简介:摘要目的探讨分析上皮间质转化(EMT)与输尿管结石钬激光碎石后输尿管狭窄的关系。方法选取2019年6月至2021年6月河南科技大学第一附属医院行输尿管结石钬激光碎石术后34例出现输尿管狭窄患者作为狭窄组,其中男19例、女15例,年龄(44.54±10.35)岁,按1∶1比例选取同期收治行输尿管钬激光碎石术后未出现输尿管狭窄的34例作为非狭窄组,男20例、女14例,年龄(45.56±9.57)岁。采用χ2检验或独立样本t检验比较两组患者一般资料及血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平差异,并使用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清HMGB1、IL-1β、TGF-β1水平对钬激光碎石术后输尿管狭窄的预测效能。结果术前,两组患者血清HMGB1、IL-1β、TGF-β1水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);术后第7天,狭窄组患者血清HMGB1、IL-1β、TGF-β1水平分别为(15.98±1.11)μg/L、(24.23±1.54)μg/L、(381.58±38.52)ng/L,均高于非狭窄组的(14.21±1.02)μg/L、(23.11±1.08)μg/L、(318.23±27.54)ng/L,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ROC分析显示,患者术后第7天血清HMGB1、IL-1β、TGF-β1水平均可作为钬激光碎石术后输尿管狭窄的预测指标(Z=7.421、2.759、10.740,均P<0.05),其曲线下面积(AUC)分别为0.848、0.679、0.898,其中血清TGF-β1的预测效能最高。结论钬激光碎石术引起输尿管损伤可导致血清HMGB1、IL-1β、TGF-β1水平升高,患者血清HMGB1、IL-1β、TGF-β1水平可作为钬激光碎石术后输尿管狭窄的预测指标。
简介:Thecentralnervoussystem(CNS)containsthetwomostimportantorgans,thebrainandspinalcord,fortheorchestrationofthementalandphysicalactivitiesoflife.Becauseofitsimportance,thehumanbodyhasevolvedbarriersystemstoprotectCNStissuefromtheexternalenvironment.Thisbarrierisamembranecomposedoftightlyapposedcellsandisselectivelypermeabletospecificmoleculesbywayofmembranetransporters.Themajorbarriersinthebrainandtheircorrespondingcellularconstituentsarethebloodbrainbarrier(BBB)composedofendothelialcellsinbrain
简介:目的:观察益气除痰方肺癌肿瘤生长、肺转移的影响,并通过差异蛋白组学技术筛选出差异表达蛋白vimentin,并结合相关技术分析其可能的意义。方法:C57BL小鼠40只,接种Lewis肺癌细胞,造模第2天,随机分为对照组(生理盐水)和低、中、高剂量观察组予益气除痰方1.0g·kg^-1·d^-1,3.0g·kg^-1·d^-1,9.0g·kg^-1·d^-1,每组10只,灌胃21d后,检测肿瘤体积、重量、肺转移灶,分别提取最佳剂量治疗组和模型组肿瘤组织的总蛋白,应用双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)系统获得蛋白点表达差异信息,运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-TOF)鉴定出差异蛋白质。并以荧光定量PCR和Westernblot法对差异蛋白进行表达差异鉴定。培养A549细胞,20%益气除痰方含药血清干预,划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变,RT-PCR检测其对A549肺癌细胞MMP-1、MMP2、MMP9、MMP14mRNA基因表达的影响。结果:益气除痰方3.0g·kg-1·d^-1治疗组肿瘤体积、瘤重、肺转移灶数均明显小于LEWIS模型组(P〈0.01),肿瘤抑制率为57.21%。蛋白质组学研究鉴定受益气除痰方调控影响的蛋白37个,其中vimentin下调尤其明显。20%益气除痰方含药血清可抑制A549细胞的侵袭和转移能力,并能降低MMP2、MMP14mRNA基因的表达,与空白组比较差异有显著性(P〈0.01)。结论:益气除痰方明显下调vimentin表达,抑制A549细胞的运动能力,减少基质金属蛋白酶MMP2、MMP14的分泌,这可能与益气除痰方逆转肺癌细胞上皮-间质转化有关,值得进一步研究。
简介:上皮间充质转化(EMT)指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程。EMT在胚胎发育、慢性炎性反应、组织重建和癌症转移中发挥重要作用。EMT过程被一组转录因子调控,其中包括T-box家族成员Brachyury。Brachyury因子促进EMT及肿瘤细胞的迁徙和播散。Brachyury因子与EMT过程相关的信号通路主要有TGF-β信号通路、FGF/FGFR信号通路和Wnt/β-连环蛋白信号通路等。Brachyury因子是一个很有潜力的T细胞介导肿瘤免疫治疗的候选靶标。本文对转录因子Brachyury在肿瘤细胞EMT过程中的作用进行综述。
