左归丸对妊娠期糖尿病大鼠胰岛素抵抗及氧化应激损伤的干预作用及机制研究

左归丸对妊娠期糖尿病大鼠胰岛素抵抗及氧化应激损伤的干预作用及机制研究

张怡淼1 万梦君1 姜雨欣1 庞佳禾1隋宏书2* 李仪扬3*

1.山东第一医科大学临床与基础医学院  山东 济南  250117

2.山东第一医科大学临床与基础医学院组织学与胚胎学系 山东 济南250117

3.山东第一医科大学实验动物学院250117

【摘要】 目的：探讨左归丸（ZGW）对妊娠期糖尿病（GDM）大鼠胰岛素抵抗（IR）及氧化应激损伤的影响。方法：45只孕鼠随机平均分为对照组、模型组和左归丸干预组。模型组和ZGW组孕鼠经腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制备GDM模型大鼠，对照组腹腔注射等量生理盐水。模型制备成功后给予ZGW组小鼠左归丸煎剂灌胃，对照组和模型组灌胃等量生理盐水。给药14d后检测空腹小鼠空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、 IL-6、超氧化物歧化酶（SOD）与丙二醛（MDA），并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果：模型组和ZGW组小鼠血清FBG、FINS、IL-6、MDA与HOMA-IR均显著高于对照组，SOD活性显著低于对照组；ZGW组小鼠血清FBG、FINS、IL-6与HOMA-IR均显著低于模型组，MAD水平略高于对照组，SOD活性显著高于对照组。结论：ZGW能够显著减轻GDM小鼠胰岛素抵抗、氧化应激水平，改善血糖。

关键词：妊娠期糖尿病；左归丸；胰岛素抵抗；氧化应激损伤；小鼠

中图分类号: R361.3            文献标识码：A

第一作者：张怡淼，2022级临床医学本科专业在读本科生

通讯作者：李仪扬，Tel：18815338826；E-mail: 2916536631@qq.com

共同通讯作者: 隋宏书，Tel：18668956682，E-mail:hongshusui@163.com

基金资助：2024年山东第一医科大学校级大学生创新创业训练计划项目（No.202410439054）

1. 前言

亲代患T2DM可导致后代出现持续糖耐量受损和IR。而且后代患T2DM的风险会增加2-4倍。到目前为止，没有合适的治疗方案。前期研究发现，左归丸可以调节葡萄糖代谢[1-2]。鉴于此，本实验以左归丸为切入点，通过注射STZ与用HG培养植入前胚胎探讨左归丸对母体HG状态植入前胚胎的IR作用与氧化应激损伤的干预作用。同时，也为临床诊治T2DM遗传问题提供新的思路和手段。

2.材料与方法

2.1试验动物

健康SD雄性、雌性小鼠（8-10周），环境温度22℃~25℃，分笼喂养，每笼5只，使用标准饲料进行适应性饲养。

2.2试验试剂、药物与仪器

STZ购自美国Sigma公司，左归丸购自安徽广生药业有限公司，血液葡萄糖、血糖胰岛素购自深圳生物工程股份有限公司， IL-6、SOD、丙二醛检测试剂盒购自南京建成有限公司。

2.3试验动物分组及模型制备

小鼠适应性饲养1周后于雌鼠腹腔注射马绒毛膜促性腺激素(eCG)和人绒毛膜促性腺激素(hCG) 10 IU，注射后立即与雄鼠交配。确定妊娠后，三组各15只大鼠。模型组和ZGW组大鼠在妊娠第2d经腹腔注射200 mg/kgSTZ，连续注射3d，对照组大鼠注射等量生理盐水。

