简介:ToscreenandidentifytheshortpeptideswithspecificbindingactivitytohumanCDS9andtodesigntheshort-peptideclampagainsttumorescape,thephagedisplaypeptidelibrarycontaining12peptideswasusedtoselectthehighlyexpressedspecificcoalescentpeptideofhumanCD59inCHOcells.Positivephageclonesobtainedafter5roundsofbiopanninganddetectedwithELISAwereobtained,inwhich8ofthemwithhighbindingactivitytohumanCD59weresequenced.The3sequencesthusobtainedshowedhighhomologywitheachandcertainhomologywithsequencewithhumanCD2(PubMed339HGAAENSISPSS),andallcontainedprimarystructureHXAXXXXXXPXX,ofwhichthissequencemaybethemimicconformationalepitopebindingtohumanCD59.Theseresultsinthepresentstudymaybehelpfultodesigntheshort-peptideclampagainsttheactivesitesofCD59ontumorescape.
简介:CD59可以由绑定禁止补充的cytolytic活动到C8/C9并且保护主人房间膜免于相应的膜攻击建筑群(MAC)。然而,CD59是广泛地肿瘤房间上的overexpressed,它在tumorigenesis被含有。相对MAC的CD59的活跃地点仍然被糊涂。是报导MAC有约束力的地点在蛋白质的远侧的脸在残余W40附近集中了的膜上位于一条恐水病的沟的附近。这里,二指导地点的mutagenesis被重叠延期PCR执行删除残余W40地点(异种1,M1)或把C39W40K41改变到W39W40W41(异种2,M2)。然后,我们构造了变异的CD59真核细胞的表达式系统并且与野类型的CD59相比在CHO房间上调查了他们的生物函数。表示recombinant蛋白质的CHO房间的稳定的人口被immunotechnique屏蔽。在30段落culturing以后,蛋白质能被测试。染料版本试金建议M1CD59对补充失去这项活动,当M2CD59稍微增加反补充活动时。结果显示人的CD59的W40对它的活动重要,并且这个地点的禁止可以是增加补充活动并且治疗肿瘤的一个潜在的方法。
简介:CD59,属于膜补充规章的蛋白质(mCRPs),禁止补充的cytolytic活动并且在稳固的癌症是过去表示的,包括卵巢癌症。现在的学习的目的是构造编码shRNA的recombinantretrovirus指向的人的CD59并且感染A2780房间以便调查在减少的CD59表示和卵巢癌症的tumorigenesis之间的关系。siCD59和siCD59-C被分别地定序的PCR,限制endonuclease分析和DNA成功地构造并且识别。siCD59能高效地感染A2780房间,它被西方的弄污证实。当与新鲜正常人的浆液孵化了时(8%,v/v)为在37掳C的1h,房间生存能力被减少,房间损坏在感染的siCD59被增加与siCD59-C相比的A2780房间感染了房间。这导致了caspase-3的激活。在感染的房间用染色的Hoechst与hypercondensed原子核被显示出的siCD59的apoptosis。同时,在裸体老鼠的卵巢肿瘤接枝的重量显著地与siCD59-C组的相比在siCD59组被减少。并且在在siCD59组的肿瘤织物的CD59蛋白质的表示显著地被减少。这些结果建议在经由调停retrovirus的RNAi的卵巢癌症房间的CD59silencing能提高调停补充的房间损坏,禁止卵巢癌症的生长。CD59可能是为在卵巢癌症的基因治疗的一个潜在的目标。
简介:【摘要】 目的:总结并归纳流式细胞术检测 CD55、 CD59对阵发性睡眠性血红蛋白尿( PNH)的诊断价值。 方法:选取50例阵发性睡眠性血红蛋白尿( PNH)患者作为研究组, 50例再生障碍性贫血( AA)患者作为对照 A组, 50例缺铁性贫血( IDA)患者作为对照 B组, 50例骨髓增生异常综合征( MDS)患者作为对照 C组, 50例正常人作为对照 D组,用流式细胞术检测研究组与对照组衰变加速因子( CD55)和反应性溶血膜抑制物( CD59)的表达量。 结果:研究组患者的CD55与 CD59的表达缺失率明显高于对照组,组间差异明显, P< 0.05,具有统计价值。 结论:使用流式细胞术检测患者红细胞和中性粒细胞膜CD55和 CD59的缺失,能够高特异且敏感地对阵发性睡眠性血红蛋白尿( PNH)进行诊断,有效区分出 PNH患者与 AA、 IDA、 MDS患者,指标具有可靠性,可以在临床上推广使用。
