布病虎红平板凝集试验与试管凝集试验对比研究

布 病虎红平板凝集试验与试管凝集试验对比研究

王乔

和田地区动物疫病控制与诊断中心 848000

摘要：本文以虎红平板凝集试验和试管凝集试验这两种方法对布鲁菌病进行检测，并对其检测结果进行对比分析。试验选择200例牲畜血清作为研究对象，对所有牲畜同时进行虎红平板凝集试验和试管凝集试验，并从两种试验的准确率入手进行分析。

关键词：布病；虎红平板凝集试验；试管凝集试验；对比研究

前言：布病又叫做布鲁菌病，此病广泛分布在全世界，为人畜共患病。在我国属于二类牲畜疫病，主要在狗、山羊、绵羊、猪等家畜中出现，野生动物也会受到感染。此病最为有效的检测方式为试管凝集试验和虎红平板凝集试验，为提升试验结果准确率，下文对这两种试验结果进行对比分析。

1试验对象及方法

1.1试验对象

本次试验将200例牲畜血清作为试验对象，待测血清样本采集为某市养殖场，采集后均处于-20℃保存。

1.2材料

本次试验使用材料为试管凝集抗原试剂和虎红抗原试剂，两种试剂均在有效期，待检测的血清样本来自上述200例牲畜。

1.3方法

1.3.1SAT

使用试管凝集试验此种检测方法需要先对患者的血清样本进行稀释。稀释需要使用五支试管稀释一例血清样本。在第一支试管中加入2.3毫升的0.9%氯化钠溶液，在第三、四、五支试管中加入0.5毫升的0.9%氯化钠溶液，第二支试管中则不需要加入。再利用1毫升的吸管将待检测的血清样本取0.2毫升混入至第一支试管中，并确保血清和0.9%氯化钠溶液充分混合。确定试管中样本已经充分混合后再利用吸管将第一支试管中的溶液分别吸取0.5毫升加入至第二支和第三支试管中，当第三支试管中样本充分混合后，再次利用吸管将0.5毫升样本转移至第四支试管中，最后将第四支试管中的0.5ml溶液转移至第五支试管后进行均匀混合。此时从第二支试管至第五支试管的稀释度为，8%、4%、2%、1%。完成血清样本的稀释后再将0.5毫升的抗原试剂加入其中。此时对试管内样本进行观察，其稀释度分为别4%、2%、1%、0.5%。并同时准备对照观察所需要的比浊管，将所有待使用的比浊管、试验管进行震荡后将所有血清样本和制备后的设备放入37℃的温箱内，放置时间控制在22小时，取出后将其在常温环境中放置两个小时，最后将比浊管当前的状态为依据进行判断。当血清样本1%稀释度凝集现象为双+就可以判断该份血清样本为阳性。

1.3RBPT

使用虎红平板凝聚试验时，需要取出0.03毫升的待检测血清样品，将其放置在玻片上，并且将抗原剂加入至玻片上方，利用人工振荡的方式使其充分混合，通常在五分钟内玻片就会产生变化。如果玻片中的混合液体中存在颗粒状或产生凝集片则可以判断该份血清样本为阳性，如果混合液体较为浑浊，则可以判断为阴性^[1]。

2试验结果及对比分析

2.1结果

通过对二百例牲畜血清样本进行检测，其中SAT有九份阳性结果，RBPT有十八份阳性结果。总的来看，全部检测样本为200例，虎红平板凝聚试验检测出阳性数目为十八例，阳性率为9%，试管凝集试验检测出阳性数目为九例，阳性率为4.5%。并且RBPT检测出阳性结果的血清样本中包含着SAT检测出的血清样本。

2.2对比分析

根据上述试验结果可以发现，在相同血清样本的情况下，RBTP和SAT两者的检测能力有着较大差别，在此次对比试验中，RBTP检测的阳性率为9%，SAT检测阳性率为4.5%。从此可以得出，两种试验存在着较大差异性，虎红平板凝聚试验和试管凝集试验相比较在测定布病方面有着较大优势。从检测操作过程中可以发现，RBTP有着极快的反应速度，可以在五分钟内产生结果，而且操作过程非常简单，并且非常凝集结果也较为明显，工作人员很容易就可以观察到玻片上的凝集反应，此种方法在实际应用中较为容易出现假阳性的情况，但较为适合大面积筛查，可以有效减少工作人员的劳动量，提升筛查效率。试管凝结试验在试验过程中可以定量定性，有着极强的特异性和敏感性，判断结果通常比较精确。但此检测方法的缺点为所需的血清样本数量较多，并且需要使用的凝集抗原量较大。工作人员使用试管凝集试验时需要大量的试验器材，这在一定程度上就增加了检测成本，因此此种检测方法并不适合做大面积筛查，只能做小范围的精准检测，并且还需要大量抗原剂，进一步增加了检测成本，同时该种检测方法较为繁琐，工作人员在检测过程中工作强度较大。由于需要将血清样本放置在37℃的温箱中22小时，这便增加了检测时间，降低了检测时效性，所以更不适合用在大面积筛查中。

布病的主要传染来源为患病的牛、羊、猪等互相进行传播，可以通过接触途径传播，经由呼吸道和消化道，布鲁菌会对牲畜多处组织器官侵袭，给牲畜身体造成直接损害，进而影响养殖户经济效益。此病在世界各地广泛流行，对于我国养殖业有着较为严重的影响。该病在牲畜感染时出现的症状缺乏典型性，和很多种疾病非常相似，所以在对牲畜进行检测时很容易出现漏诊和误诊的情况，此种情况很容易使得牲畜错过最佳治疗时机，进而使得公畜出现睾丸炎，母畜出现流产等情况，对养殖户经济效益造成影响所以利用合适的检测方法进行检测是十分必要的。在基层实验中，通常会因为一些条件方面的限制，在检测布病方面有着一定难度，所以在临床中通常使用血清学的检测方法进行检测。上述研究中利用的是虎红平板凝集试验和试管凝集试验来对布鲁菌进行检测，根据结果说明，虎红平板凝集试验数据值更高，此种试验方法利用的是lgG类抗体，这就意味着对布鲁菌抗体的敏感度较高，所以也就很容易出现假阳性的情况，这就是敏感度较高导致的，但该种检验方法由于操作极为简单便捷，可以大规模对牲畜进行筛检，有着很高的实际应用价值。试管凝集试验是基层实验室中经常使用的检测方法，该检测方法检测项目为lgM类抗体，这便意味着可以将检测结果定量和定性，还可以对血清样本检测前和检测后进行对比分析，有助于观察牲畜治疗疗效，所以其特异性较高

^[2]。

结论：综上所述，两种检测方法都有着自身的优势和缺陷，为最大限度提升检测准确率，可以先利用RBPT进行初次筛查，再利用SAT复核，以此种方式提升检测结果的准确率，从而达到保护养殖户经济效益的目的。

参考文献：

[1]刘坤洋. 布鲁氏菌病虎红平板凝集试验的影响因素及注意事项[J]. 新农业,2020,(19):38.

[2]刘婕妤. 布病虎红平板凝集试验与试管凝集试验的对比[J]. 甘肃畜牧兽医,2020,50(02):69-70.