2.4给药方式

模型制备完成后对ZGW组大鼠每天灌胃左归丸煎剂（1 g/mL，20 mL/kg），对照组和模型组灌胃等量生理盐水。

2.5观察指标

给药14d后禁食大鼠12h，采集大鼠空腹尾静脉血2mL，3000rpm离心15min后分离血清。

2.5.1血糖指标

采用生化法检测血清中FBG水平，采用化学发光法检测FINS。计算稳态模型的HOMA-IR，HOMA-IR=FBGFINS/22.5[3]。

2.5.2炎症因子

采用酶联免疫吸附法检测血清SOD与IL-6水平。

2.5.3氧化应激指标

采用分光光度计法检测血清SOD、MDA水平。

3 结果

3.1 各组大鼠空腹血糖和胰岛素抵抗的比较

图1. 各组大鼠FBG和HOMA-IR的比较

模型组和ZGW组大鼠FBG和HOMA-IR显著高于对照组，ZGW组FBG和HOMA-IR较模型组有显著降低。

3.2 各组大鼠血清SOD和MDA水平的比较

图2. 各组大鼠血清SOD和MDA水平的比较

对照组和ZGW组大鼠血清SOD显著高于模型组，而MDA含量显著少于模型组；ZGW组大鼠血清SOD显著低于对照组，而MDA水平略高于对照组。

3.3 各组大鼠血清IL-6水平的比较

图3. 各组大鼠血清IL-6水平的比较

对照组和ZGW组大鼠血清IL-6水平显著低于模型组，ZGW组大鼠血清IL-6水平显著高于对照组。

4.讨论

本实验研究得模型组和ZGW组大鼠血清FBG、FINS、IL-6、MDA与HOMA-IR均显著高于对照组，SOD活性显著低于对照组；ZGW组大鼠血清FBG、FINS、IL-6与HOMA-IR均显著低于模型组，MAD水平略高于对照组，SOD活性显著高于对照组。由此可见，左归丸能够显著减轻GDM大鼠胰岛素抵抗、氧化应激水平，改善血糖。曾丽华

[4]等研究发现左归丸可能通过影响多种物质代谢，从抗氧化等方面改善POI大鼠的卵巢功能。 郭亚菲等[2]发现左归丸对糖尿病小鼠有一定的治疗作用。其主要通过环磷酸腺苷和PI3K-Akt等信号通路实现。据统计我国GDM发病率高达10%~20%[5,6] ，但目前临床对于GDM仍多是通过饮食和运动干预，因此需要寻找更加安全有效的治疗药物。

综上所述，本实验研究发现左归丸能够显著减轻GDM大鼠胰岛素抵抗、氧化应激水平，改善血糖。由此可知，左归丸可为临床诊治T2DM遗传问题提供新的思路和手段。此外本实验也有一些不足之处，如样本量较小，且受动物品系限制。

参考文献

[1]王颖莉.补肾方左归丸胚胎期给药预防子代糖耐量低减作用药效物质基础研究.山西省,山西中医药大学,2022-09-16.

[2]郭亚菲等.基于血清化学和网络药理学探究左归丸治疗糖尿病的作用机制[J].中华中医药杂志,2020,35(11):5816-5820.

[3]BiagettiB,AulinasA,CasterasA,etal.HOMA-IRinacromegaly:asystematicreviewandmeta-analysis[J].Pituitary,2021,24(2): 146-158.

[4]曾丽华,张莹轩,梁蕴仪等.基于UPLC-Q-TOF-MS的左归丸干预早发性卵巢功能不全大鼠的血清代谢组学研究[J].中药新药与临床药理,2022,33(06):762-769.

[5] Juan J, Yang H. Prevalence, Prevention, and Lifestyle Intervention ofGestational Diabetes Mellitus in China. Int J Environ Res Public Health. 2020Dec 18;17(24):9517.

[6]Gao C, Sun X, Lu L, etal. Prevalence of gestational diabetesmellitus in mainland China: A systematic review and meta-analysis. J DiabetesInvestig. 2019 Jan;10(1):154-162.基金资助：2024年山东第一医科大学校级大学生创新创业训练计划项目（No.202410439054）