简介：目的：检测人表皮细胞中是否存在侧群（sidepopulation,SP）细胞,并研究该表型细胞是否表达通用干细胞标志物ABCG2和表皮干细胞的标志物整合素α6和β1。方法：运用中性蛋白酶和胰蛋白酶两步消化法从手术切除的人包皮组织中分离获得表皮细胞。经Hoechst33342荧光染料和PI染色,流式细胞仪分析并分选SP细胞。采用流式细胞仪分析SP细胞ABCG2、整合素α6和β1的表达情况。结果：人表皮细胞中存在SP细胞,其比例为0.2%～0.3%。用流式细胞仪可检测到在SP细胞以及总表皮细胞中均有少量细胞表达通用干细胞标志物ABCG2以及表皮干细胞的标志物整合素α6和β1,但二者阳性细胞百分比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：表皮细胞中的SP细胞是否是富集的表皮干细胞仍存在疑问,还需要进一步的动物体内移植实验、克隆形成能力和增殖能力的研究证实。

简介：目的通过探索体外诱导表皮干细胞向汗腺上皮分化可能性，为汗腺组织工程探索新的种子细胞来源。方法分别收集正常皮肤表皮细胞．利用流式细胞仪多参数分选表皮干细胞；于不同时间点连续观察，不同浓度EGF（50～1000ng／mL）作用于表皮干细胞后的细胞生长动力学变化，免疫荧光鉴定汗腺细胞表型（NHE-1，NKCC-1）流式细胞仪分析不同浓度EGF对于细胞的毒性。结果50ng／mL和100ng／mLEGF对表皮细胞促增殖能力明显，且二者无显著差异（P〉0．05）：500ng／mL和1000ng／mLEGF抑制细胞增殖。1000ng／mLEGF对细胞增殖的抑制作用更明显（P〈0．05）。表皮干细胞经过50ng／mLEGF诱导后表达汗腺上皮相对特异性标记NHE-1及NKCC-1。结论表皮干细胞可成为汗腺组织工程种子细胞的重要来源。50ng／mlEGF可作为相对优化的表皮干细胞诱导条件。

简介：目的：对大肠杆菌表达的人源重组肝细胞生长肽进行分离纯化获得目的蛋白rhALR。方法：其表达产物在大肠杆菌中以不溶性包含体形式存在，经过超声破菌、包含体抽提、洗涤处理、使包含体纯度达75％以上，用8mol/L尿素变性溶解包含体沉淀后上清直接稀释复性，再经浓缩、透析、离子交换凝胶过滤等系列纯化步骤。结果：纯化后目的蛋白纯度达95％以上。回收率达20％。

简介：目的了解皮肤软组织扩张术后表皮干细胞（ESC）的分化和分布情况，初步探讨扩张皮肤组织的相关生长机制。方法取15例行Ⅱ期头、颈部皮肤扩张术患者扩张后（平均注水期45d）皮肤标本及正常皮肤标本，按取材部位分为：（1）头部近扩张器中心组：取与扩张器中轴线垂直距离为3cm处的扩张后头皮；（2）头部扩张器侧壁组：取与扩张器中轴线垂直距离为5-7cm的扩张后头皮；（3）颈部扩张皮肤组；（4）未扩张头皮对照组；（5）未扩张颈部皮肤对照组。各组皮肤标本行HE染色观察组织结构，行免疫组织化学染色观察细胞角蛋白19（CK19）阳性细胞的分化及分布特征。结果与2个未扩张对照组比较，HE染色可见各扩张组表皮层凹凸不平且相对增厚，皱褶明显，细胞层次增多；细胞呈密集分布，以靠近基底层最为显著，但排列欠整齐，极性过度不明显。免疫组织化学染色显示，各扩张组基底层CK19阳性细胞的连续性基本存在，基底层个别部位阳性细胞明显增多，呈复层排列；基底层之外亦有少量成团或散在分布的CK19阳性细胞。2个未扩张对照组未见上述现象。结论皮肤软组织扩张后，ESC在修复过程中增殖和分化加强，并出现异位分布。

简介：目的根据毛囊形成原理，以人毛乳头细胞和表皮细胞为种子细胞，构建带附属器的组织工程皮肤替代物。方法分实验组和对照组，实验组皮肤替代物真皮层接种人毛乳头细胞和表皮细胞；对照组真皮层不接种任何细胞。在裸鼠背部作一圆形全层皮肤缺损，将两组皮肤替代物气一液界面培养5d后移植到裸鼠背部。观察创面愈合情况．并在移植后第4、6、8周取材，进行组织学观察。结果皮肤替代物移植后2周．实验组创面已完全愈合，移植后4周对照组创面才完全愈合，并且对照组创面收缩比实验组明显。移植后6周，实验组真皮层内见到毛囊样结构和皮脂腺结构．对照组未见毛囊样结构和皮脂腺样结构。结论将人的毛乳头细胞和表皮细胞共同种植在皮肤替代物的真皮层．可以构建出带附属器的组织工程皮肤替代物．这种替代物对创面的修复能力更强。

