白细胞分类检测的影响因素

          白细胞分类检测的影响因素

姜卓乐

中创凯立达（天津）医药集团有限公司  天津市 300000 

探讨影响血液细胞分析仪测定白细胞分类的因素，排除假性增高和假性降低情况，必要时必须血片复核，准确地为临床提供可靠的诊治依据。方法:使用Sy smex KX-21血液细胞分析仪及目视显微镜，同时对150例标本进行检查，对比分析。结果:操作不顺利、标本采取后放置时间、温度及上机前标本混匀、振荡时间、力度等均可影响血液细胞分析仪正确对白细胞的分类。结论:血液细胞分析仪并不能完全代替目视显微镜进行白细胞分类，对出现疑有异常白细胞警告报警，应分析原因，目视显微镜下白细胞分类或重新采血。

外周血白细胞分类，是白细胞分析中一项十分重要的内容，是临床诊断和鉴别诊断的重要指标之一。近几年来，随着科学技术的不断发展，各种型号血液细胞分析仪，在各级医院检验科已广泛应用，特别是白细胞自动分类和异常白细胞警告提示，改变了目视显微镜分类方法，大大减轻了检验人员的劳动强度，使工作效率明显提高。但是，目前很多检验人员因对三分类血细胞分析仪性能缺乏足够的认识，误认为血细胞分析仪分类结果，完全可以代替目视显微镜分类结果，而忽视某些结果需要复片的重要性。为此，本文将对日本Sysmex公司生产的KX-21血细胞分析仪白细胞分类，与目视显微镜复片分类，对异常白细胞检出率进行对比分析。找出使用血细胞分析仪检测白细胞分类的影响因素，现探讨如下

1. 方法：随机抽查门诊患者150例，静脉采血，EDTA-K2抗凝。室温放置15min后，充分混匀，上机测试。同时推血片一张，室温自然干燥，瑞氏染色，目视显微镜下进行白细胞分类。将两种方法对异常白细胞检出率进行对比分析。

2.结果：150例标本经血液细胞分析仪检测，白细胞分类结果，出现疑有异常白细胞警告报警有20例，报警率(阳性率)13.3%。目视显微镜复片，发现有不同程度异常白细胞12例，阳性率8.0%。20例阳性标本，目视显微镜复片，其中有8例可见有不同程度异常白细胞(有幼稚细胞1例，杆状核粒细胞增多1例，嗜酸粒细胞增多2例，嗜碱粒细胞增多1例，异常淋巴细胞增多3例)，占阳性标本的40%。130例阴性标本(无警告)，目视显微镜复片，有2例发现有不同程度的异常白细胞，占阴性标本的1.5%。其中1例为已确诊急性淋巴白血病在化疗中，血液中白细胞总数偏低，血细胞分析仪分类淋巴细胞百分比增高，仪器无异常白细胞警告，显微镜复片，幼稚细胞8%。另1例为发热待查儿童，血液中白细胞总数正常，血细胞分析仪三分类百分比基本正常，没有出现异常白细胞警告，目视显微镜复片，异常淋巴细胞达10%。

3.讨论：通过以上结果分析，可以看出门诊患者，全血做血液细胞分析，白细胞分类结果，异常白细胞警告较高，假阴性率虽然较低，但也应该引起检验人员的重视

根据几年来的工作体会认为，出现上述问题的主要原因，一是血液细胞分析仪对白细胞分类不同于常规的涂片染色分类，常规分类除细胞大小外，还要根据细胞染色反应，核的形态及染色质的着色情况，胞质的着色及颗粒才能确定为某种细胞。三分类血细胞分析仪法，是根据白细胞直方图分类法，只能反映经溶血剂处理后某种体积的颗粒，即某种大小细胞的多少，而不能反映某种特殊细胞的变化，对少见的正常白细胞和异常细胞不能准确识别，不难看出电阻法白细胞分类只不过是较粗的筛选方法。另外，手指采血，由于采血过程中因操作缓慢、穿刺不顺、组织液混入、混匀不及时等，均会引起白细胞形态变化。对血细胞分析仪分类会产生明显影响，而出现异常白细胞假报警，为此，根据文献介绍和大量实验证明，使用末梢血在血细胞分析仪上进行检测，影响因素较多，有些参数不能得出准确结果，其重复性及稳定性都不及静脉血标本，应提倡静脉血。血细胞的检测结果，尤其是血小板(PLT)的结果，直接反映试剂的质量。原则上强调使用与仪器检测原理相匹配的试剂。血液细胞分析仪试剂中的主要试剂，能将红细胞溶解，并能使白细胞的体积发生规律性变化。实际工作中发现，若溶血不完全，由于红细胞碎片冲洗不彻底将引起白细胞计数(WBC)假性增高。此外，稀释液的渗透压、离子强度等亦可影响检测结果。特别注意的是，试剂应避免污染，否则，杂质微粒会使本底增高，导致最后计数结果偏高，影响白细胞分类结果的准确性。

抗凝剂的种类对检测结果影响较大，国际化学标准化委员会(ICSH)推荐用EDTA二钾抗凝。另外，血液和抗凝剂比例也会影响检测质量。血液比例过高时，由于抗凝剂相对不足，血浆中出现微血块的可能性增加。微凝块可能堵塞仪器影响检测结果，从而无法得出正确的结果。

在正常情况下，血液细胞分析仪对血细胞体积的识别有明显的体积界限:WBC35-450f1。根据Coulter原理，仪器只识别颗粒大小而不能识别颗粒的性质。当其体积异常高于或低于仪器设定的阈值时，往往会造成误判。除以上原因外，标本采取后放置时间、温度及上机前标本混匀、振荡时间、力度等均可影响血细胞分析仪对白细胞分类的准确识别，如采血后标本放置时间小于5min，室温低于10℃，标本混匀不当等，可使白细胞三分类不全及异常白细胞假报警率增高。

综上所述，目视显微镜法分类，应是目前一种重要的检测手段。血液细胞分析仪法分类，是当今科学技术发展的趋势，其优点是速度快，省时少力，重复性及稳定性较高，但易受很多因素的影响。为此，国内专家多次提出[2]，在各种参数及图形均正常的情况下，结合临床表现可以做筛选手段。要坚决反对当前有些单位使用血细胞分析仪后，就一律不再做镜下复检和分类的错误倾向。最好每次标本都先涂一张血片，以备必要时复检。

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