HIV初筛实验和确认实验间的区别你了解吗？

HIV初筛实验和确认实验间的区别你了解吗？

尹红玉

南充市顺庆区人民医院  检验科 四川南充  637000

艾滋病在我国的流行已数十年，随着感染者和临床病人的不断增加、感染人群的变化，艾滋病检测工作量逐渐加大，对监测和检测的需求也不断增加，实验室检测是艾滋病防治不可或缺的科学工具和技术支撑，做好检测工作对我国艾滋病防治具有非常重要的意义。

一、实验室的分类：

艾滋病检测实验室可以分为四类：参比实验室设在中国疾控中心；确证中心实验室和确证实验室设在省疾控中心和各有需求的单位，可以开展免疫印迹试验、HIV-1核酸检测等；筛查中心和筛查实验室设在区县疾控中心（也可能是确证实验室）和其他单位，可以开展酶联免疫吸附试验、化学发光试验、免疫层析试验、抗原抗体联合检测试验等；检测点设在基层医疗机构及其他有需要的机构，开展HIV快速检测实验即胶体金检测。

二、筛查实验与确证实验的区别

筛查试验：用于检测整个人群或部分人群中待测物（感染性病原体抗原或相关抗体）的存在情况的检测方法。一般而言，筛查实验应具有较高的临床敏感性（即临床检出率＞95%），对其特异性和阳性预测值的要求则取决于对各种因素的综合考虑。通常情况下，筛查实验的阳性预测值都会低于诊断实验和确证实验。也就是说，筛查试验结果阴性，提示被检测人待测物阴性的可能性很高，而筛查试验结果阳性仅提示阳性结果的可能，需要进一步的确认。

确证试验：用于验证筛查试验结果的检测方法。对于确证试验，特异性和阳性预测值比灵敏度和阴性预测值更为重要，确证试验的特异性应当大于98%。

三、HIV筛查实验与确证实验的检测方法

在检测病原体时，应首先进行筛查试验。通常应选择灵敏度高的试剂，以最大可能地提高检出率，避免漏检。目前临床使用的免疫学方法有酶联免疫吸附试验、化学发光免疫试验、荧光免疫试验、免疫层析试验、免疫渗滤试验和抗原抗体联合检测试验等。上述方法是否可以作为筛查试验，应根据具体检测抗原或抗体试验的灵敏度来决定。如果试验的灵敏度低，则不适于作为筛查试验。

对HIV筛查试验检出的可疑及阳性反应结果，均应进行复检，根据复检结果判断是否进行确认实验。确认的方法有：确证试验、随访检测、重复检测和其他相关标志物检测。实验室可依照具体情况选择并建立相应的检测程序。

HIV 补充试验：在获得筛查试验结果后，为了准确判断，继续检测机体血液或体液中有无 HIV 抗体或核酸的方法， 包括抗体确证试验和核酸试验。

    用于确证试验的免疫测定方法有蛋白免疫印迹试验、重组免疫印迹试验、抗体中和试验等。确证试验还包括核酸检测、病原体培养等。确证试验和随访检测均是对免疫测定结果进行确认的有效手段，常常需要相互补充应用。例如蛋白免疫印迹试验等均可存在检测结果为不确定的情况，此时需要对患者进行随访检测，方可确定是否存在病原体的感染。

四、窗口期

    窗口期 （window period）指从HIV感染人体到感染者血清中的HIV抗体、抗原或核酸等感染标志物能被检测出之前的时期。

随着检测技术的不断发展，根据不同方法所包被抗原片段不一致、检测的目标抗原抗体不一样及标记物不一样，不同方法的检测窗口期也长短不一。

    目前临床上多采用第三代胶体金试剂检测抗体和第四代化学发光试剂检测IgM、IgG抗体及P24抗原作为筛查实验，第三代试剂窗口期为21天，第四代化学发光试剂因可同时检测抗原抗体则可以将窗口期提缩短至14天，而HIV核酸检测窗口期则为7天。但HIV确证实验即免疫印迹试验仅检测IgG抗体，窗口期则为30天左右。因HIV感染后血液中核酸、抗原、抗体出现和消失的时间不一致、不同方法检测的窗口期不一致，就可能导致不同检测方法可能得到不一样的检测结果。

五、关于窗口期你需要知道的

        ①HIV病毒感染窗口期是针对HIV感染检测指标而言。

②大多数人群在感染发生后28天内能够产生可检测的HIV抗体或HIV抗原。

③97%的感染者在感染发生后的3个月内能够产生可检测的抗体。（因人而异，窗口期的长短受检测原理、个体体质差异、检测试剂的敏感性等多方面的因素影响）

④感染者在窗口期进行抗逆转录治疗或抗免疫治疗（如器官移植抗排斥反应）会延长窗口期，甚至超过12个月。

⑤感染HIV病毒的个体在窗口期内同样具有传染性。

⑥在窗口期进行HIV检测可能会得到假阴性的结果。

六、实验结果解释

    筛查阴性结果：如没有流行病学接触史，可认为没有感染HIV； 核实最后一次高危行为超过3个月的窗口期，可以认为没有感染HIV；如果没有度过3个月的窗口期，不能排除HIV感染的可能，应在窗口期后进行复查。

筛查有反应性结果：HIV感染引起的阳性反应；生物学假阳性，体内存在与HIV蛋白产生交叉反应的其他蛋白；技术假阳性，由于试剂质量或人为操作不当引起；＜18个月婴儿，抗体可能来自于母亲，建议18个月后再进行检测。筛查试验有反应，不能向受检者出具HIV抗体阳性报告，进入HIV抗体复检试验。复检两次试验抗体均无反应，出具“HIV抗体阴性”报告；复检试验有反应（均有反应或一个有反应一个无反应），须要再次核对被检者身份后，重新采样，结果任然为有反应性时，报告为“HI V感染待确定”，不能出具阳性报告，进一步做补充试验。

抗体确证试验结果处理如下： 符合 HIV-1 抗体或HIV-2 抗体阳性判断标准，报告“HIV-1 抗体阳性”或“HIV-2 抗体阳性”，并按规定做好检测后咨询和疫情报告。符合 HIV 抗体阴性判断标准，报告“HIV 抗体阴性”。如疑似“窗口期”感染，建议进一步做 HIV 核酸检测，或 2 周～4 周后随访尽早明确诊断。符合 HIV 抗体不确定判断标准，报告“HIV 抗体不确定”，在备注中应建议尽早做核酸检测或 “2 周～4 周后复检”。

七、关于艾滋病诊断

HIV/AIDS的诊断原则是受过多年专业训练及具备丰富实践经验的临床专家以实验室检测结果为依据，结合临床表现和参考流行病学资料综合进行。HIV抗体和病原学检测是确诊HIV感染的依据；流行病学史是诊断急性期和婴幼儿HIV感染的重要参考；CD4+ T 淋巴细胞检测和临床表现是HIV感染分期诊断的主要依据；AIDS的指征性疾病是AIDS诊断的重要依据。

结语：无论是筛查实验室还是确证实验室面对的只是一个不会说话的“样本”，实验室检测是HIV诊断的依据之一，却不是唯一依据。任何方法都有假阳性和假阴性的可能，无论结果是阴性、不确定或者阳性，均应该结合流行病学史、实验室检测、临床表现进行综合判断。   

参考文献

[1]感染性疾病免疫测定程序及结果报告，WS/T 573—2018

[2]全国艾滋病检测技术规范（2020年修订版）

[3]艾滋病和艾滋病病毒感染诊断，WS293-2019