HPLC法测定心可舒片中葛根素的含量

HPLC法测定心可舒片中葛根素的含量

张衡伟 1 吴晨 1

烟台中亚医药保健酒有限公司，山东 烟台 264000

【摘要】目的：为了顺利通过山东省食品药品检验研究院组织的针对全省中药生产企业实验室的检验能力评估，通过建立HPLC法测定心可舒片中葛根素的含量。方法：以色谱柱Kromasil(250×4.6mm）以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇-水（25：75）；检测波长250nm，流速:1.0mL/min,进样量:10μL。结果：葛根素线性范围为0.2357～1.868μg/mL，r=0.9998；平均回收率为97.58%，RSD%为1.03%。结论：本法简便、灵敏、准确，可用于心可舒胶囊中葛根素的含量测定。

【关键字】 心可舒片；葛根素；高效液相色谱法

[Abstract] Objective:To evaluate the laboratory successfully passed for traditional Chinese medicine production enterprises inspection organization Inspection Institute of Shandong province food and drug,through the determination of the content of Ge Gensu Shu in the heart can establish HPLC method.Methods:the Kromasil column (250*4.6mm）with eighteen alkyl silane bonded silica as filler;mobile phase:methanol water (25:75);thedetection wavelength of 250nm,flow rate:1.0mL/min,sample size: 10uL.Results:the linear range of Puerarin was 0.2357～1.868ug/mL,r=0.9999,the average recovery was 97.58%,RSD% was 1.03%.Conclusion:the method is simple,sensitive and accurate.It can be used to determine the content of puerarin.

[Key words] Xin Ke Shu tablets;puerarin;high performance liquid chromatography.

心可舒片是以山楂、丹参、葛根等药物为主药的片剂,具有活血化瘀、行气止痛功效。用于气滞血瘀型冠心病引起的胸闷、心绞痛、高血压、头晕、头痛、颈项疼痛及心律失常、高血脂等症。本文探究HPLC法对制剂中的主药葛根的有效成分进行含量测定,探究该方法准确可靠、专属性强、可用于该制剂的质量控制。

1.实验材料

1.1仪器：Waters高效液相色谱仪(美国)：510泵,U6K进样器,486UV检测器,746数据处理器。

1.2试药：葛根素标准品(中国药品生物制品检定所，批号:0752-9605)；心可舒片(山东省食品药品检验研究院)；甲醇(优级醇)；正丁醇(色谱纯)；氨试液自配。

1.3色谱条件：Nova-PakC18反相柱(4μm，3.9mm×150mm)，流动相为甲醇-水(20：80)，检测波长247nm，柱温35℃，流速1.0ml/min,

进样量10μl,葛根素保留时间为10.35min,数据处理为外标峰面积法。

HPLC图

2方法和结果

2.1标准曲线的制备:精密称取一定量的葛根素对照品,用50%甲醇分别制成1.25,2.5,5,10,20mg/L标准溶液,各进样10μl,以峰面积Y对浓度X进行回归,得y=384.63+85783.57X,r=0.9999(n=5)。

2.2空白试验:取处方中除葛根以外的其余药材,按规定工艺制备成片剂后,依样品溶液制备方法制成空白液,按样品的测定方法和色谱条件进样测定。

2.3 葛根素含量的测定

2.3.1样品溶液的制备：取心可舒片10片，加85%乙醇30ml，置水浴上回流提取1h，冷却后过滤,滤液蒸干，残渣加水20ml加热溶解，溶液离心10min，取上清液加正丁醇20ml，振摇提取3次，分次用氨试液洗脱，合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣加甲醇5ml溶解作为样品溶液。

2.3.2样品的测定:取样品溶液50μl定量溶解于50ml容量瓶，精密吸取10μl,在上述色谱条件下进行分析,测定葛根素的峰面积,用外标峰面积法计算葛根素的含量,每批测定3份。

2.4 加样回收率试验:取同一批号的心可舒片5片,精确加入一定量的葛根素标准贮备液(0.8000g/L),按上述高效液相色谱法测定。

3 讨论

3.1 在样品溶液的制备过程中,为了保证样品中葛根素充分提取,采用同一批样品分别对提取溶剂、方法、时间进行了试验,结果表明采用85%乙醇水浴回流1h,提取效果最佳。

3.2 采用上述方法提取心可舒中主要成分葛根素,其方法提取完全,稳定,杂质对分离无干扰,选择性较强。

参 考 文 献

《中国药典》2015年版一部