简介:Objective:Smallcelllungcarcinoma(SCLC)isconsideredoneofthemostaggressivetypesoflungcancerduetoitsrapidgrowthandearlymetastasis.NotumormarkersortherapeutictargetshavebeendemonstratedtobespecificoreffectiveinSCLCtodate.ThisstudyaimstoevaluatethepotentialofFlotillin1(Flot1)asatargetofSCLCtreatment.Methods:Flot1expressionlevelinthetissueofSCLCandothertissueoflungdiseasewasdetectedusingimmunohistochemicalstaining.TranswellandMatrigelassayswereemployedtoexaminemigrationandinvasionofcancercells.FlowcytometryandxCELLigencesystemwereusedtoevaluatecellapoptosisandcellviability,respectively.ExpressionlevelsofFlot1,epithelialmesenchymaltransition(EMT)markerE-cadherin,vimentin,cyclinD1,TGF-β-Smad2/3,andp-AKTwereexaminedusingWesternblot.Furthermore,xenografttumorinnudemicewasusedtoevaluatethegrowthandmetastasisofNCI-H446cellsinvivo.Results:OurresultsdemonstratedthatFlot1ishighlyexpressedinSCLCsamplesandthatitsexpressioncorrelatesstronglywithclinicalstage,distantmetastasis,andpoorsurvival.TheknockdownofFlot1decreasedthegrowth,migration,andinvasivenessofSCLCcellsandreversedEMTphenotypeinvitroandinvivo,whileenhancedFlot1expressionexhibitedtheoppositebehavior.GeneexpressionprofileanalysisdemonstratedthatFlot1-regulatedgenesfrequentlymappedtotheAKTandTGF-β-Smad2/3pathways.OurresultsfurtherrevealedthatFlot1affectedtheprogressionofSCLCviaregulationofEMTprogression.Conclusions:ThesefindingsindicatedanoncogenicroleofFlot1viapromotingEMTinSCLCandsuggesteditspotentialasatumormarkerandprognosticindicator.
简介:目的探讨自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)细胞治疗对老年非小细胞肺癌患者循环肿瘤细胞上皮间质转化(EMT)的影响.方法应用免疫磁珠分选循环肿瘤细胞;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测EMT标记物CK19、E-cadherin、Vimentin、SnaiI在CIK治疗前后的表达变化,分析其与临床病理特征的关系,比较CIK治疗前后患者卡氏行为状态(KPS)评分的变化.结果40例肺癌患者中,上皮细胞标志物CK19、E-cadherin的mRNA阳性表达率分别是90%(36/40)和17.5%(7/40),间质细胞标记物Vimentin、Snail的mRNA阳性表达率分别是60%(24/40)和62.5%(25/40).CK19、Vimentin、Snail的阳性表达率与性别无关(P>0.05),与肿瘤的大小、病理分型、分期、淋巴结转移、血行转移明显相关(P<0.05).E-cadherin的阳性表达率极低,与临床病理特征均无相关性.CIK治疗后CK19、E-cadher、Vimentin、Snail的mRNA阳性表达率均显著下降,分别为62.5%(25/40)、0%(0/40)、20%(8/40)、10%(4/40),而且CIK治疗后患者KPS评分显著提高(P<0.05).结论老年肺癌患者循环肿瘤细胞存在EMT,并与肿瘤进展正相关,自体CIK细胞治疗抑制了EMT,并提高了患者的生活质量.
简介:目的探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG132对草酸钙肾结石模型转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad信号通路及上皮间质转化(EMT)的影响。方珐MDCK培养后分为3组(空白对照组、草酸组、草酸+MG132组)分别予以相应干预。运用Westernblot蛋白印迹分析检测上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)、N钙黏着蛋白(N-Cadherin)、兔抗人波形蛋白(Vimentin)、TGF-β1、Smad7的表达。采用细胞可渗透性荧光探针2'-,7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)测量细胞活性氧(ROS)水平。结果草酸会使TGF-β1、N-Cadherin、Vimentin表达量增加,使Smad7、E-Cadherin表达下降。MG132会降低草酸引起的细胞ROS的增加。结论泛素蛋白酶体抑制剂MG132通过抑制TGF-β1/Smad通路、影响肾小管上皮细胞的转分化从而发挥抗肾间质纤维化作用。