简介：目的探索多参数分选,以获得高纯度表皮干细胞(humanepidermalstemcells,hESCs)方法的可行性.方法收集3岁～6岁健康幼儿包皮,以DispaseⅡ和Tropsin分离、收集原代表皮细胞(5例),利用流式细胞仪(FACS)分别进行多种参数分选,即:CD49f+/CD71-表型的细胞分选;直径小于10微米的细胞分选.以及多参数复合分选,即:CD49f+/CD71-且细胞直径小于10微米细胞.对各组分选细胞及未分选细胞进行克隆形成率、细胞最大扩增能力、克隆形成面积的检测比较.计算各种分选方法所对应的细胞回收率.结果单参数分选的两组细胞之间在克隆形成率、细胞最大扩增能力、克隆形成面积三方面无统计学差异(p＞0.05).多参数分选得到的细胞与通过单参数分选的两组细胞均存在统计学差异(p＜0.05).结论利用多参数分选,能获得纯度更高的干细胞表型的表皮细胞.

简介：摘要：目的：探究应用 ESC、 MSC构建复合皮肤修复创伤皮肤的可行性。方法：①收集烧伤患者植皮手术剩余的皮片标本，并将其标号保存。经胰蛋白酶和中性蛋白酶联合消化法分离表皮，用Ⅳ型胶原培养皿快速粘附培养，利用差速粘附法分离，将人表皮干细胞培养基进行体外培养。观察细胞生长形态。②取 SD大鼠 15只，随机分为 3组，在动物背部正中尾部用常规手术法切除大小相同的全层皮肤缺损创面，实验组 A移植复合皮肤；对照组 B移植脱细胞真皮；空白组 C组、用纱布敷盖创面。观察三周内创面愈合情况。 结果：术后 A、 B、 C三组 15d的创面愈合时间分别是 (88.02±6.82)、 (82.79±7.18)、 (69.03±6.12)。结论：通过移植表皮干细胞，同时覆盖皮肤的碎薄皮片，抑或覆盖表皮细胞，进而构建与正常皮肤相类似的皮肤替代物，可用于修复全层皮肤缺损，为临床上治疗创伤尤其是全损皮肤或难愈性创面提供一定的实验基础。

简介：【摘要】目的：研究表皮细胞种植技术在深Ⅱ°烧伤创面患者临床治疗中的价值。方法：选择军队某医院收治的47例深Ⅱ°烧伤创面患者，经入院顺序对患者分组后，实验组（24例）接受表皮细胞种植术治疗，对照组患者接受常规治疗，评估疗效差异。结果：治疗总有效率显示，实验组高于对照组（P＜0.05）；两组患者温哥华瘢痕评分指数相比，实验组优于对照组（P＜0.05）。结论：在深Ⅱ°烧伤创面患者临床治疗中，表皮细胞种植技术能够取得更满意的临床疗效，成为促进患者康复的关键，可以改善躯体瘢痕，具有临床推广价值。

简介：背景：目前已有应用蚕丝蛋白、结缔细胞、生物高分子材料、合成高分子材料、纳米材料、传感器制成的生物人造皮,以及非生物人造皮,应用于临床试验都取得了良好效果,但它们与真正皮肤相比还有很大差距。目的：观察表皮干细胞/猪脱细胞真皮组织工程皮肤修复大鼠全层皮肤缺损的效果。方法：取20只SD大鼠,建立背部皮肤缺损模型,随机分为2组,实验组于皮肤缺损处植入人表皮干细胞-猪脱细胞真皮组织工程皮肤,对照组植入猪脱细胞真皮。植入后4周,进行大体、组织学和免疫组织化学观察。结果与结论：①大体观察：实验组创面愈合良好,皮肤弹性佳;对照组移植区域呈现瘢痕愈合,触之质地偏硬;②组织学观察：两组在镜下均可见良好的表皮和真皮结构,表皮可明显区分为基底层、棘层和角化不全的角质层,与实验组相比,对照组可见较多纤维结缔组织;③免疫组织化学观察：实验组愈合创面抗人类白细胞抗原-Ⅰ型抗原呈现阳性,对照组愈合创面抗人类白细胞抗原-Ⅰ型抗原呈阴性;④结果表明：人表皮干细胞/猪脱细胞真皮组织工程皮肤修复动物全层皮肤缺损,可有效抑制瘢痕形成及挛缩。

