裂解液加热煮沸法在血清HBV DNA抽提中的应用

(整期优先)网络出版时间:2007-03-13
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目的建立裂解液加热煮沸法抽提血液HBVDNA的方法。方法选取浓度分别为10^6、10^5、10^4、10^3copies/ml的HBVDNA阳性血清,采用5种方法抽提HBVDNA,并用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测抽提产物。结果在HBVDNA浓度为10^6、10^5、10^4copies/ml时5种抽提法(异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/kit/SDS加热煮沸/chelex-100加热煮沸)均能得到阳性结果,而在HBVDNA为低浓度10^3copies/ml时,只有异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/chelex-100加热煮沸能得到阳性结果。结论chelex-100裂解液加热煮沸抽提HBVDNA操作简便、省时、经济,为血液标本HBV基因检测在临床上的大规模应用奠定基础。