简介：摘要目的探讨佛甲草提取物对肾母细胞瘤细胞的生物学行为的影响及其作用机制。方法不同浓度的佛甲草提取物作用于肾母细胞瘤细胞(美国典型菌种保藏中心)后，流式细胞术检测细胞周期，Transwell检测细胞迁移和侵袭，蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中细胞核增殖抗原(Ki-67)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-183表达。转染miR-183抑制剂至肾母细胞瘤细胞下调miR-183表达后，检测细胞周期、迁移和侵袭及Ki-67、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达改变。双荧光素酶报告基因验证miR-183与第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)调控关系。多组间比较采用单因素方差分析(SNK-q检验)。结果佛甲草提取物作用细胞后细胞周期G0～G1期增加(F＝171.952，P<0.05)，S期缩短(F＝229.976，P<0.05)，细胞迁移和侵袭数显著减少(F＝229.976、414.157，P<0.05)，细胞中miR-183表达显著降低(F＝524.898，P<0.05)，Ki-67和N-cadherin的蛋白表达显著降低(F＝489.091、314.763，P<0.05)，E-cadherin的蛋白表达显著升高(F＝547.549，P<0.05)。与anti-miR-NC组比较，anti-miR-183组细胞周期G0～G1期增加(t＝18.177，P<0.05)，S期缩短(t＝17.548，P<0.05)，迁移和侵袭细胞数显著减少(t＝23.476、22.082，P<0.05)，细胞中Ki-67和N-cadherin的蛋白表达显著降低(t＝24.601、22.808，P<0.05)，E-cadherin的蛋白表达显著升高(t＝26.833，P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示miR-183可与PTEN靶向结合。结论佛甲草提取物可能通过下调miR-183表达阻滞肾母细胞瘤细胞周期进程，抑制细胞迁移和侵袭。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-25过表达对食管癌TE1、KSYE-150细胞增殖与侵袭的影响。方法实验样本均来自青岛市中医院2016年1月至2017年6月45例食管癌患者肿瘤组织、癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5 cm，且病理检查无癌细胞浸润)。实验分为空白对照组、阴性对照组、模拟物转染组、抑制物转染组，分别将miR-25模拟物、抑制物转入食管癌TE1、KSYE-150细胞株，检测miR-25表达水平、TE1、KSYE-150细胞增殖能力及细胞周期变化。多组间比较行单因素方差分析，两组比较行配对t检验。结果(1)食管癌组织miR-25表达(1.288±0.214)明显高于正常组织miR-25表达(t＝33.058，P<0.01)；(2)TE1细胞模拟物转染组miR-25表达(2.452±0.360)明显高于阴性对照组，抑制物转染组miR-25表达(0.576±0.110)明显低于阴性对照组(t＝8.212、7.553，P<0.05，P<0.01)；KSYE-150细胞模拟物转染组miR-25表达(3.124±0.450)明显高于阴性对照组，抑制物转染组miR-25表达(0.624±0.120)明显低于阴性对照组(t＝10.297、6.452，P<0.05，P<0.01)，差异有统计学意义；(3)转染24、48、72、96 h，模拟物转染组TE-1细胞活性(35.25±5.24、96.45±8.21、165.36±18.24、223.45±20.24)明显高于阴性对照组(t＝11.137、9.216、7.575、10.547，P<0.05，P<0.01)，抑制物转染组TE-1细胞活性(4.21±0.72、22.36±4.21、52.15±7.36、63.45±7.36)明显低于阴性对照组(t＝4.874、8.940、6.830、7.368，P<0.05，P<0.01)；模拟物转染组KSYE-150细胞活性(42.36±6.36、102.65±13.45、172.36±22.45、242.31±25.35)明显高于阴性对照组(t＝12.449、7.381、7.110、10.464，P<0.05，P<0.01)；抑制物转染组KSYE-150细胞活性明显低于阴性对照组(5.42±0.75、25.12±7.24、62.45±8.36、67.36±8.45)(t＝5.827、6.699、4.872、6.689，P<0.05)，差异均有统计学意义；(4)模拟物转染组TE-1细胞G0/G1期(46.52±6.20)明显低于阴性对照组，S期(46.96±7.12)明显高于阴性对照组(t＝4.096，5.044，P<0.05)，抑制物转染组TE-1细胞G0/G1期(84.52±7.54)明显高于阴性对照组，S期(6.05±0.78)明显低于阴性对照组(t＝4.352，13.715，P<0.05，P<0.01)；模拟物转染组KSYE-150细胞G0/G1期(44.36±6.32)明显低于阴性对照组，S期(49.25±6.58)明显高于阴性对照组(t＝4.544，5.009，P<0.05，P<0.01)，抑制物KSYE-150细胞G0/G1期(81.25±7.43)明显高于阴性对照组，S期(8.78±1.12)明显低于阴性对照组(t＝4.577，10.127，P<0.05，P<0.01)。结论miR-25过表达将促进食管癌细胞株TE-1、KSYE-150增殖与侵袭，抑制miR-2表达会抑制食管癌细胞株TE-1、KSYE-150增殖，促进癌细胞凋亡。

