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摘要:目的:研究蚕蛹蛋白粉与蜂王浆冻干粉合用对小鼠免疫功能的影响。 方法:ICR小鼠,经口灌胃给予不同剂量的蚕蛹蛋白粉和蜂王浆冻干粉复配受试物,观察其对小鼠迟发型变态反应、小鼠巨噬细胞吞噬能力--碳廓清实验、NK细胞活性等的影响。结果:经口给予蚕蛹蛋白粉和蜂王浆冻干粉复配受试物30天,中、高剂量组小鼠耳壳增重、抗体积数较对照组均显著增加,差异有显著性(P<0.05),低、中、高剂量组能明显增强小鼠的非特异性免疫功能(P<0.05,P<0.01)。 结论:蚕蛹蛋白粉与蜂王浆冻干粉合用具有增强免疫力的保健功能。
关键词:蚕蛹蛋白粉 蜂王浆冻干粉 免疫 小鼠
机体的免疫功能包括天然免疫(非特异性免疫)和获得性免疫(特异性免疫)两部分,这两类特异性免疫功能相互协同、相互配合,发挥重要作用,保证人体处于一个自身稳定的正常状态。免疫力低下是免疫功能受到损害的一种表现形式,免疫力低下的人群容易被感染,极易招致细菌、病毒、真菌等感染,其最直接的表现为容易生病。还会伴有精神萎靡、疲乏无力、食欲减退、睡眠障碍等表现。提高免疫力除了药物治疗外,饮食调节与补充非常重要。研究资料显示:适当补充蛋白质、维生素、免疫球蛋白等具有增强免疫力的作用,使机体免疫系统逐渐恢复正常状态。
有研究证明,蚕蛹蛋白在免疫和抗肿瘤等方面具有广泛的生理活性。昌友权等人【1】研究表明蚕蛹蛋白能促使T细胞增殖,增加IL-2的分泌,促进小鼠巨噬细胞的吞噬能力、提高抗体生成脾细胞数。石根勇等人【2】研究发现一定剂量的蜂王浆冻干粉能增强DNFB引起的小鼠迟发性超敏反应,增强小鼠体液免疫和单核-巨噬细胞功能。因此,本实验研究蚕蛹蛋白粉和蜂王浆冻干粉配伍使用对免疫调节的影响,为二者的开发利用提供依据。
1 材料与方法
1.1受试样品:将蚕蛹蛋白粉和蜂王浆冻干粉按7:10比例混合备用,临床服用量为蚕蛹蛋白粉0.7g/d,
蜂王浆冻干粉1g/d。
1.2 受试动物:选用SPF级ICR昆明种小鼠200只,均为雌性。
1.3 剂量分组及受试物给予:实验按人体临床推荐摄入量5倍、10倍、30倍设计3个剂量组,即各组小鼠每日剂量分别为142mg/kg.bw、283mg/kg.bw、850mg/kg.bw,另设空白对照组,空白对照组以无菌水代替受试物,经口每日1次给予小鼠相应剂量的受试物,连续灌胃30d后测各项增强免疫力功能指标。小鼠灌胃量为0.1mL/10g bw。小鼠以远交系小鼠专用饲料喂饲。
1.4 主要仪器设备:CO2培养箱、电子天平、酶标仪、紫外分光光度计、显微镜、细胞计数器、24孔和96孔平底细胞培养板、96孔U型细胞培养板等。
1.5 主要试剂:印度墨汁、ConA、RPMI1640培养液、MTT、YAC-1细胞、绵羊红细胞、鸡红细胞、补体(豚鼠血清)等。
1.6统计学处理所有实验数据用SPSS 22.0软件进行统计分析,计量资料以±S表示。
2 结果
2.1 各组间小鼠体重、脏体体重比值比较 小鼠初始体重均数在各组间差异无统计学意义(P>0.05),表明小鼠体重分布较为均衡。连续灌胃小鼠30d后,提示小鼠体重增长值均数在各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。小鼠脾脏体重比值均数和胸腺体重比值均数在各组间比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。实验数据见表1。
2.2 各实验组小鼠细胞免疫功能指标比较 小鼠迟发型变态反应结果显示,小鼠耳壳增重在对照组与中、高剂量组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验结果显示,各组间淋巴细胞增殖能力均数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验数据见表2。
2.3 各实验组小鼠体液免疫功能指标比较 小鼠抗体生成细胞数测定结果显示,各组间抗体生成细胞数均数差异无统计学意义(P>0.05)。小鼠血清溶血素实验结果显示,中、高剂量组的抗体积数均数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验数据见表2。
2.4 各实验组小鼠非特异性免疫功能指标比较
2.4.1 小鼠单核巨噬细胞吞噬功能影响 采用小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力测定实验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力测定实验,结果显示,各组间碳廓清吞噬指数均数差异无统计学意义(P>0.05)。低、中、高剂量组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。实验数据见表3。
2.4.2 小鼠NK细胞活性改变 灌胃受试物后,低、中、高剂量组小鼠NK细胞活性率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。实验数据见表3。
表 1 各组间小鼠脏器体重比值比较(n=10)
组别 | 脾脏体重比值 (mg/g) | 胸腺体重比值 (mg/g) |
对照组 | 4.65±075 | 2.71±0.43 |
低剂量组 | 4.59±0.70 | 2.75±0.43 |
中剂量组 | 4.72±0.83 | 2.88±0.48 |
高剂量组 | 4.61±0.69 | 2.92±0.43 |
表 2 各组间小鼠细胞和体液免疫功能指标比较(n=10)
组别 | 耳壳增重(mg) | 淋巴细胞增殖能力(吸光度差值) | 抗体生成细胞数(×103/全脾) | 抗体积数 |
对照组 | 5.4±1.8 | 0.217±0.044 | 70.34±19.87 | 137.8±42.67 |
低剂量组 | 6.2±1.8 | 0.204±0.051 | 73.05±17.34 | 145.2±40.25 |
中剂量组 | 9.7±3.0* | 0.225±0.069 | 76.82±26.96 | 178.9±31.47* |
高剂量组 | 11.5±2.7* | 0.231±0.072 | 88.67±29.28 | 189.6±38.15* |
表 3 各组间小鼠非特异性免疫功能指标比较(n=10)
组别 | 碳廓清吞噬指数(a) | 鸡红细胞吞噬率(%) | NK细胞活性(%) |
对照组 | 6.52±1.21 | 21.74±5.37 | 59.63±13.25 |
低剂量组 | 6.64±1.39 | 31.36±3.65** | 72.54±11.47* |
中剂量组 | 6.67±1.20 | 32.97±6.92** | 83.71±12.54** |
高剂量组 | 6.75±1.58 | 35.61±6.08** | 82.39±15.13** |
(*与对照组比较P<0.05;**与对照组比较P<0.01)
3 讨 论
本研究结果表明,蚕蛹蛋白粉、蜂王浆冻干粉配伍使用能增强小鼠的迟发型变态反应和血清溶血素水平,提高小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率,增强小鼠NK细胞活性。因此,可判定为该样品对小鼠细胞、体液免疫实验结果阳性,对小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性实验结果阳性。提示蚕蛹蛋白粉与蜂王浆冻干粉合用能增强小鼠免疫力功能。
参考文献:
[1]昌友权,戚颖欣,孙学伟,等.蚕蛹蛋白对小鼠免疫作用的研究[J].食品科学,2007,28(9):520-523.
[2]石根勇,吕中明,陈新霞,等.蜂王浆冻干粉免疫调节作用的研究[J].中国卫生检验杂志,2001,11(3):306-307.