化学发光法免疫分析与胶体金法检测丙型肝炎病毒抗体结果分析

化学发光法免疫分析与胶体金法检测丙型肝炎病毒抗体结果分析

师毅杜娟花

陕西省延安市延安大学附属医院东关分院输血科，陕西，延安，716000

【摘要]】目的：化学发光法酶免疫分析（CLIA）与胶体金法检测丙肝抗体（HCV-Ab），因其快速﹑灵敏﹑操作简便﹑得到广泛推广，在全国大部分实验室得到推广应于，丙肝病毒抗体（HCV-Ab）输血前筛查检测。用两种方法对我院2012年-2014年入院患者输血前筛查，收集116例弱阳性HCV-Ab标本，S/CO值在1.5~11.0间的阳性血清标本，即临界值附近的阳性血清标本然后用CLIA法和胶体金法同时检测，对比两种方法的灵敏度结果CLIA法检HCV-Ab阳性标本116例，灵敏度为100%，而胶体金只检出19例阳性标本，S/CO值在6.1~11.0时胶体金的灵敏度为16.4%，S/CO值≤6.0时胶体金法则无法检出

【关键词】丙型肝炎病毒抗体，CLIA，胶体金法

中图分类号:R512.63;R446.6文献标识码:A

丙型病毒性肝炎，是一种由据丙型肝炎病毒（Hepatitis，Cvirus，HCV）感染引起的病毒性肝炎，主要通过输血、血液透析、注射毒品、器官移植、母婴等途径传播，据WHO报道全球约1.3亿~1.7亿，我国大概现在有5000多万患者，丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和肝脏纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝癌。目前临床中尚无特效治疗慢性丙型肝炎的（丙肝）药物，对健康人群进行筛选及早发现临床诊断是有效控制丙肝传播的重要手段[1]，目前临床把检测患者血清丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab）作为诊断丙肝的主要依据，胶体金法CLIA法因其灵敏度高、快速、特异性强、操作简便被大部分实验室广泛采用，但本次实验在应用胶体金快速检测HCV-Ab时，对于临界值附近（S/CO值1.5~11.0）的阳性血清标本检出特异性较低。

1.材料与方法

1.1一般资料收集2012年~2014年116例S/CO值在1.5~11.0之间的HCV-Ab血清阳性标本116例，其中男86例，女30例年龄21岁~66岁，平均年龄（41.2±26.4）岁

1.2标本来源

患者晨起空腹时，抽取静脉血3mL~5mL置干燥管，放置水浴箱30mim，离心10mim/3500rpm

1.3方法

13.1仪器与试剂北京科美生物技术有限公司CHEMCLIN600全自动化学发免疫分析仪和丙肝病毒抗体检测试剂盒（化学发光法），由胶体金试剂艾博生物医药有限公司提供，

13.2测定方法

遵循操作者相同，实验室相同、试剂同批号实验原则，对116例标本以离心半径15cm，3500/min离心10min，将离心后的血清分为两份，一份血清用CLIA法在科美CC600全自动化学发光免疫分析仪进行HCV抗体检测，另一份血清则用胶体金法进行检测

13.3结果判读：

①胶体金法在检测线和对照线各出现一条紫红色的条带，判断为HCV-Ab阳性，只出现一条紫色条带对照线，判断为阴性

②CLIA法以，2.1*AVGNE判读阳性(S/CO>1.0)为阳性。

1.4统计学方法应用SAS软件进行统计分析。

2.结果：

71例CLIA法S/CO值<6.0的阳性标本胶体金法检出灵敏度为0%，而CLIA法灵敏度为100%,S/CO值在6.1~8.0时胶体金法灵敏度为（8/25）32%，S/CO值在8.1~11.0时胶体金灵敏度（11/20）55%，胶体金法在这116例阳性标本中S/CO值在1.5~11.0时总的灵敏度16.37%，在55例S/CO值6.1~11.0范围中间胶体金法的灵敏度为34.5%

讨论：

丙肝严重危害人类健康，由于丙型肝炎病毒（HepatitisCvirus,HCV）疫苗研制至今未成功，感染HCV后临床表现较为复杂，窗口期一般为平均82d【2】，经过窗口期、急性期、慢性期最后发展成肝硬化，肝癌。如今灵敏度高，特异性强，准确、可靠的HCV检测技术是预防与控制疾病有效预防治疗的前提。因此探索一种简便快捷、灵敏度高、特异性强、重复性好且窗口期短的HCV检测方法、可以有效的对丙肝病毒进行筛查预防

CLIA法检测HCV抗体应用的是间接法原理以HCVCore、MS3、NS4和NS5基因重组的特异性抗原包被固相载体，具有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性，特别是在医学检验领域中得到广泛应用【3】。

本试验中CLIA法使用的是全自动化学发光仪，操作简单，自动化程度高，减少了人为操作带来的误差，在本次试验中对于S/CO值1.5~11.0的116例弱阳性标本灵敏度远远大于胶体金法，而胶体金法在本次试验中当S/CO≤6.0时则不能检出，总体灵敏度为16.4%大大低于CLIA法。

胶体金法是基于免疫层析技术，具有操作简单，快速方便、多用于，现场检测、医院临床急诊检测和基层实验室等应急快速检验，但是对于HCV检测S/CO值≤6.0的阳性标本则灵敏度为0%，在S/CO值范围在6.1~11.0时灵敏度为34.5%，研究发现随着S/CO值的增加胶体金法的灵敏度也随之增加，，建议胶体金法在临床应用检测HCV只作为急诊初筛，初筛后的标本必须用CLIA法加以复检，以避免比如：HCV窗口期患者、免疫功能受损的病人、隐匿性HCV患者、抗体滴度低的阳性标本漏检。

根据美国CDC2003年公布的《HCV抗体报告和实验室检测导则》，S/CO<3.8者的假阳性率较高[4]CLIA法对S/CO值偏低的样本要慎重必要时用RIBA（免疫印迹法）或检测HCV-PCR核酸进一步验证，以避免假阳性。

参考文献

[1]谷金莲，祁自柏，王尊文，等。丙型肝炎病毒抗体世界检测结果的可信度分析[J].中华检验医学杂志，2005.28（6）：580-583

[2]马明湘，郭屏，肖友益，等。地震灾后短期疾病谱的变迁及医疗预防应对措施探讨[J].中山大学学报科学版，2008.29（4）：372-374

[3]姚仁南，陈复，兴陈玲，等。化学发光免疫分析法检测献血者HCV抗体的应用评价[J].中华全科医学，2011，9（3）：450-453

[4]叶应妩，王毓三，，申子瑜，全国临床检验操作规程[M].3版。南京：东南大学出版社，2006:623-624