简介：摘要微小RNA (microRNA, miRNA）是非编码小RNA分子，可通过调控脑中端粒酶逆转录酶（telomerase reverse transcriptase, TERT）对认知功能产生影响。关于麻醉药的研究表明，miRNA参与调节麻醉药相关的认知障碍，但麻醉药对TERT的活性、表达水平的调节及其内在机制尚不明确。miRNA可靶向胰岛素生长因子（insulin-like growth factor, IGF）与NF-κB信号分子调节中枢神经系统TERT水平与活性，且当前研究发现麻醉药调控miRNA亦经相关通路影响认知功能，综上分析可对麻醉药影响认知功能中TERT的存在意义与内在调节机制提出一种新想法，TERT活性信号通路受麻醉药与miRNA调节可能为探寻麻醉药调控TERT介导神经元凋亡的研究带来新想法。

简介：摘要目的探讨血浆微小RNA-30b-5p（miR-30b-5p）联合血管外肺水指数（EVLWI）对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者预后的评估价值。方法选择2016年1月至2019年6月儋州市人民医院收治的120例ARDS患者作为研究对象。收集患者的性别、年龄、体重指数（BMI）、基础疾病、病因以及心率（HR）、呼吸频率（RR）、氧合指数（OI）、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）和急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHEⅡ）等基线值，根据住院期间生存情况分为存活组和死亡组，根据OI分为轻中度组（OI>100 mmHg，1 mmHg＝0.133 kPa）和重度组（OI≤100 mmHg）。采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测血浆miR-30b-5p表达，并测定EVLWI。绘制受试者工作特征曲线（ROC），分析血浆miR-30b-5p及EVLWI预测ARDS患者死亡的价值；用Pearson相关法分析住院期间不同预后ARDS患者血浆miR-30b-5p与EVLWI的相关性。结果120例ARDS患者均纳入分析，死亡组42例，存活组78例；轻中度组67例，重度组53例。死亡组患者APACHEⅡ评分高于存活组，但两组性别、年龄、BMI、基础疾病、病因及HR、RR、OI和PaCO2基线值比较差异均无统计学意义。死亡组患者血浆miR-30b-5p表达水平及EVLWI均明显高于存活组〔miR-30b-5p（2-ΔΔCt）：2.28±0.74比0.52±0.06，EVLWI（mL/kg）：15.38±4.60比10.24±2.15，均P<0.01〕。重度组血浆miR-30b-5p表达水平、EVLWI及住院病死率均明显高于轻中度组〔miR-30b-5p（2-ΔΔCt）：2.05±0.65比0.93±0.17，EVLWI（mL/kg）：14.65±4.20比11.36±2.28，住院病死率：58.5%（31/53）比16.4%（11/67），均P<0.01〕。ROC曲线分析显示，血浆miR-30b-5p及EVLWI预测ARDS患者住院期间死亡的最佳截断值分别为1.62和13.28 mL/kg，两项指标联合预测的ROC曲线下面积（AUC）明显高于二者单独预测（0.897比0.827和0.785），且联合预测的敏感度和特异度均较高，分别为90.5%和84.2%。Pearson相关分析显示，ARDS死亡患者血浆miR-30b-5p与EVLWI呈显著正相关（r＝0.768，P<0.01）；而存活者二者无明显相关性（r＝0.118，P>0.05）。结论血浆miR-30b-5p和EVLWI与ARDS患者病情严重程度及预后相关，二者联合对ARDS患者预后具有一定评估价值。

简介：摘要目的观察微小RNA(miRNA，miR)-98-5p靶向高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响并探讨其作用机制。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GES-1、BGC-823、SGC-7901、MGC-803细胞(购自中国科学院上海细胞库和ATCC细胞库)中miR-98-5p的mRNA表达水平；构建绿色荧光蛋白(GFP)-NC和GFP-miR-98-5p慢病毒稳定细胞株，采用生物信息学和双荧光素酶报告基因验证miR-98-5p和HMGA2的靶向关系；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中HMGA2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达；采用Transwell检测细胞的侵袭能力。组间比较采用t检验，计数资料采用率(%)表示，组间比较采用χ2检验。结果与GES-1细胞(1.94±0.16)比较，BGC-823(0.41±0.03)、SGC-7901(0.53±0.05)、MGC-803(0.50±0.04)细胞中miR-98-5p的mRNA相对表达水平下降，差异有统计学意义(t＝7.437、6.288、6.305，P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示，与GFP-NC细胞比较(1.77±0.12)，转染HMGA2-WT后GFP-miR-98-5p细胞(0.42±0.05)的相对荧光素酶活性下调(t＝6.701，P<0.05)，差异有统计学意义。Western blot结果显示，GFP-NC、GFP-miR-98-5p、GFP-miR-98-5p＋pcDNA和GFP-miR-98-5p＋HMGA2细胞中HMGA2的表达水平分别为2.15±0.17、0.44±0.05、0.46±0.04、2.30±0.19；Vimentin的表达水平分别为1.85±0.13、0.47±0.04、0.45±0.05、1.39±0.09；E-cadherin的表达水平分别为0.36±0.03、1.60±0.11、1.65±0.10、0.72±0.05。