简介：目的：建立一种骨髓间充质干细胞(MesenchymalStemCells，MSCs)体外培养方法，研究其表面特征性标志（表面分子）。方法：用含10%小牛血清的低糖DMEM培养液，把细胞的接种浓度分成A组小于1×10^4g/ml与B组大于5×10^6g／ml两组进行体外培养，扩增。倒置显微镜观察其形态、增殖能力，流式细胞仪检测细胞的表而分子表达情况。结果：A组细胞生长缓慢，但形态、增殖能力及表面特征性标志与B组相同。MSCs同时表达CDW90、CD44、CD29及CD1a。结论：该方法可作为体外培养MSCs的一种方法，经济实用。MSCs不仅表达CDw90、CD44、CD29而且表达CD1a。

简介：端粒酶不仅在肿瘤组织中高表达，在多种干细胞中亦有表达，该酶活性与干细胞维持自我更新的潜能密切相关。表皮干细胞（ESC）具有自我复制能力和多向分化潜能，是皮肤组织工程理想的种子细胞^[1-3]。

简介：本文报告应用体外培养异体表皮细胞片移植于Ⅲ度烧伤创面的方法。临床应6用例,4例获得成功,2例因感染而失败。待进一步研究,以便更有效的应用于临床。

简介：目的观察皮肤软组织扩张术后表皮干细胞的变化，探讨应力作用下细胞的动力学改变及皮肤软组织扩张术的力学机制。方法标本取自行头部扩张术Ⅱ期手术患者。根据所取标本位置将试验分为：（1）扩张器中心组，所取头皮距扩张器中心约3cm；（2）扩张器侧壁组，所取头皮位于扩张皮肤的侧壁；（3）对照组，未扩张的头皮。各组标本行HE染色，光学显微镜下观察其组织结构；免疫组织化学染色后在倒置相差显微镜下观察细胞角蛋白19（CK19）阳性细胞的分化与分布特征。结果HE染色可见两试验组表皮层凹凸不平，皱褶明显，表皮层相对增厚、层次增多，分布密集；免疫组织化学染色后两试验组在基底层之外可见复层现象及少量的成团或散在分布的CK19阳性细胞，邻近有“镂空”结构形成。而对照组未见上述现象。结论机械扩张后表皮干细胞在分裂增殖的同时，出现异位分布并伴有“镂空”结构，其现象可能与表皮基底层细胞的动力学改变有关。

简介：目的:为了探讨枸杞对皮肤及表皮郎格罕细胞(Langerhanscell,LC)的影响。方法:将单味中药枸杞溶于硅霜中,外涂小鼠皮肤。结果:枸杞可促进小鼠表皮LC数量增多、表达la抗原功能增强;图像分析表明枸杞对真皮组织内胶原纤维、弹性纤维及DNA含量均有促进作用。结论:枸杞促进小鼠表皮LC数量增多,对皮肤免疫功能有增强作用。

简介：目的开发新的组织工程表皮替代物,利用毛囊干细胞-壳聚糖明胶膜片（Chitosan-gelatinmembrane,CGM）进行修复裸鼠皮肤缺损的实验研究。方法将体外扩增培养的毛囊干细胞接种于CGM,构建组织工程表皮膜片,裸鼠背部作直径1cm的全层皮肤缺损,将毛囊干细胞-CGM复合物覆盖创面。回植后1周、4周和12周分别进行组织学和免疫组织化学检测。结果毛囊干细胞在CGM上生长良好。毛囊干细胞-CGM修复裸鼠后1周切片示创面有新生上皮覆盖,表皮分化良好,而对照组残留较大未愈创面。修复后4周和12周可见对照组收缩较实验组显著。结论体外构建的毛囊干细胞-CGM可以修复裸鼠皮肤缺损。

简介：目的观察表皮干细胞与胚胎期汗腺发生过程的关系，为诱导表皮干细胞向汗腺细胞定向分化奠定基础。方法分别取13-31周胎龄人胎儿背部全层皮肤，采用常规组织学，免疫组织化学染色法（SP法），动态观察汗腺原基细胞，汗腺胚芽细胞及汗腺细胞中β1整合素与细胞角蛋白-19（K19）的表达特征，以细胞角蛋白-8（K8）免疫组化染色阳性为汗腺发生及成熟的鉴定标准。结果组织学观察显示，胎龄16周的皮肤，初级表皮嵴基底层细胞呈灶性聚集，形成小丘状，继而形成圆柱状细胞索向深层切入；至胎龄第24周时，细胞索末端部分形成蟠状，表现为成熟汗腺特征，不仅汗腺原基细胞，汗腺胚芽细胞表达β1整合素与K19，成熟的汗腺细胞亦有表达，并持续存在于汗腺发生全过程，K8始于14-16周，在汗腺胚芽细胞内表达并持续存在。结论汗腺于胎龄14-16周开始发生，至第24周基本成熟，胚胎期汗腺发生过程中，表皮干细胞是汗腺发生的源泉。