简介:摘要目的总结并归纳流式细胞术检测CD55、CD59对阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的诊断价值。方法选取50例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患者作为研究组,50例再生障碍性贫血(AA)患者作为对照A组,50例缺铁性贫血(IDA)患者作为对照B组,50例骨髓增生异常综合征(MDS)患者作为对照C组,50例正常人作为对照D组,用流式细胞术检测研究组与对照组衰变加速因子(CD55)和反应性溶血膜抑制物(CD59)的表达量。结果研究组患者的CD55与CD59的表达缺失率明显高于对照组,组间差异明显,P<0.05,具有统计价值。结论使用流式细胞术检测患者红细胞和中性粒细胞膜CD55和CD59的缺失,能够高特异且敏感地对阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)进行诊断,有效区分出PNH患者与AA、IDA、MDS患者,指标具有可靠性,可以在临床上推广使用。
简介:【摘要】目的:探究再生障碍性贫血(AA)患者外周血CD55和CD59细胞表达的临床意义。方法:选取我院2019年6月~2021年7月期间收治的85例门诊及住院AA患者作为此次研究对象并设为研究组,另选取同期在我院进行体检健康者35例为对照组,对所有研究对象均采用荧光免疫技术对CD55、CD59单克隆抗体进行荧光素标记,应用流氏细胞术进行定量检测。通过分析AA患者外周血红细胞计数(RBC)以及中性粒细胞(NE)是否存在阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)样CD55-、CD59细胞分为A、B两组,给予患者进行以环孢素(CsA)为主等药物治疗。结果:对照组外周血RBC、NE系CD55-、CD59-细胞均小于3%,AA患者中,81.18%的患者CD55-、CD59-细胞百分率均有增高(3%~10%),表示RBC及NE含有PNH样细胞;通过分析A、B两组应用CsA的效果得出,A组用药后起效更快,治疗总有效率为86.96%较B组31.25%更高(P<0.05)。结论:AA患者体内RBC、NE含有PNH样细胞,对含有PNH样细胞的AA患者应用以CsA为主的抑制剂治疗,具备敏感度高、疗效显著等特点,对临床用药指导及预后具有重要意义。
简介:目的研究阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患儿骨髓CD34+CD59+细胞的分离、纯化及体外扩增的条件,并对扩增后细胞的长期造血能力进行评估,为探索PNH患儿新的治疗途径提供实验依据。方法采用磁珠一流式细胞仪二步分选法,从PNH患儿骨髓中分选出CD34+CD59+细胞,在不同细胞因子组合条件下进行体外扩增,并培养集落形成细胞(CFCs)及长期培养始动细胞(LTC-IC)。结果体外扩增最适宜的细胞因子组合为干细胞因子+白细胞介素(IL)-3+IL-6+FLT3配基+巨核细胞生成素+红细胞生成素,最适宜的扩增时机为第7天,此时CD34+CD59+细胞的扩增倍数为30.4±6.7倍。CD34+CD59细胞在扩增以后,仍为CD59细胞,能保持较好的形成CFCs的能力,仍能形成LTC-IC,与扩增前相比差异无统计学意义;但PNH患儿CD34+CD59+细胞的扩增能力低于正常对照的CD34+细胞(P〈0.01)。结论PNH患儿的CD34’CD59‘细胞能够进行体外扩增,扩增后的细胞仍然具备长期造血重建的能力,并且无向PNH克隆转化的趋势,说明对PNH患儿进行自体移植在临床上有可行性。
简介:摘要目的探讨新生儿感染时外周血CD64及CD3、CD4、CD8的表达,为新生儿细菌感染的早期诊断和细菌感染时细胞免疫功能的评价提供循证支持。方法应用流式细胞仪定量检测120例感染和非感染新生儿外周血CD64分子及CD3、CD4、CD8的表达变化,并将败血症组患儿的CD64与C反应蛋白(CRP)、白细胞计数及血培养进行比较。结果败血症组CD64为(6.7±2.8),高于局部感染组(4.1±1.4)与非感染组(2.9±0.5),差异有统计学意义(P<0.01);局部感染组CD64高于非感染组,差异有统计学意义(P<0.01)。在诊断新生儿败血症中,CD64灵敏度为86.4%,特异度为87.9%,阳性预测值83.8%,阴性预测值92.0%,均高于CRP,CD64的检测阳性率为87%,高于血培养;败血症组的CD3为(46.3±12.3)%、CD4为(31.0±10.0)%低于局部感染组CD3(62.6±10.3)%、CD4(45.4±10.8)%和非感染组CD3(61.6±11.3)%、CD4(45.4±13.4)%,差异有统计学意义(P<0.05),局部感染组的CD3、CD4与非感染组之间比较,差异无统计学意义差异有统计学意义(P>0.05),各组间CD8差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD64可作为新生儿细菌感染的早期诊断指标,严重细菌感染患儿存在细胞免疫功能紊乱,T淋巴细胞亚群检测对新生儿细胞免疫功能的评价有重要意义。