与GFP-NC细胞比较，miR-98-5p过表达细胞中HMGA2和Vimentin的表达下降，E-cadherin的表达增加(t＝8.032、7.981、8.692，P<0.05)，差异有统计学意义；Transwell结果显示，与GFP-NC细胞[(88.17±9.16)个]比较，GFP-miR-98-5p细胞[(33.34±5.53)个]的侵袭个数下降(t＝4.231，P<0.05)，差异有统计学意义；与GFP-miR-98-5p细胞[(34.66±5.39)个]比较，GFP-miR-98-5p＋HMGA2细胞[(62.51±7.03)个]的侵袭个数上调(t＝3.858，P<0.05)，差异有统计学意义。结论miR-98-5p在胃癌细胞中低表达，miR-98-5p过表达可通过靶向HMGA2抑制胃癌细胞的EMT，从而抑制肿瘤的侵袭和转移。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA((lncRNA)LBX2-AS1靶向调控微小RNA(miRNA，miR)-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2017年10月至2018年12月郑州大学第一附属医院收集的骨肉瘤组织与瘤旁组织中LBX2-AS1、miR-491-5p的表达量。选取人骨肉瘤细胞U2OS为研究对象，按照数字表法随机分为4组：si-NC组(转染si-NC)、si-LBX2-AS1组(转染si-LBX2-AS1)、si-LBX2-AS1＋anti-miR-NC组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-NC)、si-LBX2-AS1＋anti-miR-491-5p组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p)，分别将si-NC、si-LBX2-AS1、si-LBX2-AS1与anti-miR-NC、si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p转染至U2OS细胞。噻唑蓝(MTT)检测细胞存活率；应用流式细胞仪检测细胞周期；流式细胞术检测细胞凋亡率；双荧光素酶报告实验验证LBX2-AS1与miR-491-5p的靶向关系；蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、p21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达量。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果瘤旁组织与骨肉瘤组织组织中LBX2-AS1的表达量分别为(1.01±0.10)、(3.56±0.35)，miR-491-5p的表达量分别为(1.02±0.10)、(0.16±0.02)，与瘤旁组织比较，骨肉瘤组织中LBX2-AS1的表达水平显著升高(t＝35.027，P<0.05)，miR-491-5p的表达水平显著降低(t＝42.165，P<0.05)，差异均有统计学意义；si-NC组与si-LBX2-AS1组细胞存活率分别为(100.02±10.00)%、(55.67±5.54)%，G1期比例分别为(38.51±2.55)%、(52.27±4.68)%，S期比例分别为(30.10±2.14)%、(15.36±1.26)%，细胞凋亡率分别为(8.28±0.92)%、(24.11±2.37)%，与si-NC组比较，si-LBX2-AS1组细胞存活率显著降低(t＝11.638，P<0.05)，细胞周期G1期比例明显升高(t＝7.745，P<0.05)，S期比例明显降低(t＝17.806，P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(t＝18.680，P<0.05)，Cyclin D1表达量显著降低(t＝20.871，P<0.05)，p21、Caspase-3表达量显著升高(t＝22.687，P<0.05；t＝20.871，P<0.05)，差异均有统计学意义；双荧光素酶报告实验证实LBX2-AS1能够靶向结合miR-491-5p；抑制miR-491-5p表达能减弱抑制LBX2-AS1表达对U2OS细胞增殖的抑制作用，还能减弱抑制LBX2-AS1表达对U2OS细胞凋亡的促进作用。结论lncRNA LBX2-AS1通过调控miR-491-5p从而促进骨肉瘤细胞增殖，抑制细胞凋亡。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-518c-5p调控结直肠癌细胞HT-29细胞凋亡的机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测人结直肠癌细胞和人正常结直肠细胞中miR-518c-5p的表达量。通过过表达或敲低miR-518c-5p，检测结直肠癌细胞HT-29的凋亡水平。通过TargetScan和荧光素酶报告试验筛选miR-518c-5p的靶标并验证。通过敲低聚嘧啶束结合蛋白1(PTBP1)或跨膜蛋白61(TMEM61)，检测结直肠癌细胞HT-29的凋亡水平。敲低miR-518c-5p和PTBP1或过表达miR-518c-5p和PTBP1，检测结直肠癌细胞HT-29的凋亡水平。采用Student’s t检验分析。结果miR-518c-5p在结直肠癌细胞HCT116(0.94±0.23)，HT29(2.41±0.40)，RKO(0.84±0.22)，COLO-678(1.04±0.33)，C2BBe1(1.45±0.41)，GP2d(0.97±0.30)中的表达量均低于正常结直肠细胞NCM460[(0.32±0.05)%，F＝14.010，P<0.01]，差异均有统计学意义。过表达miR-518c-5p[(2.40±0.36)%比(4.14±1.01)%，t＝2.811，P<0.05]，HT-29d的凋亡率显著增加[(0.22±0.07)%比(0.77±0.22)%，t＝4.126，P<0.05]；敲低miR-518c-5p[(2.51±0.70)%比(0.45±0.11)%，t＝5.011，P<0.05]；HT-29d的凋亡率显著降低[(0.20±0.10)%比(0.10±0.03)%，t＝2.970，P<0.05]；敲低PTBP1后，HT-29d的凋亡水平上升[(0.23±0.04)%比(0.67±0.03)%，t＝15.240，P<0.05]；但是，敲低TMEM61后，HT-29d的凋亡水平差异无统计学意义[(0.24±0.04)%比(0.26±0.01)%，t＝0.840，P>0.05]。