毛细管气相色谱和 HPLC法检测头孢美唑中残留溶剂的探究

毛细管气相色谱和 HPLC法检测头孢美唑中残留溶剂的探究

相文

艾美科健 中国 生物医药有限公司 山东省济宁市 272073

【摘要】目的：探讨毛细管气相色谱和HPLC法（高效液相色谱法）在头孢美唑中残留溶剂检测中的应用效果。方法：选择头孢美唑作为研究药物，应用毛细管气相色谱和HPLC法，检测甲醇、乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷以及苯甲醚等多种有机溶剂的残留情况。结果： 经过毛细管气相色谱检查后，甲醇、乙醇、乙酸乙酯、苯甲醚的残留率为0.1%、0.08%、0.07%、0.003%，未检出二氯甲烷。结论：在头孢美唑的合成工艺中，毛细管气相色谱和HPLC法的应用，可以进一步加强药物生产的质量监督、管理，将各类残留溶剂含量控制在限定的范围。

【关键词】毛细管气相色谱；HPLC法检测；头孢美唑；残留溶剂

头孢美唑属于半合成头霉素衍生物，具有良好的抗菌活性，适用于肺炎、支气管炎以及泌尿系感染等疾病的临床治疗。在头孢美唑的合成工艺中，需要应用甲醇、乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷以及苯甲醚等多种有机溶剂，为了保障药物的质量，应该对残留溶剂含量提出严格的质量标准。在头孢美唑的质量检验中，残留溶剂的检测结果是重要的参考依据，需要采取高效、精准的检测方法。根据残留溶剂的检测结果，加强对药物合成的质量控制^[1]。本研究探讨了毛细管气相色谱和HPLC法在头孢美唑中残留溶剂检测中的应用效果。

1材料与方法

1. 1. 材料

仪器：GC-2010型（触屏式）气相色谱仪+全自动顶空进样器（岛津公司），赛默飞高效液相色谱仪。分析纯：乙醇、乙酸乙酯、苯甲醚、N，N-二甲基苯胺。色谱纯：甲醇。

1.2方法

1.2.1毛细管气相色谱检测

在头孢美唑中残留溶剂检测的过程中，需要制备对照溶液、供试品溶液。对照溶液的制备过程中，精密称定甲醇适量，置入量瓶（25ml规格），加水稀释并定容，摇匀，配制成约15.0mg/ml的单一成分贮备溶液。从中精密量取5.0ml，置入量瓶（100ml规格），加水稀释并定容，摇匀，获得对照溶液Ⅰ。分别精密量取对照溶液Ⅰ8.0ml、5.0ml、4.0ml以及3.0ml，分别置入量瓶（10ml规格），加水稀释并定容，摇匀，分别获得对照溶液Ⅱ、对照溶液Ⅲ、对照溶液Ⅳ以及对照溶液Ⅴ。另外分别精密量取对照溶液Ⅰ5.0ml、4.0ml，分别置入量瓶（25ml规格），加水稀释并定容，摇匀，分别获得对照溶液Ⅵ、对照溶液Ⅶ。精密量取对照溶液Ⅰ5.0ml，置入量瓶（50ml规格），加水稀释并定容，摇匀，获得对照溶液Ⅷ。取对照溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ（限量浓度）、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ各2.0ml，分别置于顶空瓶（10ml规格）中，压盖，密封。

精密称定乙醇适量，置入量瓶（25ml规格），加水稀释并定容，摇匀，配制成浓度约为25.0mg/ml的单一成分贮备溶液。从中精密量取5.0ml，置入量瓶（100ml规格），加水稀释并定容，摇匀，获得对照溶液Ⅰ，后续操作同上。

分别精密称定二氯甲烷，乙酸乙酯，苯甲醚适量，分别置入量瓶（25ml规格）中，加N，N-二甲基甲酰胺5ml溶解，加水稀释并定容，摇匀，分别配制成3.0mg/ml，25.0mg/ml，25.0mg/ml的单一成分贮备溶液，从中精密量取5.0ml，置入量瓶（100ml规格），加水稀释并定容，摇匀，分别获得对照溶液Ⅰ，后续操作同上。

取头孢美唑供试品约0.2g，置入顶空瓶（10ml规格），精密加入N, N-二甲基甲酰胺0.3m L和水1.7m L。封瓶后，经超声振荡处理，制备供试品溶液。

色谱条件为HP-5毛细管柱，柱温为维持35℃的温度条件，4min后，升温至80℃（10℃/min），维持80℃的温度条件，4min后，逐渐升温至200℃（10℃/min）。以N₂为载气（流速4ml/L），氢气流量为35ml/min。设置火焰离子化检测器（温度为250℃，分流比：15:1）、顶空样品瓶（平衡温度：80℃；平衡时间：30min）以及进样量（1.0ml）等条件。完成检测后，记录色谱图，按外标法以峰面积计算各残留溶剂的含量。

