简介:目的建立免疫磁珠捕获精子的方法,比较4种不同抗体制备的免疫磁珠捕获模拟检材中精子的效果,探索其分离混合斑的可行性以及优缺点。方法分别用4种抗体制备免疫磁珠,对不同比例混合细胞悬液(上皮细胞与精子)中的精子和放置不同时间的纯精斑进行提取,将磁珠吸附到的细胞进行DNA-STR分型,对比4种磁珠的差异。结果4种磁珠都能特异性地将精子分离出来,分型结果与男性供者已知分型一致。经X2检验,当上皮细胞与精子的比例大于100:1或小于10:1时,P〉0.05,捕获结果没有明显差异;当其比例在10:1时,P〈0.05,抗PH20抗体磁珠的灵敏度高于其余三种抗体。捕获放置1天和15天精斑的成功率结果差别P〉0.05,没有明显差异。捕获放置30天的精斑结果差别P〈0.05,抗JLP抗体磁珠有明显优势,而抗ADAM2抗体磁珠效果最差。结论4种不同抗体制备的免疫磁珠在捕获精子的灵敏度上有差异,可以根据需要选择抗体制备免疫磁珠,有望实现对不同混合斑的分离。
简介:摘要引进加拿大BiochemImmunosystems公司的磁分离酶联免疫技术(MAIA)做甲状腺激素测定,灵敏度可达1×10=12g检测级。经一年的实验,本文认为MAIA是一种灵敏、快速、特异性强、重复性好、显色稳定的试验。本文用来自内蒙古各地的153名健康人做正常参考值测定,与上海和网外正常参考值比较,结果发现内蒙地区男、女甲状腺激素水平与上海地区比较有显着差异,P<0.01,促甲状腺激素(TSH)无差异。内蒙地区与国外正常参考值比较除总T3无差异外,P>0.05,其余均有显著性差异,P<0.01。用上海地区正常参考值,判定328名患者甲状腺激素结果异常,而套用内蒙地区正常参考值,328名中只有161名甲状腺激素异常,167名结果正常。
简介:目的建立泰泽氏病原体(Ty)纯化方法,获得纯的菌体供抗原研究,为ELISA诊断抗原的制备提供依据;并尝试建立Ty隐性感染血清学抗原检查方法。方法选择特异性抗体包被磁珠,从感染大鼠肝脏中富集和纯化Ty;用SDS-PAGE和Westernblot技术考察纯化Ty的蛋白和抗原图谱;同时用免疫磁珠分离技术(IMS)直接检查隐性感染大鼠肠道上皮细胞内的Ty。结果用辛酸-硫酸铵纯化的Ty单克隆抗体M5以0.5μg/10^7beads以上浓度包被抗IgG抗体预结合的磁珠4h,可最大效率地富集Ty;分离反应进行1h,敏感性达到1矿菌体/mL;吖啶黄染色镜检法可以直接、快速地观察到结合于磁珠上的细菌;抗原分析表明,IMS较好地去除了肝组织和真核细胞成分,纯化的TvRJ株具有3个免疫优势的抗原成分,相对分子质量(Mr)分别为160×10^3、116×10^3、55×10^3;此外,IMS法可直接从隐性感染大鼠盲肠上皮细胞中检测到少量寄生的Ty。结论用IMS技术可有效地富集和纯化Ty,并可以作为Ty隐性感染血清学抗原检查的候选方法。
简介:摘要应用磁分离酶联免疫测定法测定血清中TSH、T3、T4、FT3、FT4五项指标。健康人组(n=100),建立本实验室正常参考值。各型甲状腺机能亢进人组(n=68),甲状腺机能减退人组(n=22);各种急性或慢性全身性疾病的患者,其中,心肌梗塞12人;充血性心力衰竭8人;肝炎、肝硬化10人;脑血管疾病11人;呼吸道感染21人。结果表明健康人组血清TSH水平略呈偏态分布,第2.5~97.5百分位数范围为(0.29~5.70)mIU/L;血清T3水平呈正态分布,X=2.76、S=1.02、正常参考值(1.74~3.78)mmol/L;血清T4水平呈正态分布X84.82、S=26.23、正常参考值范围(58.59~111.05)mmol/L;血清FT3水平呈正态分布,X=2.06、S=0.88,正常参考值范围(1.18~2.94)pmoL/L;血清FT4水平呈正态分布X=8.53、S=3.03,正常参考值范围(5.5~11.56)pmol/L。甲亢初诊患者TSH水平降低,T3、T4、FT3、FT4有不同程度升高;甲状腺机能减退患者TSH水平升高,T3、T4、FT3、FT4有不同程度降低;各种急性或慢性全身性疾病患者TSH水平与正常组无显著差异,T3、FT3、FT4正常或略低,T4正常或升高;另外,实验观察TSH、FT3、FT4三项指标诊断甲功在敏感性和特异性上超过T3、T4两项指标。磁分离酶联免疫法是一种灵敏、特异、有效、且无放射污染的免疫化学检测技术。