过表达miR-518c-5p(2.31±0.30比4.02±1.01，t＝2.828，P<0.05]和PTBP1后，HT-29d的凋亡水平差异无统计学意义[(0.24±0.08)%比(0.23±0.04)%，t＝0.194，P>0.05]；敲低miR-518c-5p[(2.40±0.70)%比(0.38±0.09)%，t＝4.975，P<0.05]和PTBP1后，发现HT-29d的凋亡水平差异无统计学意义[(0.21±0.07)%比(0.25±0.09)%，t＝0.608，P>0.05]。结论miR-518c-5p能够通过靶向PTBP1 mRNA的3’端非编码区(3’UTR)来减少PTBP1的表达，以达到促进结直肠癌细胞HT-29凋亡的目的。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-519靶向ATP结合盒转运体G1(ABCG1)对乳腺癌细胞吉西他滨耐药性的影响。方法选取2015年6月到2018年6月来焦作市人民医院接受治疗的乳腺癌患者148例。根据患者对吉西他滨化疗敏感性分为敏感组和耐药组。荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析两组乳腺癌组织中miR-519表达水平。构建miR-519或对照miRNA过表达慢病毒载体，包装慢病毒，感染MCF-7乳腺癌细胞，构建miR-519(miR-519组)和对照组细胞株(miRNA对照组)。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法分析miR-519组和miRNA对照组细胞对吉西他滨的敏感性。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-519的靶基因；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-519对靶基因表达的影响。组间数据比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。结果与吉西他滨敏感组(1.21±0.23)比较，耐药组患者肿瘤组织中miR-519 mRNA表达水平(0.30±0.12)明显下降，差异有统计学意义(t＝3.091，P<0.05)。CCK-8结果显示，miR-519组和miRNA对照组细胞增殖能力(1.76±0.23比1.65±0.26)比较差异无统计学意义(t＝0.691，P>0.05)。经吉西他滨处理后，miR-519组细胞增殖能力(0.68±0.19)较miRNA对照组细胞(1.12±0.22)明显下降，差异有统计学意义(t＝2.819，P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示ABCG1是miR-519靶基因。耐药组肿瘤组织中ABCG1蛋白表达水平(1.65±0.25)明显高于敏感组肿瘤组织(0.84±0.19)，差异有统计学意义(t＝2.619，P<0.05)。miR-519组细胞ABCG1蛋白表达水平(0.34±0.11)较miRNA对照组细胞(1.43±0.24)明显增加，差异有统计学意义(t＝3.014，P<0.05)。结论miR-519可能通过ABCG1调控乳腺癌对吉西他滨的敏感性。

简介：摘要目的观察微小RNA(miRNA，miR)-182通过靶向特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白2(SATB2)基因对结直肠癌细胞增殖迁移的作用，探讨其对SATB2/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nox4)通路的调节机制。方法对数期生长人结肠癌细胞(HT-29)细胞，采用脂质体转染法将si-miR-182、Control-si转至HT-29细胞，分别设为Si-miR-182组、N-miR-182组，另取不做任何处理细胞为对照组。测定3组细胞中miR-182基因表达、增殖和迁移、SATB2、nox4、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA和蛋白表达。重复计量资料比较采用重复测量方差分析，两两样本比较采用LSD-t检验。结果Si-miR-182组miR-182基因相对表达量(0.35±0.05)低于对照组(1.24±0.26)和N-miR-182组(1.20±0.25)，差异均有统计学意义(t＝7.517、7.455，P<0.05)；Si-miR-182组培养24、48、72 h MTT试验吸光度(A)值均低于对照组和N-miR-182组，差异均有统计学意义(24 h：t＝2.667、2.664；48 h：t＝4.559、4.524；72 h：t＝7.257、6.981；P<0.05)；与培养24 h比较，3组培养48、72 h MTT试验A值均升高(48 h：t＝5.507、5.092、3.741；72 h：t＝11.330、10.637、9.229；P<0.05)，且72 h MTT试验A值高于48 h，差异均有统计学意义(t＝7.411、6.941、5.214，P<0.05)。Si-miR-182组细胞迁移率[(53.90±3.19)%]低于对照组[(81.66±5.92)%]和N-miR-182组[(80.35±5.40)%]，差异均有统计学意义(t＝9.231、9.430，P<0.05)；Si-miR-182组细胞SATB2、E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和N-miR-182组(SATB2：t＝10.930、11.158；E-cadherin：t＝9.288、9.369；P<0.05)，nox4、Vimentin mRNA和蛋白相对表达量低于对照组和N-miR-182组，差异均有统计学意义(nox4：t＝8.955、7.590；Vimentin：t＝6.543、6.644；P<0.05)。结论沉默miR-182基因可显著抑制结直肠癌细胞增殖及迁移能力，可能通过激活SATB2、E-cadherin的表达、抑制nox4、Vimentin的表达、参与SATB2/nox4通路共同调控。