简介：目的观察整合素β1对人表皮干细胞（KSC）增殖与分化的影响。方法选择人整合素β1RNA干扰靶点特异性的寡核苷酸，连接到小干扰RNA（siRNA）表达质粒pSilencer3.1／H1上，将其转染到KSC中，并根据转染的方式将KSC分为非转染、转染空载体、转染si整合素β1-1、转染si整合素β1-2、转染siNegative5个部分。通过蛋白质印迹法检测各部分KSC整合素β1蛋白的表达水平，并筛选出最有效的阳性载体，将其命名为si整合素β1进行后续实验；通过逆转录聚合酶链反应检测各部分KSC整合素β1mRNA的表达水平，上述检测均重复测定5次。结果非转染、转染空载体的KSC不能抑制整合素β1蛋白的表达；转染si整合素β1-1、si整合素β1-2的KSC能够在蛋白水平抑制整合素β1的表达，并且后者效果强于前者，抑制效率达到60％-70％，将其命名为si整合素β1；si整合素β1使KSC中整合素β1mRNA水平明显下降，抑制效率约达70％。结论重组质粒转染KSC后可下调整合素β1mRNA及其蛋白的表达。

简介：目的了解离体皮肤冻伤模型创面愈合过程中,基质细胞衍生因子1（SDF-1）对创缘表皮干细胞（ESC）的运动趋化作用.方法体外构建三维皮肤等价物全层冻伤模型（创面呈孔形）,免疫组织化学染色观察冻伤后3、7d创缘间质内SDF-1的表达情况.另将冻伤模型分为对照组（创面区添加PBS50μL/孔）、SDF-1组（创面区添加100ng/mLSDF-1,50μL/孔）和AMD3100组[创面区用100ng/mLAMD3100（50μL/孔）处理30min后,添加SDF-150μL/孔],观察各组创缘中ESC的分布变化.结果免疫组织化学染色显示,冻伤后3、7d创缘间质内SDF-1的表达逐渐增加.与对照组及AMD3100组相比,SDF-1组创缘基底层整合素β1阳性细胞数量增多,且部分阳性细胞向上层表皮迁移聚集,创缘ESC数量更多,表皮细胞层数增加.结论SDF-1促进ESC向创缘迁移聚集参与创面修复,这可能是ESC参与创面修复过程的机制之一.

简介：目的了解晚期糖基化终末产物（AGE）对表皮角质形成细胞细胞周期的影响及其可能的信号通路。方法体外制备AGE修饰的蛋白质（AGE—HSA，150m-g／L）作为干预手段。将原代培养的表皮角质形成细胞分为：正常组，采用无血清DK—SFM培养液培养；AGE干预组，采用含150mg／LAGE—HSA的DK—SFM培养液培养；对照组以10μmol／LU0126处理后同正常组条件培养；干预对照组以上述U0126处理后同AGE干预组条件培养。采用流式细胞仪检测细胞周期，蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1、B1以及细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）和p44／42丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）的表达。结果与正常组比较，AGE干预组s期和G2／M期细胞百分比均显著降低（P〈0．05）；对照组、干预对照组G2／M期细胞百分比亦显著降低，分别为（9．7±1．1）％、（9．8±0．7）％（P〈0．05）。与正常组比较，其余3组细胞周期蛋白D1表达下降，其中干预对照组该蛋白仅有微弱表达：正常组、AGE干预组CDK4、细胞周期蛋白B1、p44／42MAPK蛋白表达相似，对照组、干预对照组的3种蛋白表达显著低于前2组。结论AGE通过下调细胞周期蛋白D1的表达阻碍表皮角质形成细胞的细胞周期进程。

简介：摘要目的对照分析肺内经病理证实的26例原发性肺黏液表皮样癌与34例中央型肺癌的CT表现。方法回顾性分析行CT检查，并经手术病理证实的26例肺MEC患者资料，并由2名具有10年以上工作经验的高级职称医师分析其影像资料。将不易鉴别的22例中央型肺MEC挑选出来，并与中央型肺癌进行征象对比分析。结果病变主要为中央型22例，外周型4例。中央型肺MEC与中央型肺癌相比，年龄、性别比、病灶最大径、形态、边界、分叶率、液化坏死率、强化均匀程度及远端支气管扩张情况均有统计学差异（P<0.05）。结论肺MEC的临床及CT表现具有一定特征，详细地分析CT征象，有助于其与中央型肺癌鉴别。