简介:用pH4.2的乙醇缓冲液制备醇溶蛋白和儿茶酚溶液。本文研究了氢键受体N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、非极性溶剂二氧杂环己烷和氯化钠(NaCl)对聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)去除儿茶酚与硅胶吸附醇溶蛋白的影响。DMF和二氧杂环己烷强烈抑制PVPP去除多酚,而NaCl可大幅提高PVPP去除多酚的能力。结论是:PVPP通过氢键和疏水键与多酚结合。另一个试验中,DMF和二氧杂环己烷还强烈抑制硅胶去除蛋白的作用,但NaCl可增强硅胶去除蛋白的作用。硅胶通过氢键和疏水键与蛋白结合。硅胶还能去除聚肌氨酸(聚脯氨酸类似物),该物质具有一个叔胺结构,也能与多酚形成混浊。硅胶和PVPP吸附混浊活性组分的机制与蛋白一多酚混浊形成机制相似。
简介:建立了啤酒中混浊活性蛋白质的提取制备方法和基于高效凝胶过滤色谱的蛋白质分析方法,对混浊活性蛋白进行了系统的分子量分布特点及定量分析,并将其应用在了啤酒非生物稳定性及啤酒样品分析领域高效凝胶过滤色谱法解决了混浊活性蛋白分子量及含量难以测定的问题,对啤酒生产蛋白质分子量的控制也具有重要的指导意义结果表明混浊活性蛋白的分布区间为23.4-150.0kDa、5.7-23.4kDa、1.0-5.7kDa和05-1.0kDa啤酒样品中蛋白质含量最高的分子量包括4.8kDa,2.4kDa,3.9kDa和128.8kDa方法相对标准偏差为03%-2.0%,不需混浊活性蛋白提取制备过程中的透析除盐处理,大大简化了操作流程方法简便快速,准确度高,重复性好最后应用该方法对啤酒稳定剂硅胶、酿造单宁和脯氨酸蛋白酶的作用效果进行了分析研究.结果显示硅胶主要去除0.5-1.0kDa,酿造单宁去除32.0-55.0kDa,而脯氨酸蛋白酶主要去除51.6-1500kDa部分蛋白质.