简介：摘要目的探讨微小RNA-140-5p（miR-140-5p）在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）中的表达及其在ESCC细胞增殖和侵袭中的作用。方法即时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，qPCR）分析ESCC组织和细胞样本中miR-140-5p的表达。将阴性对照和miR-140-5p类似物转染Eca109和KYSE70细胞，细胞增殖与活性检测试剂盒（CCK-8）和Transwell分别检测转染后细胞的增殖和侵袭能力的变化，双荧光素酶报告实验证实miR-140-5p与葡萄糖转运蛋白1（Glut1）的相互作用，Western blot用来检测转染后Glut1蛋白的表达。结果GEO数据分析结果表明，ESCC组织中miR-140-5p的表达水平显著低于正常组织，差异均具有统计学意义（P<0.01）。qPCR结果显示，ESCC组织和细胞中miR-140-5p的表达均显著低于正常组织和正常食管上皮细胞Het-1A，差异均具有统计学意义（P<0.01）。miR-140-5p的表达与ESCC患者肿瘤的分化程度、TNM分期和淋巴结转移均密切相关，高表达miR-140-5p的ESCC患者生存率显著高于低表达患者，差异具有统计学意义（P<0.05）。miR-140-5p类似物显著上调Eca109和KYSE70细胞中miR-140-5p的表达，其表达上调显著抑制Eca109和KYSE70细胞的增殖和侵袭能力。双荧光素酶报告实验结果表明，Glut1是ESCC细胞中miR-140-5p的直接作用靶点，其在ESCC组织中表达显著上调，其与miR-140-5p表达呈负相关关系，miR-140-5p类似物显著抑制Eca109和KYSE70细胞中Glut1蛋白的表达。结论miR-140-5p在ESCC的发生发展中发挥重要作用，靶向miR-140-5p/Glut1可能成为ESCC患者新的治疗策略。

简介：摘要目的探讨宫腔镜冷刀技术通过调控微小RNA（miR）-29b的表达对宫腔粘连患者的治疗效果和术后炎性反应的影响。方法回顾性分析浙江省医疗健康集团杭州医院2018年1—12月收治的166例宫腔粘连患者的临床资料，其中行宫腔镜冷刀技术治疗83例（冷刀组），行宫腔镜下电切手术治疗83例（电切组）。比较两组手术时间、住院时间。于术后3个月随访，观察患者月经量改变情况，并行宫腔镜复查，观察宫腔内形态变化情况，评估疗效；检测子宫内膜组织白细胞介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α、C反应蛋白（CRP）和miR-29b相对表达量。结果冷刀组手术时间和住院时间明显短于电切组[（20.01 ± 1.93）min比（26.46 ± 2.25）min和（3.84 ± 1.43）d比（5.01 ± 1.18）d]，差异有统计学意义（t=12.134和4.051，P<0.05）。冷刀组月经量和宫腔内形态疗效均明显优于电切组，差异有统计学意义（P<0.05）。冷刀组术后3个月IL-4和miR-29b明显高于电切组[（33.54 ± 5.61）mmol/L比（21.34 ± 3.62）mmol/L和1.59 ± 0.42比1.16 ± 0.31]，IL-8、TNF-ɑ、CRP明显低于电切组[（18.23 ± 3.67）mmol/L比（31.59 ± 7.20）mmol/L、（9.41 ± 1.41）mmol/L比（12.64 ± 2.24）mmol/L和（7.58 ± 1.59）mg/L比（11.06 ± 2.15）mg/L]，差异有统计学意义（P<0.01）。Pearson相关分析结果显示，IL-4与miR-29b呈正相关（r=0.438，P<0.01），IL-8和TNF-ɑ与miR-29b呈负相关（r=- 0.295和- 0.377，P<0.01）。结论宫腔镜冷刀技术可缩短宫腔粘连患者手术时间和住院时间，通过促进miR-29b和抑炎因子的表达，抑制炎性反应，明显提高疗效。

简介：摘要目的探讨miR-224在脂多糖(LPS)诱导的肺微血管内皮细胞(PMVEC)损伤中的作用及机制。方法分离清洁级BALB/c小鼠(购自浙江大学实验动物中心)原代PMVEC并体外培养，使用1.0 mg/L LPS处理PMVEC以诱导细胞损伤。通过转染miR-224抑制序列或p21的小干扰RNA(siRNA)序列分别下调PMVEC的微小RNA-224(miR-224)及p21表达水平。采用细胞计数试剂盒法及流式细胞仪检测PMVEC的细胞活力变化及凋亡率变化。实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测PMVEC的miR-224及p21表达水平。使用双荧光素酶报告实验分析miR-224及p21的靶向关系。两组间的均数比较采用t检验，多组间的均数两两比较在采用单因素方差分析基础上使用最小显著差异法(LSD)检验。结果与未经任何处理的PMVEC比较，LPS处理后细胞相对细胞活力降低至(42.333±7.586)%，凋亡率提高至(32.141±2.449)%，miR-224表达增加至1.791±0.167，p21 mRNA水平降低至0.527±0.058，以上差异有统计学意义(t＝8.532、7.261、7.113及8.467，P值均<0.01)。与单纯LPS处理的细胞比较，miR-224下调的细胞在LPS处理后的相对细胞活力增加且凋亡率显著降低，差异有统计学意义(F＝62.618、32.643，P<0.01)。抑制p21表达会消除miR-224下调带来的这种保护作用。结论miR-224可能通过靶向抑制p21参与调控LPS诱导的PMVEC损伤。抑制miR-224可能有助于脓毒症后急性肺损伤或急性呼吸窘迫综合征的防治。