简介:目的:研究miR-1290在宫颈癌Hela细胞上皮间质转化中的作用。方法:模拟肿瘤放射治疗的分割疗法,单次2Gyγ射线连续照射宫颈癌Hela、Siha细胞诱导辐射抗性细胞株;采用microRNA芯片技术比较辐射抗性细胞与亲本细胞中miRNA的表达谱差异;经不同条件乏氧和辐射处理宫颈癌Hela细胞后检测miR-1290的表达水平;借助miR-1290及miR-1290-inhibition慢病毒表达载体,调变miR-1290在Hela细胞的表达;调变miR-1290后,划痕实验及Transwell侵袭实验比较Hela细胞的侵袭和转移能力;蛋白质印迹法检测细胞中E钙黏素(E-cadherin)和N钙黏素(N-cadherin)的表达。结果:在宫颈癌辐射抗性细胞中miR-1290表达水平显著升高(P〈0.05);乏氧和辐射可诱导miR-1290在宫颈癌Hela细胞中表达(P〈0.05);上调表达miR-1290,Hela细胞出现了明显的间质细胞的形态改变,细胞的侵袭和转移能力明显增强(P〈0.05)。在Hela细胞中上调表达miR-1290,降低了细胞中E-cadherin的表达,同时升高了N-cadherin的表达(P〈0.05)。结论:乏氧和辐射可诱导miR-1290在宫颈癌Hela细胞中表达,miR-1290通过调控E-cadherin和N-cadherin的表达促进宫颈癌Hela细胞发生EMT。
简介:摘要目的:探究早期生长反应基因1(EGR1)对小鼠白内障术后晶状体上皮细胞(LECs)炎症反应以及上皮-间质转化(EMT)的早期调控作用。方法:实验研究。选取10~16周龄EGR1敲除小鼠(EGR1-/-)和野生型小鼠(WT)行白内障手术造模,于造模后0 h,3 h,24 h,48 h,72 h,4 d和5 d处死相应小鼠并取眼球做冰冻切片。免疫荧光染色观察晶状体囊袋中EGR1蛋白、CD11b、LCN2、CXCL1和αSMA的表达情况,Image J定量荧光强度。EGR1-/-小鼠和WT小鼠组间比较采用配对t检验,组内不同时间点比较采用单因素方差分析。结果:WT小鼠白内障术后LECs中EGR1蛋白表达上调、炎症反应指标CD11b、LCN2、CXCL1表达升高。EGR1-/-小鼠白内障术后LECs中EGR1蛋白表达无变化,CD11b、LCN2、CXCL1表达量明显小于WT小鼠(均P<0.01)。此外,EGR1-/-小鼠白内障术后EMT特征性标记物αSMA的表达量、囊袋内有形细胞数量亦明显小于WT小鼠(72 h、4 d和5 d,均P<0.05)。结论:白内障手术可早期激活LECs中的EGR1,激活的EGR1参与调控LECs的炎症反应和EMT,敲除EGR1可以减轻上述炎症反应和EMT。
简介:摘要目的探讨miRNA-192靶向调控Wilms肿瘤蛋白1(WT1)在高糖诱导足细胞上皮-间充质转化(EMT)中的作用。方法以人肾小球足细胞为研究对象,将细胞分为4组:空白对照组、高糖组、阴性对照组、miRNA-192抑制组。采用Western印迹检测各组足细胞表面标志蛋白肾病蛋白(nephrin)、WT1、转化生长因子(TGF)-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平;qRT-PCR检测各组细胞miRNA-192、WT1、TGF-β1、α-SMA mRNA表达水平;采用双荧光素酶靶标实验验证miRNA-192与WT1基因的靶向关系。结果与空白对照组相比,高糖组和阴性对照组nephrin的蛋白表达水平显著降低,差异有统计学意义(F=444.404,P<0.05);miRNA-192相对表达量升高而WT1蛋白及mRNA表达水平均降低(F=184.216、243.543、107.898,P均<0.05);双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,WT1是miRNA-192的靶基因;与空白对照组相比,高糖组和阴性对照组TGF-β1、α-SMA蛋白及mRNA表达水平均升高(FTGF-β1蛋白=69.014,P<0.05;Fα-SMA蛋白=87.644,P<0.05;FTGF-β1 mRNA=147.714,Fα-SMA mRNA=247.584,P<0.05)。与阴性对照组相比,miRNA-192抑制组nephrin的蛋白表达水平升高(t=16.519,P<0.05),miRNA-192相对表达量降低、WT1蛋白及mRNA表达水平升高(tmiRNA-192=10.533,tWT1=17.088、8.186,P均<0.05);TGF-β1、α-SMA蛋白及mRNA蛋白表达水平均降低(tTGF-β1蛋白=6.114,P<0.05;tα-SMA蛋白=7.941,P<0.05;tTGF-β1 mRNA=8.239,tα-SMA mRNA=8.481,P均<0.05)。结论miRNA-192靶向调控WT1促进糖尿病肾病的发展,其作用机制可能与足细胞EMT有关;抑制miRNA-192的表达可减轻高糖诱导的足细胞EMT。
简介:摘要:目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对肺泡上皮细胞(AEC)向间质细胞转化(EMT)的影响及分子机制。方法 分离大鼠的AEC II进行原代细胞培养,取5~7代细胞分为正常对照组、5µg/L TGF-β1诱导组、10µmol/L ATRA组、5µg/L TGF-β1诱导+0.1µmol/L ATRA组、5µg/L TGF-β1诱导+1µmol/L ATRA组、5µg/L TGF-β1诱导+10 µmol/L ATRA组,37℃ 5% CO2条件下培养24h,RT-PCR方法检测细胞中Collagen III、α-SMA、JAK2、STAT3和SOCS3 mRNA水平,37℃ 5% CO2条件下培养72h,Western Blot检测细胞中α-SMA、JAK2、STAT3和SOCS3蛋白表达水平。结果 和空白组相比,TGF诱导组的α-SMA mRNA和蛋白表达水平均升高,Collagen III、JAK2、STAT3 mRNA水平显著升高,SOCS mRNA水平显著降低,JAK2、STAT3、pSTAT3蛋白水平均显著升高,差异有统计学意义(P