简介:目的MTT法是评价细胞增殖的常规方法,但有时有一定的假阳性率。本文从细胞衰老角度进行研究,探讨假阳性率产生的原因和改进方法。方法使用能引起细胞衰老的抗肿瘤药物博来霉素和博宁霉素,处理人子宫颈癌HeLa细胞和人乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT、SRB、台盼蓝染色计数法和克隆形成率等方法检测细胞增殖的抑制作用;衰老相关的β-半乳糖苷酶染色确定衰老细胞。结果低浓度的博宁霉素处理MCF-7细胞,明显引起细胞衰老。MTT法测得的IC50值最大,SRB和台盼蓝染色计数法测得的IC50值次之,克隆形成率法最为敏感,测得的IC50值最小,达到了nM级。结论细胞衰老明显影响一些抗肿瘤药物的MTT评价结果,使用克隆形成率法是最为可靠的克服细胞衰老影响的方法。
简介:目的在阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)细胞模型中验证PrPc朊蛋白(cellularprionprotein,PrPc)是否影响神经细胞凋亡;在AD的细胞模型中探索PrPc是否影响β-分泌酶(β-siteAPPcleavingenzyme1,BACE1)及在AD发病中重要激酶-糖原合成酶激酶-3(glycogensynthasekinase3beta,GSK3β)。方法在稳定转染突变的淀粉样前体蛋白(amyloidprecursorprotein,APPswe)cDNA的小鼠脑神经瘤细胞(neuro-2a,N2a)中过表达pCDNA3.1-Prnp,通过4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)标记细胞核DNA。另一方面通过蛋白免疫印迹方法(westernblot)检测BACE1、GSK3β表达水平。结果稳定过表达APPswe组与pCDNA3.1-Prnp+APPswe组较正常对照组凋亡细胞增加,而pCDNA3.1-Prnp+APPswe组细胞核碎裂更明显。而三组之间BACE1的表达水平差异无统计学意义,APPswe组与pCDNA3.1-Prnp+APPswe两组GSK3β表达量较正常组增加,差异有统计学意义,而两组之间差异无统计学意义。结论PrPc在AD发病中可能介导Aβ所致的神经细胞凋亡。
简介:自Katz等人提出用日常生活活动能力(ActivitiesofDaiilyLiving)测定,作为评价老年人健康与功能状况的概念以后,这观点逐渐被人们采纳。1984年WHO老年流行学研究组也认为生活上的独立自主(Autonomy)可作为老年人健康状况的适用指标.它在应用中有几个明显的优点:1.评估的重点在人,看重的是疾病发生在个体引起的后果。2.连续观察功能变化可以反映健康状态的双向演变过程.功能状况可由于康复.机能代偿而有所改善,也可进一步恶化.评价功能状况能够较有效地反映疾病进展与康复及综合性预防保健工作的成效。3.直接反映不同人群对医疗和社区生活服务的需求。
简介:目的研究老年肝硬化患者不同类型食物胃排空时间及其与m清NO水平关系。方法分别应用实时超声法和放射学方法对30例老年肝硬化患者(Child—PughA级9例,B级13例,C级8例)和30例健康志愿者进食液体和半固体食物后胃排空时间进行测定,并测定其空腹血清NO浓度。结果肝硬化患者胃液体半排空时间为47.3±6.9min,而进食10mm小钡条和半固体标准餐混合物后胃排空时间为6.9±1.9h;健康对照组则分别为26.4±5.3min和4.7±1.1h。血清NO浓度患者组与对照组分别为67.9±7.3umol/L及48.8±6.2umol/L,差异均有统计学意义。而ChildA,B,C三组之间差异无统计学意义。结论老年肝硬化患者不同类型食物胃排空时间均有延迟,NO在动力延缓中可能起着重要的作用。实时超声法和放射学方法简单有效。