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因1(lncRNA SNHG1)靶向微小RNA-16(miR-16)对人骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法将BMSCs(购自上海泽叶生物科技有限公司)进行体外培养，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测BMSCs成骨诱导前后SNHG1和miR-16的表达水平。将BMSCs分为正常组、诱导分化组、si-con组、si-SNHG1组、miR-con组、miR-16组、si-SNHG1＋anti-miR-con组和si-SNHG1＋anti-miR-16组。蛋白质印记(Western blot)检测碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证SNHG1和miR-16的靶向调控关系。两组间数据比较采用独立样本t检验，多组间数据比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果与正常组比较，诱导分化组BMSCs细胞SNHG1(0.64±0.12比1.00±0.08，t＝1.323，P<0.05)的表达水平显著降低，miR-16(4.54±0.84比1.00±0.11，t＝7.238，P<0.01)的表达水平显著升高。与si-con组比较，si-SNHG1组BMSCs中ALP(0.61±0.06比0.41±0.05，t＝4.435，P<0.05)、Runx2(1.25±0.13比0.79±0.09，t＝5.039，P<0.01)、OPN(0.94±0.08比0.41±0.06，t＝9.180，P<0.01)蛋白表达显著升高。与miR-con组比较，miR-16组BMSCs中ALP(0.63±0.06比0.40±0.04，t＝5.524，P<0.01)、Runx2(1.04±0.09比0.69±0.07，t＝5.317，P<0.01)、OPN(0.98±0.11比0.51±0.08，t＝5.985，P<0.01)蛋白表达显著升高。与si-SNHG1＋anti-miR-con组比较，si-SNHG1＋anti-miR-16组BMSCs中ALP(0.52±0.04比0.66±0.06，t＝3.363，P<0.05)、Runx2(0.89±0.07比1.08±0.09，t＝2.886，P<0.05)、OPN(0.71±0.08比0.98±0.11，t＝3.438，P<0.05)蛋白表达显著降低。miR-16是SNHG1的靶基因，SNHG1可负性调控miR-16表达。结论lncRNA SNHG1通过靶向miR-16可抑制BMSCs成骨分化。

简介：摘要急性髓细胞白血病(AML)是一种具有高度异质性的血液系统恶性肿瘤，大部分AML成年患者经治疗可达到完全缓解(CR)，然而相当一部分患者在3～5年内复发。由于微小残留病(MRD)与AML患者复发风险增加，以及生存期缩短有关，因此需要通过有效手段对AML患者进行治疗后MRD监测。多参数流式细胞术(MFC)是一种基于白血病相关免疫表型(LAIP)的MRD检测方法，具有高灵敏度、高性价比，以及实时、快速等优点，适用于绝大部分AML患者，被广泛应用于临床实践中。笔者拟就目前应用MFC监测AML患者MRD的原理及策略、优势及临床意义、面临的挑战及其临床应用的促进方法等进行综述。

简介：摘要目的比较超声引导下细针抽吸细胞学(US-FNAB)与粗针穿刺组织学(US-CNA)在甲状腺微小结节诊断中的应用效果。方法回顾性分析商丘市第一人民医院2017年10月至2019年10月经超声怀疑为恶性甲状腺微小结节102例患者的临床资料，依据穿刺方式不同将其分为US-CNA组(47例)和US-NFAB组(55例)，记录两组手术病理结果，比较两组取材情况、术后出血情况，并分析US-CNA和US-NFAB鉴别良恶性甲状腺结节的诊断效能。结果经手术病理证实，102例甲状腺微小结节患者中恶性结节85例，良性结节17例，其中US-CNA组恶性结节40例，良性结节7例，US-NFAB组恶性结节45例，良性结节10例；US-NFAB组取材细胞量少发生率显著US-CNA组(P<0.05)，US-NFAB组取材细胞量多的成功率高于US-CNA组(P<0.05)；US-NFAB组术后出血情况的等级资料显著优于US-CNA组(P<0.05)；以手术病理证实结果为金标准，US-CNA鉴别良恶性甲状腺微小结节的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及诊断精确率分别为87.50%、85.71%、97.22%、54.55%及87.23%，US-NFAB鉴别良恶性甲状腺微小结节的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及诊断精确率分别为93.33%、90.00%、97.67%、75.00%及92.73%。结论US-FNAB在鉴别良恶性甲状腺微小结节诊断价值高，且具有取材成功率高和术后出血情况少等优势。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA CDKN2BAS(lncRNA CDKN2BAS)是否通过靶向微小RNA(miRNA，miR)-98-5p影响骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测成骨细胞hFOB1.19(购自上海通派生物科技有限公司)与骨肉瘤细胞U2-OS、SOSP-9607、Saos-2、SJSA-1(购自美国典型菌种保藏中心)中CDKN2BAS、miR-98-5p的表达水平；按照随机数字表法随机分组为si-con组、si-CDKN2BAS组、miR-con组、miR-98-5p组、si-CDKN2BAS＋anti-miR-con组、si-CDKN2BAS ＋anti-miR-98-5p组，噻唑蓝(MTT)法检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞增殖活力的影响；流式细胞术检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞凋亡能力的影响；Transwell小室实验检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞迁移及侵袭能力的影响；双荧光素酶报告实验检测CDKN2BAS是否靶向miR-98-5p；蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞核增殖抗原(Ki-67)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、p21、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3、Cleaved Caspase-9、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38 MAPK)的表达量。