简介:脯氨酸内肽酶(Prolylendopeptidase,PEP)是一类能够特异性水解低分子质量多肽链中脯氨酸残基羧基端肽键的内切酶,与胶原蛋白的后期降解有密切关系。以淡水鱼草鱼为原料。采用硫酸铵分级沉淀。DEAE—Sephacel阴离子交换,Phenyl—Sepharose疏水层析和羟基磷灰石层析等方法从草鱼肌肉中分离纯化得到一种脯氨酸内肽酶。SDS—PAGE结果显示,草鱼PEP的分子质量为75ku。酶学性质分析表明,其最适pH为6.0,在pH5.5~7.5间有较好的稳定性。酶的最适温度为30℃,其热稳定性较差。PEP能够特异性分解肽链羧基端为脯氨酸残基的荧光底物,PEP的特异性抑制剂SUAM以及丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟对其有强烈的抑制作用。酶动力学研究表明,草鱼PEP的k为19.23μmol/L,kca为2.5s-1。肽指纹质谱分析结果表明,草鱼PEP与青锵鱼、罗非鱼、斑马鱼PEP的序列同源性分别为98-3%.96.1%和94.4%。
简介:为研究改性处理的柚皮膳食纤维对调节大鼠血糖、肌肉组织糖原水平的影响,以SD大鼠为试验对象,分别测定大鼠体重、肝糖原、肌糖原及总抗氧化能力等指标,探讨不同改性处理后的膳食纤维对大鼠组织及血液中糖原水平的影响。研究表明:不同改性处理的柚皮膳食纤维均能有效调节大鼠组织及血液中糖原水平(P〈0.05),其中超微粉碎高剂量组效果最好。与高糖模型组相比,超微粉碎高剂量组可显著降低大鼠血糖(66%)、胰岛素(12.1%)和糖化血清蛋白(47.5%)水平,且能显著提高C-肽(35.7%)和T-AOC(51.9%)水平。富含改性柚皮膳食纤维日粮,可有效调节大鼠体内血糖及胰岛素等水平,对开发功能性柚皮膳食纤维食品具有参考价值。