荧光染色法与萋 -尼染色法检测结核分枝杆菌的效果评价

荧光染色法与萋 -尼染色法检测结核分枝杆菌的效果评价

李兢

济南市济阳区疾病预防控制中心 山东省 济南市 251400

摘要：目的：分析比较荧光染色法与萋-尼染色法检测对结核分枝杆菌的效果影响。方法：选取某院2018年2月至2019年2月间收治的疑似结核病且出现症状的患者痰液标本共120例样本，将其随机分组，给予荧光染色法进行检测的设定为荧光组，给予萋-尼染色法设定为染色组，每组60例检测样本。分别对痰液样本进行检测结核分枝杆菌，并对两组检测以后相应的效果以及检出率进行对比分析。结果：通过对两组实际检测查出率进行对比发现，染色组即采用萋-尼染色法检测的查出率为63.33%（38例），荧光组即采用荧光染色法的组别检测查出率为95%（57例）。两组对比，采取荧光染色法的染色组检测查出率明显高于采用萋-尼染色法的染色组，且差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：在实际临床检测过程中，采取荧光染色法进行结核分枝杆菌检测的准确查出率要高于萋-尼染色法，因此在满足正常条件下，可以推广使用荧光染色法进行相关检测，以提高检测率。

关键词：荧光染色法;萋-尼染色法;结核分枝杆菌；效果

结核分枝杆菌（M.tuberculosis），俗称结核杆菌（tubercle bacillus），是引起结核病的病原体。1882年由德国细菌学家郭霍（Robert Koch，1843-1910）发现并证明为人类结核病的病原菌，该菌可侵犯全身各器官，但以引起肺结核最多见。结核病是一种古老的疾病，全球广泛分布，是细菌感染性疾病致死的首位原因^[1]。结核分杆菌作为引起肺结核的常见病因，在当下的医疗手段还没有特别有效的治疗手段。因此对于此方面问题，更好更快且更准确的进行结核分杆菌检测是诊断结核病的重要方式。目前在实验室中多采用的结核杆菌培养法检测周期长，因此实验室诊断主要依据方法是荧光染色法与萋-尼染色法检测，这两种检测方法对检测效果带来怎样的影响是我们本文主要探讨的方向^{2}。因此，选取某院2018年2月至2019年2月间收治的疑似结核病且出现症状的患者痰液标本共120例样本，将其随机分组，按照《中国结核病防治规划·痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》[3]的方法，对痰标本分别涂片、染色、观察、判定，进行结核分枝杆菌检测。现将不同检测的情况的效果报道如下：

1资料与方法

1.1一般资料

选取某院2018年2月至2019年2月间收治的疑似结核病且出现症状的患者痰液标本共120例样本，给予荧光染色法进行检测的设定为荧光组，给予萋-尼染色法设定为染色组，每组60例检测样本。其中门诊部患者两组总计40例患者，每人采集一例检测样本，住院部患者两组共计40名患者，分别于连续两日内清晨采集检测样本，共得到80例检测样本，最终共得到120例样本。本次实验均在患者以及患者家属知情且同意情况下进行。所有患者的基本资料对比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2方法

1.2.1 涂片操作 挑取痰液标本中的脓样、或血样物质部分约0.2ml，均匀涂抹于玻片上，成1cm×2cm大小椭圆形痰膜，保证每一个玻片涂量基本相同。每一分样本涂抹3片，自然干燥后进行相应的加热固定；

1.2.2 萋-尼染色法 滴加石碳酸复红液，加温染色5min；流水冲洗，滴加3%盐酸酒精脱色，至玻片上无肉眼可见红色；流水洗后再用美兰染液复染0.5min，流水冲洗，干后油镜检查。

1.2.3 荧光染色 采用萋-尼染色法相同操作制成痰涂片，短时间加热固定后置于湿盆中，加入荧光颜色剂完成水洗以及烘干步骤，进行相应的检测记录。

1.3观察

染色组，通过光学显微镜进行相应的观察，根据视野内观察到的分枝杆菌分布情况进行影响判断。

荧光组，使用荧光显微镜进行涂片观察，结核分枝杆菌与其他细菌颜色不同，根据视野内发现量多少进行判断。

1.4统计学分析

本组实验涉及到的数据信息统一采用SPSS20.0软件进行分析，计量资料用t检验，用均值标准差表示，计数资料用X²检验，用%表示，组间比较，差异显著性水平均为：P＜0.05。

2结果

通过对两组实际检测查出率进行对比发现染色组即采用萋-尼染色法检测的查出率为63.33%（38例），荧光组即采用荧光染色法的组别检测查出率为95%（57例）。两组对比，采取荧光染色法的染色组检测查出率明显高于采用萋-尼染色法的染色组，且差异均有统计学意义（P＜0.05）。

3讨论

近20年国际组织提出控制结核病主要方法有：发现和治疗痰菌阳性者，在传染源上进行防控；卡介苗（BCG）接种。目前较普遍的看法是接种后尚不足以预防感染，但可以显著降低新生儿发病及严重性。Dots战略是who根据20年来的经验将其上升为一种保证结核病控制对策获得成功的战略^[4]。其实从这个角度我们也可以发现，针对此问题确实有效的治疗方法还并未发现，因此预防以及尽早检测发现很重要。而对于此细菌的检测方法，根据研究结果，对两组实际检测查出率进行对比发现，染色组即采用萋-尼染色法检测的查出率为63.33%（38例），荧光组即采用荧光染色法的组别检测查出率为95%（57例）。两组对比，采取荧光染色法的染色组检测查出率明显高于采用萋-尼染色法的染色组，且差异均有统计学意义（P＜0.05）。

荧光染色更好的利用了结合杆菌的嗜酸性和对荧光染料的亲和性的特点，更易于染色带来的就是更易于发现^【5】。

综上，实际临床检测过程中，采取荧光染色法进行结核分枝杆菌检测的查出率要高于萋-尼染色法，因此在满足正常条件下，可以推广使用荧光染色法进行相关检测，以提高检测率，增强治疗效果，故方案值得推广。

参考文献

1. 李明远，徐志凯．医学微生物学：人民卫生出版社，2015：163-175

2. 李欣, 青清, 李多孚. 荧光染色法与萋-尼染色法检测结核分枝杆菌的效果评价[J]. 国际检验医学杂志, 2015(6):745-746.

3. 中国疾病预防控制中心 《中国结核病防治规划 痰涂片镜检质量保证手册》（2009版）

[4]赵慧, 王春花, 孙蕊,等. 萋-尼氏抗酸染色法和金胺O荧光染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的对比[J]. 天津医科大学学报, 2018(4).

[5]李彦贞. 萋-尼氏抗酸染色法和金胺O荧光染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的效果比较[J]. 临床医药文献电子杂志, 2019(90).