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果hFOB1.19细胞与骨肉瘤细胞U2-OS、SOSP-9607、Saos-2、SJSA-1中CDKN2BAS的表达水平分别为1.05±0.28、4.26±0.42、3.65±0.56、4.02±0.46、3.75±0.41，miR-98-5p的表达水平分别为0.98±0.06、0.41±0.05、0.64±0.07、0.57±0.06、0.47±0.05，与hFOB1.19细胞比，骨肉瘤细胞株中CDKN2BAS表达明显上调(F＝80.889，P<0.05)，miR-98-5p表达明显下调(F＝130.868，P<0.05)，差异均有统计学意义；沉默CDKN2BAS与过表达miR-98-5p后骨肉瘤细胞存活率分别为(68.57±8.63)%、(64.68±7.24)%，迁移细胞数分别为(98.43±11.51)、(93.46±12.54)个，侵袭细胞数分别为(47.93±6.84)、(38.64±6.69)个，沉默CDKN2BAS与过表达miR-98-5p后骨肉瘤细胞增殖活力明显降低(F＝37.873、60.131，P<0.05)，细胞迁移及侵袭能力明显减弱(F＝159.281、189.097，167.638、302.502，P<0.05)，Ki-67、MMP-2、MMP-9、p-p38 MAPK蛋白表达水平明显降低(F＝101.455、161.465、196.590、149.229、157.759、55.555，P<0.05)，而细胞凋亡率明显升高(F＝260.694、270.939，P<0.05)，p21、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平明显升高(F＝88.672、448.342、202.034、118.338、121.661、290.273，P<0.05)，差异均有统计学意义；双荧光素酶报告实验证实CDKN2BAS靶向抑制miR-98-5p的表达；与si-CDKN2BAS＋anti-miR-con组比较，si-CDKN2BAS＋anti-miR-98-5p组细胞增殖、迁移、侵袭能力明显增强(t＝4.546、10.682、5.648，P<0.05)，细胞凋亡能力明显减弱(t＝6.996，P<0.05)，差异均有统计学意义。结论lncRNA CDKN2BAS通过靶向负调控miR-98-5p的表达影响骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力。

简介：摘要目的探讨LINC01133/微小RNA(miRNA，miR)-205/谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)轴对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法收集河南省人民医院2018年1月到2020年1月手术摘除的129例乳腺癌和癌旁组织，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析LINC01133和miR-205表达水平；在MCF-7细胞建立LINC01133过表达和miR-205沉默细胞系，分别作为LINC01133组、lncRNA对照组、miR-205 KD组和miR对照组。分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析细胞增殖能力，采用Transwell分析细胞迁移能力；采用生物信息学分析LINC01133和miR-205关系及其靶蛋白；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析靶蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果与癌旁组织LINC01133表达水平(1.12±0.15)比较，乳腺癌组织中LINC01133表达水平(0.57±0.10)显著下调，差异有统计学意义(t＝3.011，P<0.05)。与lncRNA对照组细胞LINC01133表达水平(1.05±0.11)比较，LINC01133组细胞LINC01133表达水平(2.48±0.21)显著增加，差异有统计学意义(t＝4.108，P<0.05)。与lncRNA对照组细胞吸光度值(2.29±0.20)比较，LINC01133组细胞吸光度值(1.54±0.16)显著下降，差异有统计学意义(t＝3.025，P<0.05)。与lncRNA对照组细胞迁移数量[(80.71±8.19)个]比较，LINC01133组细胞迁移数量[(43.77±6.47)个]显著下降，差异有统计学意义(t＝2.810，P<0.05)。生物信息分析显示LINC01133的靶miRNA是miR-205，miR-205的靶基因是GPX3，miR-205与GPX3 mRNA 3’端非编码区(3’UTR)区域存在碱基互补。与lncRNA对照组细胞GPX3蛋白表达水平(0.28±0.10)比较，LINC01133组细胞中GPX3蛋白表达水平(1.08±0.22)显著增加，差异有统计学意义(t＝2.791，P<0.05)。与miRNA对照组细胞GPX3蛋白表达水平(0.58±0.16)比较，miR-205 KD组细胞GPX3蛋白表达水平(1.98±0.24)显著增加，差异有统计学意义(t＝3.019，P<0.05)。结论LINC01133在乳腺癌中呈低表达，通过miR-205/GPX3轴参与乳腺癌的增殖和迁移。

