新冠病毒核酸检测实验室质量控制措施建立初探

新冠病毒核酸检测实验室质量控制措施建立初探

叶招兴1,陈凯琦1 ,陈丽云1,谢志碰2

1:南安市疾病预防控制中心

2:南安市医院

摘要：目的：探究新冠病毒核酸检测实验室质量影响与质量控制措施。方法：对本中心新冠病毒核酸检测实验室质量调查，详细探究影响因素并探讨质量控制措施。结果：经调查记录显示，近三月实验室室内质控靶标N基因超出x±s有2次；CV=7.67%，靶标ORFlab基因检测超出x±s有3次，CV=5.28%；对环境监测发现份拭子样本检测结果均为阴性，而对实验室内检测人员的检测发现N基因CV=7.89%，但检测人员工作年限是否＞5年与检测结果无较大相关性，P＞0.05；在对试剂的验证检测中，发现高、中、低值对照品的CV值均小于5.0%。结论：从结果来看，新冠病毒核酸检测实验室质量控制应积极参考实验室内部质控、环境监测质控、工作人员质控、试剂验证质控等因素。

关键词：新冠病毒；核酸检测；实验室；质量控制

确诊新冠肺炎，需要有病毒核酸及病毒抗体阳性的依据[1]。新型冠状病毒在核酸结构上有自己的特点，为RNA病毒，主要在细胞内复制，具有高传染性、高致病性、高致死性的特点，对人体健康造成极大的危害，使大范围内感染难以控制[2]。基于以上情况，我科室开展了关于新冠病毒核酸检测实验室质量影响与质量控制措施研究，以下为本次探究的详细分析与报告：

1.资料和方法

1.1资料

将本实验室检测的新冠病毒核酸样本、日常检测工作、复核样本以及市疾控中心指控措施，作为本次研究的实验对象[3]。

1.2工具

实验室所用试剂均为国产X公司提取试剂，扩增新冠病毒荧光定量 RT-PCR检测试剂盒，提取仪器为上海天隆核酸提取仪，扩增仪器为ABI QuantStudio 7 Flex实时荧光定量PCR仪。选用水平2、弱阳性的新冠病毒核糖核酸非定值质控品[4]。

1.3方法

①使用荧光定量RT-PCR法，依照操作规范，吸取 200μL咽拭子标本，弱阳性质量控制也为同样规格，加入提取模块中，提取RNA，用试剂盒进行扩增反应，将5μLRNA加入PCR反应体系，混匀后离心处理，PCR反应程序检测[5]。

②做好记录，总结数据并进行分析，完成调研报告。

1.4质量控制措施

①实验室内部质控：选择近三个月本实验室内同批次的质量控制进行分析，以Ct为基线数据分别对x、s、x+s、x-s进行计算，若检测值在x±s范围内，则表示检测在控制范围内，反之，若超出x±s范围，则表示检测失控。

②环境监测质控：将实验室内各操作环境进行拭子标本采集，包括操作台面、柜门、门把手等。然后进行实时荧光定量RT-PCR检测，方法同①。

③工作人员质控：根据实验室内检测工作人员的工作年限，分为工作年限五年以上与工作年限五年以下分为两组，每组各选取五名工作人员，并选取同一批次的质控品，在相同的检测环境下分别由两组工作人员进行检测，对比CV变异数值。

④试剂验证质控：选取同一批次试剂进行检测验证，验证项目包括阴性和阳性符合率，最低检出限，精密度验证三方面。

1.5统计学方法

SPSS21.0与OFFICE EXCEL 2010数据处理，采用t值/x2值检验，P＜0.05则有统计学意义。

2.结果

2.1 实验室内部质控情况

本研究具体计算分析检测记录，具体结果详情见下文表2-1、2-2：

表2-1实验室内部质控情况（n，%）

表2-2检出限检测结果（Ct值）

3.结论

经调查记录显示，近三月实验室室内质控靶标N基因超出x±s有2次；CV=7.67%，靶标ORFlab基因检测超出x±s有3次，CV=5.28%；对环境监测发现份拭子样本检测结果均为阴性，而对实验室内检测人员的检测发现N基因CV=7.89%，但检测人员工作年限是否＞5年与检测结果无较大相关性，P＞0.05；在对试剂的验证检测中，发现高、中、低值对照品的CV值均小于5.0%。结论：从结果来看，新冠病毒核酸检测实验室质量控制应积极参考实验室内部质控、环境监测质控、工作人员质控、试剂验证质控等因素。这也符合其他专家对这一研究的结果，有望积极应用于新冠病毒核酸检测实验室质量控制工作之中。

参考文献

[1]蒋皓,沈洲.非公办独立医学实验室在大规模新冠病毒核酸筛查中的实践与启示[J].南京医科大学学报(社会科学版),2022,22(02):169-173.

[2]蒯文和,吴忠兰,韩坤,马学平,张薇,杨东智,曹慜,袁芳,赵建华.新冠病毒核酸检测实验室质量控制措施建立初探[J].中国公共卫生管理,2021,37(06):838-841.DOI:10.19568/j.cnki.23-1318.2021.06.0035.

[3]刘方遥,于芳,张恒,何梓瑶,王建,赵燕航,江初.北京市海淀区新型冠状病毒核酸检测实验室污染情况调查与处理[J].国际病毒学杂志,2021,28(03):257-260.

[4].关于印发大规模新冠病毒核酸检测实验室管理办法(试行)的通知[J].中华人民共和国国家卫生健康委员会公报,2021(02):33-36.

[5]闫修魁,黄启当,胡亮杉,戴颖仪,田军章,林剑国.P3实验室检测新冠病毒核酸流程管理及体会[J].现代医院,2020,20(05):628-633.