1.2.2HPLC法检测

精密称定N， N-二甲基苯胺适量，置入量瓶（100ml规格），加甲醇稀释并定容，摇匀，配制成1.6mg/ml的贮备溶液。进一步加水稀释，获得对照溶液Ⅰ、对照溶液Ⅱ、对照溶液Ⅲ、对照溶液Ⅳ以及对照溶液Ⅴ。

取头孢美唑供试品约0.2g，置入顶空瓶（10ml规格），精密加入N, N-二甲基甲酰胺0.3m L和水1.7m L。封瓶后，经超声振荡处理，制备供试品溶液。

完成溶液制备后，取供试品溶液、对照溶液各20μL。应用Diamonsil ODS C₁₈柱，设置柱温（室温）、流动相（甲醇-水：75:25）、流速（1.0mL/min）、波长（254nm）以及进样量（20μL）等多项参数。根据高效液相色谱条件，进行测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算残留溶剂的含量。

2结果

2.1溶剂残留量测定结果分析

分析溶剂残留量测定结果，经过毛细管气相色谱检查后，甲醇、乙醇、乙酸乙酯的残留率为0.1%、0.08%以及0.07%，苯甲醚的残留率为0.003%，未检出二氯甲烷。经HPLC法检测后，未检出N， N-二甲基苯胺。

2.2色谱分析

供试品加标溶液毛细管气相色谱见于图1（1：甲醇；2：乙醇；3：二氯甲烷；4：乙酸乙酯；5：苯甲醚）：

图1供试品加标溶液毛细管气相色谱

供试品加标溶液HPLC色谱见于图:2（1：样品；2：N, N-二甲基苯胺）：

图2供试品加标溶液HPLC色谱

2.3检测限与定量限

按照S/N=3和S/N=10进行检测限、定量限的计算，甲醇的检测限和定量限分别为0.10×10^-6和1.69×10^-6，乙醇的检测限和定量限分别为0.36×10^-6和0.45×10^-6，乙酸乙酯的检测限和定量限分别为0.36×10^-6和0.68×10^-6，二氯甲烷的检测限和定量限分别为0.79×10^-6和1.59×10^-6，苯甲醚的检测限和定量限分别为1.18×10^-6和2.39×10^-6，N，N-二甲基苯胺的检测限和定量限分别为1.48×10^-6和6.27×10^-6。

3.讨论

头孢美唑在临床治疗中有着较为广泛的应用，在药物投入于临床之前，需要做好质量检测工作，加强对药物合成工艺的管理和控制。头孢美唑中的残留溶剂，是影响药物质量的重要因素。因此，在头孢美唑的质量检验中，残留溶剂检测是十分关键的环节，需要利用毛细管气相色谱方法和HPLC法进行检测^[2]。

毛细管气相色谱法是一种高效的分离分析方法，精准度和灵敏度较高。毛细管柱具有良好的化学惰性和热稳定性，载其流动阻力小，可以消除组分的涡流扩散，同时降低传质阻力。通过增加柱长、减小柱径的方式，达到提高色谱分离能力的作用效果，快速进行分析。在头孢美唑中残留溶剂的检测中，可以利用毛细管气相色谱检测法，测得甲醇、乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷以及苯甲醚等多种有机溶剂的残留量^[3]。

HPLC法的应用，则是通过对固定相、流动相的检测，其分离效能高、分析速度快，可以精准、灵敏的测定头孢美唑中残留溶剂。在药物的分析、鉴别中，HPLC法是常用的检测手段，适用于杂质分离、含量测定等各项工作^[4]。在《中国药典（2015年版）》中，记录了HPLC法在含量测定、鉴别、杂质检查等方面的应用情况^[5]。

综上所述，在头孢美唑的质量检测中，应用毛细管气相色谱法和HPLC法，可以准确检出残留溶剂含量，进而对药物质量进行评价，能够为药物合成工艺的管理和控制提供参考。

【参考文献】

[1]朱克旭，张海波.顶空毛细管气相色谱法测定索非布韦原料药中有机溶剂残留量[J].中南药学，2019，17（07）:1108-1110.

[2]米振清.HPLC法考察~（60）Co辐照对牛黄清感胶囊中4种有效成分的影响[J].中国药师，2019，22（12）:2310-2313.

[3]郭思维，李昕，徐兵，等.HPLC法测定头孢他啶血浆药物浓度及临床应用[J].中国临床药理学杂志，2019，35（22）:2903-2906.

[4]袁林，冉丽娟.毛细管气相色谱法测定痰咳净片中冰片的含量[J].检验检疫学刊，2019，29（05）:53-55.