝病以及慢性病毒性肝炎等症的患者肝细胞内会存在铁染色颗粒显著增多的情况[1]。若过量的铁在肝脏组织中长时间集聚，就会致使肝组织纤维化与肝硬化的形成，严重者甚至可能会引发肝脏癌变等恶性病症，故而准确的早期诊断十分重要。

3.2Masson染色

此染色法又被称为Masson三色染色法，是相关病理诊断手段中较为常用的一种染色技术，其作用机理在于通过染色，胶原纤维会显示为蓝或绿色，同时肌纤维呈现为红色，上皮组织与细胞核分别显示为但淡色与蓝黑色，据此对染色结果中颜色的分布对肝脏组织的异常情形予以诊断。此过程对于慢性肝炎与肝硬化患者的肝组织纤维化程度以及变异范围的判断具有重要应用价值，同时对于肝脏组织中的动静脉结构异常的判断有着重要意义。另外，还可据此对肿瘤组织中的纤维化程度以及细胞质的浸润程度进行合理判断。目前对于Masson法的应用效果多从纤维病变、纤维化程度以及细胞质浸润程度等方面予以分析[2]，从而对相关病症予以全面准确的判断，同时还是判断桥接纤维化与肝硬化的一种标准方法[3]。另外，该法在瘢痕组织新旧判断方面也表现出良好效果。

3.3D-PAS染色

此种诊断技术的作用机理在于经染色后，胆汁会显现褐色，脂褐素显现红色，同时卟啉显现深红棕色，而铜及其结合蛋白会显现紫色。此法可对PAS阳性物质为糖原的准确度进行有效判断，染色后若阳性物质消失不见即确定为糖原，反之则为非糖原物质。此法主要从以下几方面对相关病情予以判断：活化吞噬细胞中吞噬物质的显现、胆管周围出现的异常基膜情况、α1-抗胰蛋白酶缺乏症的肝细胞内球形小体[4]，另外，对于肝组织中铜贮积量过多的相关阳性颗粒或结合蛋白均会出现染色情况。诸如对原发性的胆汁性肝硬化与慢性C型肝炎患者来说，其胆管多会发生损伤，致使基膜的完整性遭到破坏，出现不同程度的破裂或中断等情形。

3.4网状纤维染色

网状纤维染色又被称为Gordon-Sweets嗜银染色法，其作用机理在于染色后网状纤维会显现为黑色。作为正常状态的肝细胞和肝窦之间的主要支架，网状纤维的异常变化可对肝组织相关病变的程度、性质等方面进行有效反映[5]。例如，网状纤维发生塌陷或者浓缩等情形，就意味着肝实质的丢失；若塌陷程度极为显著，则多为融合性坏死。此外，网状纤维染色对于癌变、普通肉瘤与血源性肿瘤之间的区分具有显著作用，可依据染色后网状纤维的分布情形对相关病症予以判断

综上所述，虽然随着免疫组化与分子病理学的发展，很多传统病理检验方法被取而代之，但特殊染色法在定位确切、操作简便与结果可信方面仍有一定优势，故需对其应用价值予以重视，并结合实际对其进行合理选择后予以使用。

参考文献：

[1]张红雷，徐游贵，王泰龄.特殊染色法在肝脏病理诊断中的应用[J].诊断病理学杂志，2017，24（3）：238-239.

[2]王玉芳，徐晓艳，武彦.常用特殊染色在病理诊断中的应用[J].实用医技杂志，2013，20（12）：1357-1358.

[3]陈阳，陈京，张尉华.肝脏疾病的活检病理分析[J].中国老年学杂志，2014，34（23）：6810-6811.

[4]姜晶，刘楠楠，张继，等.特殊染色在肝穿刺活检组织中的应用价值[J].北华大学学报，2015，16（4）：477-478.

[5]沈志红，秦纯，丛文铭.重视特殊染色在肝脏活检病理诊断中的应用[J].临床与实验病理学杂志，2013，29（4）：424-427.