儿童肺炎支原体感染诊断间接免疫荧光法检测的价值研究

儿童肺炎支原体感染诊断间接免疫荧光法检测的价值研究

1杨泽2陈艳华3杨艳秋4李莲

云南省 德宏州人民医院检验科  678400

 摘要：目的 本文旨在观察间接免疫荧光法检测诊断儿童支原体感染的价值。方法 纳入我院收治于2021年3月10日～2022年4月30日16例儿童肺炎支原体感染患者与同期16例非感染性疾病患者为研究观察对象，所有患者均行间接免疫荧光法检测，观察间接免疫荧光法检测诊断儿童肺炎支原体感染效能。结果 间接免疫荧光法检测儿童肺炎支原体感染诊断与实际情况，无明显差异（P＞0.05）。间接免疫荧光法检测诊断儿童肺炎支原体感染诊断符合率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、Youden值均较高。结论 将间接免疫荧光法检测应用在儿童肺炎支原体感染诊断价值较高，可推广。

关键词：间接免疫荧光法；儿童肺炎支原体感染；Youden值

儿童肺炎支原体感染是临床常见的小儿感染性病变，早期无典型临床症状，容易被患儿忽视，导致病情不断恶化，生存质量下降。采用科学手段及时分析患儿病情，以根据患儿情况采取针对性治疗，改善患儿病情。当前在儿童肺炎支原体感染诊断上，多依赖血清学检测手段，包括化学发光法、被动凝集法、间接免疫荧光法等[1]。关于三种儿童肺炎支原体感染诊断方式价值，成为近年来研究热点。基于此，本文研究以16例儿童肺炎支原体感染患者与同期16例非感染性疾病患者为研究对象，分析间接免疫荧光法检测应用价值，报告如下。

1一般资料与方法

1.1一般资料

患者均为就诊我院儿科门诊和住院部，共计患者32例（16例儿童肺炎支原体感染患者+16例非感染性疾病患者）为研究观察对象，收治于2021年3月10日～2022年4月30日，所有患者均行间接免疫荧光法检测。16例患者分布情况，男9例、女7例，年龄6月～11（5.93±1.73）岁。

纳入标准：（1）所有患者均有咳嗽、发热等症状。（2）所有患者家属对本次研究知情同意，研究经本院伦理委员会核准。（3）凝血功能正常。（4）临床资料齐全。（5）有自主意识，可以配合医护人员完成检测操作。

排除标准：（1）合并其他系统感染的患儿；（2）合并传染性疾病患者。（3）存在遗传性疾病、先天性疾病患者排除。（4）入组研究前1个月服用过其他影响研究结果药物者。

1.2方法

所有患者样均进行间接免疫荧光法检测。采集患儿空腹静脉血2ml，待血液凝固后，经低速离心分离出血清，待检。当天未检测的血清样本放置于2℃～8℃冰箱保存。使用间接免疫荧光法检测呼吸道病原体谱抗体IgM检测试剂盒，所用的试剂盒由欧蒙医学实验诊断股份公司提供。严格按照试剂说明书来检测操作。第一步，吸取稀释后血清30μL，加样至样本反应区，之后将载片覆有生物薄片的一面朝下盖在加样板的凹槽里，将反应温度控制在18℃一25℃范围内，温育30分钟。第二步，配制磷酸盐吐温缓冲液（全称phosphate buffer saline，简称PBS），用容器盛PBS吐温缓冲液流水冲洗载片，并浸入PBS缓冲液中，浸泡时间控制在5min。第三步，洁净加样板反应区加入25μL荧光二抗，后将反应载片背面和边缘擦干，加盖在加样板的凹槽里，室温18℃一25℃避光温育，反应时间控制30min，重复冲洗浸泡5min操作。第四步，缓冲甘油滴加，载玻片覆盖，置于荧光显微镜下由经培训持证检验专业人员镜检。

1.3观察指标

观察间接免疫荧光法检测诊断效能，诊断效能从Youden一致性、诊断符合率、灵敏度、特异度、误诊率、漏诊率、阳性预测值、阴性预测值情况行观察，具体计算公式见表1。

表1 计算公式

1.4统计方法

研究计数资料n（%）表示、组间对比检验，P＜0.05，差异显著标准，统计工具SPSS 24.0软件。

2结果

间接免疫荧光法检测诊断儿童肺炎支原体感染Youden值0.8965、诊断符合率94.83%、灵敏度93.10%、特异度87.50%、误诊率3.43%、漏诊率6.78%、阳性预测值87.50%、阴性预测值93.35%，具体检出情况见表2。间接免疫荧光法检测儿童肺炎支原体感染诊断符合率94.83%与实际情况100%比对，=3.080 差异不显著（P＞0.05）。

表2 儿童肺炎支原体感染间接免疫荧光法检测情况

3讨论

肺炎支原体（全称Mycoplasma pneumoniae，简称MP）是目前已知的一种最小的可自我复制的原核细胞微生物，可以通过人群普遍易感、飞沫经呼吸道传播，此感染多见于儿童。MP无细胞壁，一般所用的抗感染药物对其效果并不明显，多需要采用氟喹诺酮类、大环内酯类药物进行治疗。因此，采取科学手段加以鉴别极为重要

[2]。

患儿出现肺炎支原体感染后，机体免疫系统积极应对，出现相应抗体，为通过抗体鉴别儿童是否出现感染提供可能。基于间接免疫荧光法测定MP-IgM的方法可以检测多种抗体，及时发现给患者是否存在感染情况，为患者后续治疗提供参考。本次研究观察16例儿童肺炎支原体感染患者与同期16例非感染性疾病患者，间接免疫荧光法检测与实际情况相符合，诊断符合率、灵敏度、特异度、Youden值较高。提示，在儿童肺炎支原体感染诊断中，可以采用基于间接免疫荧光法进行检测[3]。基于间接免疫荧光法检测中，为进一步确保诊断准确性，可以对整个检验操作程序进行优化，规范检测，准确鉴别患儿情况，为患儿后续治疗提供可靠参考。本研究选取样本量小，下次研究扩大样本，深入分析间接免疫荧光法检测质量提升方案，为儿童肺炎支原体感染科学诊断提供支持。

综上所述，儿童肺炎支原体感染发生率较高，结合儿童情况，血清学诊断方式应用率较高，间接免疫荧光法检测属于常用的血清学诊断手段，操作相对简单，可以较准确分析患儿情况。儿童肺炎支原体感染诊断间接免疫荧光法检测价值较高，诊断符合率、灵敏度、特异度、Youden值等均较高，值得推广。

参考文献

[1]吴晓,郑颖,赵志钢,刘素霞.被动凝集法检测肺炎支原体抗体的实验室研究[J].   中国卫生检验杂志. 2009（12）：168-170

[2]王居鹏1,2朱黎娜2马明坤2陈慧3郭素香3任丽1.被动凝集法、间接免疫荧光法和胶体金法联合检测肺炎支原体抗体对儿童肺炎支原体感染的诊断价值[J].天津医药. 2022,50(04)：418-423

[3]丁燕明. 2种儿童肺炎支原体感染检测方法的比较与分析[J].  中国卫生检验杂志. 2021(04)：432-433+437