摘要目的探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor，α7nAchR)在迷走神经电刺激治疗缺血性脑卒中模型小鼠神经炎症损伤中的作用及机制。方法90只SPF级小鼠按照随机数字表法分为假手术+迷走神经电刺激组(sham+VNS组)、模型组(永久性大脑中动脉闭塞组pMCAO组)、模型+迷走神经电刺激组(pMCAO+VNS组)、模型+α7nAchR激动剂组(pMCAO+P组)、模型+迷走神经电刺激+α7nAchR拮抗剂(pMCAO+VNS+A组)、模型+迷走神经电刺激+α7nAchR拮抗剂安慰剂组(pMCAO+VNS+AC组)。造模时监测各组小鼠生命体征变化，并于造模成功后7 d、14 d和21 d通过神经系统严重程度评分(neurologic severity score，NSS)和胶布撕脱实验进行神经功能缺损评估；采用免疫荧光法和Western blot法检测小鼠脑组织α7nAchR的表达及其神经细胞定位，ELISA法检测炎性因子TNF-α和IL-6含量。采用Prism 8.0软件进行统计分析，采用单因素方差分析对造模期间生理参数进行统计，使用重复测量方差分析比较神经行为学评分结果，t检验比较蛋白质水平以及荧光强度。结果(1)重复测量方差分析结果显示，NSS评分中组别与时间的交互作用不显著(F＝0.91，P>0.05)，各组小鼠的组别主效应(F＝46.68，P<0.05)与时间主效应(F＝25.56，P<0.05)均显著。Tukey's检验结果显示，在第21天的NSS评分中，pMCAO+VNS组和pMCAO+P组小鼠的NSS评分均明显低于pMCAO组(P<0.05)；pMCAO+P组与pMCAO+VNS组比较则差异无统计学意义(P>0.05)；pMCAO+VNS+A组小鼠的NSS评分均高于pMCAO+VNS组(P<0.05)，同时又明显低于pMCAO+VNS+AC组(P<0.05)。胶布撕脱实验中，小鼠的胶布接触时间和撕脱时间中组别与时间的交互作用不显著(F＝0.67，0.71，均P>0.05)，各组小鼠的组别主效应(F＝30.12，42.46，均P<0.05)与时间主效应(F＝52.18，47.34，均P<0.05)均显著。Tukey's检验结果显示，在第21天的胶布撕脱实验中，pMCAO+VNS组小鼠的胶布接触时间和撕脱时间均明显短于pMCAO组(均P<0.05)；pMCAO+P组与pMCAO+VNS组比较则差异没有统计学意义(均P>0.05)。(2)免疫印迹实验表明，与pMCAO组(0.36±0.01)相比，pMCAO+VNS组和pMCAO+P组α7nAchR表达均增加[(0.83±0.03)、(0.67±0.02)，t＝13.53，16.08，均P<0.01]，pMCAO+VNS+A组(0.37±0.01)较pMCAO+VNS组较显著降低(t＝12.88，P<0.01)。免疫荧光结果也显示，与pMCAO组(3.75±0.19)相比，pMCAO+VNS组和pMCAO+P组小鼠脑组织α7nAchR蛋白表达均增加[(8.96±0.48)、(8.17±0.64)，t＝10.04，6.67，均P<0.05]。(3)ELISA结果表明，与pMCAO组比较，pMCAO+VNS组及pMCAO+P组小鼠血清和组织上清液中TNF-α水平和IL-6水平均明显降低于pMCAO组(t＝23.28，15.30，12.26，11.08，均P<0.05)。pMCAO+VNS+A组小鼠血清和组织上清液中TNF-α水平以及血清和组织上清液中IL-6水平均高于pMCAO+VNS组(t＝12.70，11.01，11.69，17.37；均P<0.05)和pMCAO+VNS+AC组(t＝12.29，11.07，14.61，29.27；均P<0.05)。结论VNS能够减少pMACO小鼠脑组织炎症反应，改善神经运动评分，这一保护作用可能与VNS诱导的α7nAchR在缺血性脑卒中缺血半影区神经细胞中表达有关。