简介:小波多尺度分析是重磁异常分离的一个重要方法,它不同于如窗口滑动平均法、趋势分析法、匹配滤波等常用方法,因这些方法分离出的局部异常是地质体从某个深度往上直到地表的综合反应,由于近地表地质体及干扰源的作用使得被分离出的局部异常成分复杂、形态较为凌乱、不规整;而用小波多尺度分析分解出的N(N〉1)阶细节异常划分的局部异常则为地质体从深度A往上到深度B这一空间段的综合反应,由于其不包含以一阶细节异常为代表的浅层地质体及干扰源异常,异常成分简单、形态规整、为深部地质体的自然反应,适用于研究隐伏岩体与隐伏矿床。通过二次开发解释20世纪80年代采集的月山地区1:1万地面磁测数据,并最终提交由小波多尺度分析法分解的局部异常成果,其中3个异常与朱冲铁矿的3个矿段相吻合,而这些局部异常却是在未知朱冲铁矿的前提下提取的,可预见其它几个有类似地质条件的局部异常也具找矿前景。
简介:目的结合免疫磁珠分离技术和流式细胞术两种方法,对大鼠外周血突变型红细胞进行富集和检测,优化大鼠外周血Pig-a基因突变试验方法。方法用20、40和80mg/(kg·bw)剂量的N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)连续3d给予SD大鼠,在染毒前、染毒后第7、14和28天分别采集大鼠外周血,经免疫磁性分离柱富集RETCD59-和RBCCD59-,用流式细胞术分别对免疫磁珠分离柱前和柱后的外周血红细胞进行计数。结果与对照组相比,ENU各剂量组的RETCD59-和RBCCD59-发生率均显著升高(P<0.05);采用免疫磁珠分离技术后,可以在3min内完成一个样品的Pig-a基因突变检测,分析的RETCD59-或RBCCD59-细胞数量分别最高可达2×104个或9×104个。结论本研究联合运用免疫磁珠分离术和流式细胞术,建立并优化了大鼠体内Pig-a基因突变试验方法,实现了高通量检测,提高了试验的准确性和效率。
简介:摘要目的探讨测定阴道液hCG含量对胎膜早破(PROM)的辅助诊断价值。方法采用磁分离酶联免疫测定技术(MAIA),测定正常孕妇和胎膜早破孕妇阴道液hCG浓度,并对二者进行比较。结果正常孕妇与胎膜早破孕妇阴道液hCG(±SD)分别为286±14.4IU/L,450.6±135.3IU/L;二者的实测范围分别为1~140.6IU/L,225.4~921.8IU/L,二者间有非常显著性差异(P<0.01)。测定阴道液hCG水平,对胎膜早破的诊断价值以hCG>50IU/L为诊断阈值,其敏感性为100%,特异性为92.5%,阳性预测值为92.7%。阴性预测值为100%。结论应用磁分离酶联免疫测定技术,测定阴道液hCG水平,对胎膜早破有非常高的辅助诊断价值;而且该法操作简便易行,对人体及环境无害,在中、基层医院都可开展,可作为诊断胎膜早破的一种常规方法。
简介:摘要目的探讨测定阴道液hCG含量对胎膜早破(PROM)的辅助诊断价值。方法采用磁分离酶联免疫测定技术(MAIA),测定正常孕妇和胎膜早破孕妇阴道液hCG浓度,并对二者进行比较。结果正常孕妇与胎膜早破孕妇阴道液hCG(±SD)分别为286±14.4IU/L,450.6±135.3IU/L;二者的实测范围分别为1~140.6IU/L,225.4~921.8IU/L,二者间有非常显著性差异(P<0.01)。测定阴道液hCG水平,对胎膜早破的诊断价值以hCG>50IU/L为诊断阈值,其敏感性为100%,特异性为92.5%,阳性预测值为92.7%。阴性预测值为100%。结论应用磁分离酶联免疫测定技术,测定阴道液hCG水平,对胎膜早破有非常高的辅助诊断价值;而且该法操作简便易行,对人体及环境无害,在中、基层医院都可开展,可作为诊断胎膜早破的一种常规方法。