PCR检验法用于细菌检验的效果观察

PCR检验法用于细菌检验的效果观察

焦德明1,柏懿宸2 ,权莉,4,李泓萱3 ,刘茵4 ,姜爱波4

1城子河区疾控中心 2鸡西市民康医院 3鸡西市鸡矿医院 4鸡西市传染病医院

摘要:目的：分析PCR在细菌试验中的临床效果。方法：将我院224份不同细菌样本分为对照组和观察组，每组各112例。对照组细菌采用常规革兰氏染色法检测，观察组细菌采用PRC检测法检测。并对两种试验方法的试验结果进行了比较。结果：观察组细菌检出率明显高于对照组细菌检出率，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：在临床细菌试验中，采用PCR进行检测，可以获得更好的结果，在灵敏度和特异性方面具有明显的优势，值得临床应用。

关键词:PRC检验法；细菌检验；临床效果

在临床医学检查中，细菌检查的结果可作为临床疾病诊断和治疗的依据。高质量的检测结果可以准确地反映患者的疾病发展状况。近年来，随着临床诊断技术和治疗方法的发展，聚合酶链反应(PCR)在临床诊断中得到了广泛的应用。该检测方法在临床细菌检测中的应用可以快速、准确地诊断细菌感染。本文选取我院收治的不同细菌样本为研究对象，研究PCR检测在细菌检测中的临床效果。

1资料和方法

1.1一般资料

选择我院收治的224例不同细菌样本进行研究，年限为2018年3月-2019年4月。有15例粪便样本，47例尿液样本，63例痰液样本；27例为生殖道分泌物；42例为脓肿、创伤组织样本，30例为血液样本。全部样本都进行规范采集、运送和处理。随机分成两组。112例对照组、112例观察组。

1.2方法

对照组采用常规革兰氏染色法检测，观察组采用PCR法检测。将玻璃片在95%乙醇溶液中浸泡5min，然后擦拭干净并干燥。将对照组的细菌样品均匀地涂片在玻璃片上，并在显微镜下观察。观察组待测细菌样品置于生理盐水中，12000r/min离心。将离心时间控制在10分钟左右，并取出标本的上清液。然后加入碱性裂解液。在98摄氏度下加热10分钟，然后重复离心5分钟，选择部分上清液制作DNA模板。采用PCR扩增仪进行PCR检测。根据需要将混合物配置为循环参数。同时，也需要设置阳性模板和阴性模板来进行比较。细菌培养液的检测结果应严格按照操作手册和PCR检测试剂的说明进行操作。

1.3数据处理分析

全部数据使用SPSS21.0处理，采用（x±s）表示计量资料，使用t检验组间差异，P<0.05说明组间差异显著。

2结果

检查结果表明，观察组细菌检出率明显高于对照组，组间差异显著（P<0.05）。见表1。

表1   对比两种检验方法的结果（n，%）

3讨论

在临床体检中，细菌检查是疾病诊断和治疗的重要基础。良好的细菌检测结果可以准确地显示患者的疾病状态。革兰氏染色法是目前临床应用中最广泛的细菌检测方法之一，其操作相对简单，广泛应用于各种细菌的检测。然而，由于多种因素的共同影响，革兰氏染色方法存在一定的错误。在本研究的实现，对照组的细菌测试常规革兰氏染色法，观察组的细菌应用PRC检验方法，对照组的细菌测试常规革兰氏染色法。结果显示，观察组细菌检出率为73.2%，对照组细菌检出率为32.1%，差异有统计学意义(P<0.05)。显然，革兰氏染色法比PCR法有更多的误差。因此，PCR检测方法的准确性越来越受到人们的关注，并在各种基因表达和相关检测领域得到了应用。该检测方法的原理是用一对引物和一个特异性荧光探针进行PCR扩增。探针的两端都由猝灭的荧光基因和报告基因组成。

当探针完好时，猝灭基因吸收被测试基因发出的荧光信号。随着测试的继续，引物延伸到探针位置，Tap酶执行其活性，从探针中分离出探针位点荧光因子。此时，猝灭基因失去了猝灭功能，促进其发光，分离的荧光因子的数量与PCR产物的数量成正比。通过计算相关数据，可以测试细菌的性质。本研究充分证明了PCR比革兰氏染色具有很好的优势。综上分析，使用PRC用于细菌检验，能够取得很好的效果，具有比较好的敏感性以及特异性，而且检验操作方法非常简单，能满足临床细菌检验的要求，值得进行推广。

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