简介：摘要目的在伴有桥本氏甲状腺炎(HT)合并甲状腺乳头状微小癌(PTMC)患者中，探讨结合血清甲状腺抗体检测结果构建筛选伴中央区淋巴结转移的风险预测模型。方法回顾性分析2016年9月至2020年4月于本院普外科行手术治疗的174例于本院行手术治疗的甲状腺乳头状微小癌合并桥本氏甲状腺炎患者，根据是否存在颈部中央区淋巴结转移(CLNM)分成转移组和未转移组。通过对临床病理学特征以及术前血清甲状腺素水平和甲状腺抗体水平的4种不同状态(TPOAb单阳性、TgAb单阳性、双阳性、双阴性)进行单因素和多因素统计学分析判定出独立危险因素，并基于独立危险因素行二元Logistic回归分析构建出预测模型。同时予以ROC曲线评估预测模型诊断价值。结果性别(χ2＝4.999，P<0.05)，年龄(χ2＝4.756，P<0.05)，肿瘤大小(χ2＝7.918，P<0.05)，肿瘤单/多灶(χ2＝13.494，P<0.05)，是否双侧同时可见肿瘤(χ2＝10.754，P<0.05)，有无包膜侵犯(χ2＝4.075，P<0.05)，术前血清甲状腺抗体水平差异(χ2＝10.104，P<0.05)与PTMC合并HT发生CLNM呈明显相关性。二元Logistic回归多因素分析显示：男性，年龄<45岁，肿瘤最大径>0.5 cm，肿瘤多灶性，肿瘤同时位于双侧，血清甲状腺抗体水平状态(TgAb单阳性、双阳性、双阴性)均可作为PTMC合并HT发生CLNM独立危险因素(P<0.05)。基于这些独立危险因素的权重构建12分制预测模型。其最佳临界值为4.25分，预测PTMC合并HT患者中CLNM灵敏度为77.5%，特异度为84.0%。结论结合血清甲状腺抗体水平建立的预测模型可以较为准确筛选出需要实施中央区淋巴结清扫(CLND)的PTMC合并HT者，同时筛除不需要行CLND的患者，减少术后并发症的发生率。

简介：摘要目的探讨微小RNA（miR）-216a-5p在妊娠期糖尿病（GDM）患者胎盘中的表达及其对滋养层HTR-8/SVneo细胞侵袭、迁移的影响及可能机制。方法收集2018年10月至2019年10月烟台市烟台山医院的28例GDM孕妇（GDM组）和28例正常孕妇（对照组）胎盘组织，将体外培养HTR-8/SVneo细胞分为空白组（正常培养）、模拟物（mimics）-NC组（转染mimics-NC）和miR-216a-5p mimics组（转染miR-216a-5p mimics），采用实时荧光定量PCR检测胎盘组织和各组HTR-8/SVneo细胞中miR-216a-5p表达水平，Transwell实验检测各组HTR-8/SVneo细胞侵袭和迁移，免疫印迹法（Western blot）检测各组HTR-8/SVneo细胞中E-钙黏附蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、锌指E盒结合蛋白-1（ZEB1）和N-钙黏附分子（N-cadherin）蛋白表达，双荧光素酶报告基因实验检测miR-216a-5p和ZEB1的靶向关系。结果与对照组比较，miR-216a-5p在GDM组胎盘组织中表达明显升高（2.86±0.35 vs 0.96±0.07, P<0.05）；与mimics-NC组比较，miR-216a-5p mimics组细胞中miR-216a-5p和E-cadherin蛋白表达水平明显升高[（1.01±0.08）vs（22.48±3.26），（0.25±0.03）vs（0.68±0.05）]，而细胞侵袭、迁移能力和细胞中Vimentin、N-cadherin、ZEB1蛋白表达水平明显降低[（106.83±9.35）vs（59.16±5.28），（205.48±18.25）vs（87.32±6.50），（0.65±0.05）vs（0.35±0.02），（0.55±0.04）vs（0.32±0.03），（0.50±0.03）vs（0.36±0.02）]（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-216a-5p可与ZEB1靶向结合。结论miR-216a-5p在GDM患者胎盘组织中表达上调，可能通过靶向调控ZEB1表达抑制滋养层HTR-8/SVneo细胞转移。

简介：摘要目的探讨微小RNA-216a(miR-216a)在AP并发肺损伤患者中的表达水平及其对内皮细胞通透性的影响。方法收集2015年12月至2016年3月间海军军医大学第一附属医院消化内科收治的40例AP患者，根据患者是否并发急性肺损伤(ALI)，分为AP伴ALI组(AP-ALI组，13例)和AP不伴ALI组(AP组，27例)。以8名健康志愿者为对照组。抽血分离血浆并抽提RNA，采用RT-PCR法检测3组血浆miR-216a水平。使用外泌体抽提试剂盒提取血浆中的外泌体，并通过电镜观察进行外泌体鉴定。抽提外泌体RNA，检测外泌体中miR-216a的水平。将AP-ALI组患者血浆外泌体分别与人脐静脉内皮细胞(HUVEC，AP-ALI-HUVEC组)、转染anti-miR-216a的HUVEC(AP-ALI-anti-miR-216a HUVEC组)共培养24 h，以未做任何处理的HUVEC作为对照组，用Millicell ERS-2上皮伏特欧姆计测量3组跨内皮细胞电阻，以表示其通透性。结果AP-ALI组血浆miR-216a水平为14.45±1.64，显著高于AP组的11.08±1.60和对照组的5.37±1.54，差异有统计学意义(P值均<0.01)。电镜下可见血浆外泌体呈杯状膜泡样，大小50～90 nm。AP-ALI组血浆外泌体miR-216a水平为14.03±1.58，显著高于AP组的10.86±1.31和对照组的5.01±0.79，差异有统计学意义(P值均<0.01)。以对照组HUVEC细胞的电阻值为1，AP-ALI-HUVEC组跨内皮细胞的电阻比值显著低于AP-ALI-anti-miR-216a HUVEC组(0.74±0.04比1.02±0.08)，差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-216a水平在AP并发ALI患者血浆外泌体中显著增加。miR-216a可增加HUVEC细胞的通透性，可能与AP时肺损伤的发生相关。