简介：Objective:ToobtainrecombinantTreponemapallidumsubsp,pallidum(TP17KD)lipoproteininlargequantitiesbyamplificationandtofurtherpurifyantigensforlaboratorydiagnosisofsyphilisanddevelopmentofasyphilisvaccine.Method:TheTppl7lipoproteingenewasamplifiedfromtheTP(strainNichols),andthenitwasrecombinatedintoaplasmidpMAL-2candclonedwithinE.coli12-TB1.ThehostbacteriacontainingrecombinantplasmidswereinducedwithIPTG.TheTpp17KDlipoproteingenewasamplifiedbyus-ingPCRandpositivecloneswerescreenedwithdoubledigestionandPCR.RecombinantplasmidsweretransformedintoE.coliandtheE.colicarryingrecombinantplasmidswereinduced.TheexpressionofTP17KDwasdetectedbysodiumdedecylsulfate-polyacrylamidegelelectrophoresis(SDS-PAGE)andimmunoblot.Results:GelstainingwithCoomassieblueG-250showedthattheinducedE.colicarryingrecombinantplasmidcouldproduce60KDfusionproteinathighlevels.Gelscanningshowedthat17KDproteinexpressioninE.coliaccountedfor10%oftotalcellularprotein.Therecombinantproteinantigenreactedwiththeseraofsyphilispatients.Conclusion:Ourstudylaysacornerstonefordevelopingnewtechniquesoflaboratorydiagnosisforsyphilisandnewvaccines.Preliminaryclinicalapplicationshowedthatthefusionproteincouldbeusedforthediagnosisofsyphilis.

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简介：目的评价解脲脲原体(Uu)培养方法的特异性,了解解脲脲原体的耐药性.方法用A7琼脂固体培养基平板分离鉴定法和肉汤稀释法检测2230例临床标本.结果2230例临床标本,固体培养阳性448例,液体培养阳性593例.两者比较(χ2=128.8,P＜0.001)差异有显著性.药敏试验四环素类和喹诺酮类药物有较高的耐药性.结论固体培养和液体培养联合应用可提高解脲脲原体检验的特异性,并能了解其药物敏感性,对临床治疗具有重要指导意义.

简介：目的研制人乳头瘤病毒16型（HPV16）L1／E7CTL重组杆状病毒载体。方法以包含HPV16标准病毒株的质粒pHPV16为模板，采用PCR技术扩增HPV16主要衣壳蛋白L1（1-471aa）的基因序列，同时人工合成E7蛋白CTL表位E749-57的编码序列，将两个目的基因逐步连接构建重组质粒pUC19HPV16L1／E7CTL，HPV16L1／E7CTL片段经质粒pFastBac1转位至BacmidDNA后通过PCR鉴定重组杆粒。结果成功构建了包含融合基因HPV16L1／E7CTL片段的克隆质粒puc19HPV16L1／E7CTL，制备了L1／E7CTL重组杆状病毒载体杆粒BACMIDDNA。结论采用分子克隆技术构建了包含L1／E7CTL的重组杆粒BACMIDDNA，有利于下一步融合蛋白的表达，制备一种能够更有效激发CTL杀伤作用的嵌合病毒样颗粒疫苗，为疫苗研制打下基础。

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简介：目的观察来氟米特对慢性移植物抗宿主病（cGVHD）狼疮样小鼠肾组织中骨形成蛋白-7（BMP-7）、转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的干预作用,探讨来氟米特对狼疮肾炎（LN）的保护机制。方法B6D2F1杂交鼠随机分为4组（各组均n=6）：正常对照组、模型组、泼尼松组和来氟米特组。建立cGVHDLN小鼠模型后,泼尼松组、来氟米特组分别给予相应药物灌胃,正常对照组、模型组给予等体积生理盐水灌胃。观察、比较各组小鼠的尿蛋白排泄率（UPE）、肾功能、肾脏病理改变以及肾组织中BMP-7、TGF-β1的表达情况。结果与正常对照组相比,模型组小鼠UPE、尿素（BUN）、肌酐（Scr）显著升高,肾脏病理改变明显加重,BMP-7表达显著减少、TGF-β1表达显著增加（P〈0.01）。与模型组相比,泼尼松组、来氟米特组UPE、BUN、Scr显著降低,肾脏病理明显改善,BMP-7表达增加、TGF-β1表达减少（P〈0.05或0.01）。狼疮样模型小鼠肾组织中BMP-7表达水平与UPE、BUN、Scr均呈显著负相关（P均〈0.01）,TGF-β1表达水平与UPE、BUN、Scr均呈显著正相关（P均〈0.01）。结论上调BMP-7、下调TGF-β1在肾脏的表达,可能是来氟米特对对LN的保护机制之一。

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简介：目的：探讨鬼臼毒素纳米脂质载体（POD-NLC）诱导人永生化阴道上皮细胞（VK2/E6E7）凋亡的作用及机制.方法：取对数期生长VK2/E6E7细胞,分别加入POD-NLC和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养24小时.实验分为4组：A组：空白对照组;B组：0.25μg/mLPOD-NLC＋Caspase抑制剂组;C组：1μg/mLPOD-NLC＋Caspase抑制剂组;D组：空白NLC＋Caspase抑制剂组.采用流式细胞仪检测ROS水平,qPCR检测AIFmRNA表达,蛋白印迹检测各组细胞AIF、cyt-C蛋白表达.结果：B组、C组均可以上调ROS、AIF、cyt-C水平,与A组及D组相比均有统计学差异（P值均〈0.05）;B组与C组AIFmRNA及AIF蛋白表达无统计学差异（P值均〉0.05）;ROS、cyt-C各组间比较均有统计学意义（P值均〈0.05）.结论：鬼臼毒素纳米脂质载体可以通过非Caspase依赖途径诱导永生化阴道上皮细胞凋亡.

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简介：目的观察不同浓度葡萄籽提取物原花青素（GSPE）对长波紫外线（UVA）诱导人皮肤成纤维细胞表达转化生长因子-β（TGF-β）Ⅱ型受体和Smad7蛋白的影响。方法本实验选用体外培养的人皮肤成纤维细胞株（HSFs）为研究对象,实验主要分3组,空白对照组,单纯光照组（UVA照射人皮肤成纤维细胞）,照光加药组（UVA照射细胞后予不同浓度GSPE干预）。应用免疫细胞化学技术检测UVA照射前、后及不同浓度GSPE干预后对皮肤成纤维细胞TGF-βRⅡ和Smad7蛋白表达的情况。结果与空白对照组相比,单纯UVA光照组人皮肤成纤维细胞TGF-βRⅡ蛋白表达下降（P〈0.05）,Smad7蛋白表达升高（P〈0.05）;与单纯光照组相比,UVA照射后经25μg/mL、50μg/mL和100μg/mL浓度GSPE处理后,成纤维细胞TGF-βRⅡ蛋白表达水平均升高（P〈0.05）,Smad7蛋白表达水平均下降（P〈0.05）,且于50μg/mL和100μg/mLGSPE处理后,成纤维细胞TGF-βRⅡ和Smad7蛋白表达量均接近正常水平（P〉0.05）。结论适当浓度GSPE可通过显著上调TGF-βRⅡ蛋白水平以及下调Smad7蛋白水平的表达来对抗UVA抑制TGF-β/Smad信号通路的传导,进而减轻UVA所致细胞外基质的降解,延缓了皮肤光老化的进程。