杭州天顺裕堂生物科技有限公司 浙江省绍兴市 312030
关键词 蛹虫草 大米小麦培养料配方筛选
蛹虫草即北冬虫夏草,是名贵的药食两用材。笔者从 经过多年的努力,现已进入批量生产。现将不同配方培养料栽培蛹虫草比较试验结果整理如下,供同行参考。
1材料与方法
1.1供试菌株供试蛹虫草菌株CM-016经过试种后分离培养而得。
1.2培养基①斜面培养基:PDA培养基+KH₂PO₄+MgSO₄· 7H₂O+VC(马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20g,KH₂PO₄1.5g, MgSO₄·7H₂O1.2g,VC0.8g,水1000 mL)。②液体培养基:马 铃薯+白糖+KH₂PO₄+MgSO₄·7H₂O+VC(马铃薯300g, 白糖 23g,KH₂PO₄2.2g,MgSO₄·7H₂01.2g,VC0.6g, 水1000mL)。③培养料营养液:白糖25g,KH₂PO₄2.2g,MgSO₄·7H₂O1.2 g, VC0.6g,酵母片2片,鸡蛋0.25个,水1000mL。
1.3 培养料配方 试验共设5个处理,水量按培养基总量:水(营养液)=1:1.7计算,每个处理共接种100瓶,瓶子用 500 mL罐头瓶,瓶口用聚丙烯膜封口,不设重复,5个处理分 别是:①大米40g;②大米30 g+小麦10 g;③大米20 g+小麦 20g;④大米10 g+小麦30g;⑤ 小麦40 g。
1.4试验方法根据各处理所用大米、小麦和用水量计量装 瓶后贴上标签,在压力0.14MPa,温度126℃高压湿热灭菌锅 内灭菌1.5h,冷却至室温后,用医用注射器在无菌接种箱内 将液体菌种打入栽培瓶中,每瓶打入液体菌种3mL。将接完 种的栽培瓶放入20℃无菌室进行培养,发菌时进行测定各种 培养料配方的菌丝生长速度。
菌丝吃透培养基后进行出菇管理,增加光照和时间,光照强度为200lx, 每天光照时间不少于15h, 促进菌丝转色,转色8d 后拉大昼夜温差,白天保持20~23℃,夜间8~12℃,约 10d 后,调节各项环境条件:温度18~20℃;空气湿度70%~90%;光照强度为200lx, 使之满足蛹虫草子实体生长发育要求,随时观察生长状况并做以记录,采收时测定各配方的子实 体生长情况。
1.5调查方法
1.5.1菌丝体生长速度测定及生长性状观察 每隔5d 测定 各配方菌丝体长速取其平均值,观察各配方有无杂菌及菌丝体生长性状。
1.5.2子实体生长状况测定 测定各培养料配方的子实体产 量,统计其平均生物学效率。生物学转化率=(鲜子实体重/培养料干重)×100%。
2结果与分析
2.1不同配方上蛹虫草菌丝生长情况比较试验结果(表1)表明:不同培养料配方对蛹虫草菌丝生长速度有影响。大米10g+小麦30g配方蛹虫草菌丝生长速度最快,平均菌丝生长 速度为1.27mm/d; 其次为大米20g+小麦20g, 平均菌丝生长速度为1.18mm/d;纯大米40g 蛹虫草菌丝生长速度最慢,平 均菌丝生长速度为1.02 mm/d。
配方 | 菌丝长速 /(mm·d-1) | 菌丝 长势 | 满瓶 时间/d | 杂菌 情况 |
①大米40g | 1.02 | +++ | 30 | 6瓶 |
②大米30 g+小麦10g | 1.06 | +++ | 28 | 2瓶 |
③大米20 g+小麦20g | 1.18 | ++++ | 26 | 3瓶 |
④大米10 g+小麦30g | 1.27 | +++++ | 26 | 4瓶 |
⑤小麦40g | 1.14 | ++++ | 24 | 4瓶 |
注:+++++表示菌丝长势强壮;++++表示菌丝长势较强;+++表示菌丝长势弱。
2.2不同配方菌丝体转色情况、现蕾时间和子实体形态及色
泽 试验结果(表2)表明:不同培养料配方蛹虫草菌丝体转色情况,现蕾时间,子实体形态及色泽有差异。大米20 g+小麦20g配方菌丝体转色情况好,子实体单生,直立,子实体金黄, 鲜艳;纯大米40g配方菌丝体转色差,子实体色泽暗淡,商品 价值差。
表2不同配方菌丝体转色情况、现蕾时间和子实体形态及色泽
配方 | 菌丝体现凿 转色情况时间/d | 子实体形态 及色泽 | |
①大米40g | ++ | 36 | 单生,金黄 |
②大米30 g+小麦10g | +++ | 37 | 单生,直立,金黄 |
③大米20 g+小麦20g | +++++ | 38 | 单生,直立,金黄,鲜艳 |
④大米10 g+小麦30g | ++++ | 38 | 单生,直立,金黄,鲜艳 |
⑤小麦40g | +++ | 35 | 单生,直立,金黄,鲜艳 |
注:+++++表示菌丝体转色情况好;++++表示菌丝体转色情况较好;+++表示菌丝体转色差;++表示菌丝体转色差而且慢。
2.3不同配方出草情况及生物学效率试验结果(表3)表 明:大米10g+小麦30g配方子实体粗壮,瓶产量均值最高, 生物学效率为45%;其次是大米20g+小麦20g配方和纯小 麦40g 配方,生物学效率为42.5%;纯大米40g 配方由于培养料通气状差,瓶产量均值最低,生物学效率仅为27.5%。
表3不同配方出草情况及生物学效率
配方 | 瓶产量均值/g | 生物学效率/% |
大①米40g | 11 | 27.5 |
②大米30 g+小麦10s | 14 | 40.0 |
③大米20 g+小麦20g | 17 | 42.5 |
④大米10 g+小麦30g | 18 | 45.0 |
⑤小麦40 | 17 | 42.5 |
3小结与讨论
试验结果表明:配方④(大米10 g+小麦30 g)蛹虫草菌丝 生长速度最快,菌丝体转色情况好,子实体单生,直立,金黄,鲜艳,瓶产量均值最高(图1),生物学效率高,在生产中可推广。
纯小麦40 g 配方⑤虽然各种性状表现也不错,但由于培 养基在菌丝没有长满瓶之前易变形,不利于操作和易造成杂菌污染,有待进一步总结和完善。
纯大米40 g配方①由于高压湿热灭菌后培养基通气性 差,不利蛹虫草生长,且大米的价值较小麦高,生产成本高,不宜推广。