简介:摘要目的筛选肠道病毒71型(EV71)中和表位,确定诱导机体免疫应答的特定最短氨基酸基序,为合成肽疫苗研发提供理论依据。方法利用噬菌体随机十二肽库淘选EV71中和抗体特异性结合克隆并测序,推导出中和表位的关键序列。合成含有关键序列且N端乙酰化(AC)和C端连接血蓝蛋白(KLH)的系列肽段,免疫小鼠后收集血清,经Western blot、ELISA和中和试验验证肽段的免疫原性以及免疫后血清的中和活性。结果经过3轮淘选和克隆测序后,分析确定关键基序为KQEKDL。Western blot结果表明修饰后的含关键基序的系列肽段免疫小鼠获得的血清与EV71和VP1蛋白均有不同程度结合。ELISA结果表明仅含有最短关键基序的合成肽段(AC-KQEKDL-KLH)免疫后血清对其余3条肽段及EV71的反应最强。中和试验结果表明该肽段免疫后血清的中和效价也最高。结论利用噬菌体随机肽库技术成功筛选出EV71中和表位,确定KQEKDL关键基序可能是诱导机体免疫应答的特定最短氨基酸序列,为了解免疫应答机制、免疫原性评价及多肽疫苗的研发提供理论依据。
简介:目的观察醒脑静联合门冬氨酸鸟氨酸及支链氨基酸治疗肝性脑病(HE)的疗效。方法将84例HE患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,每组42例。2组予常规治疗+门冬氨酸鸟氨酸及支链氨基酸;治疗组在此基础上加用醒脑静注射液。观察2组治疗前、治疗7d血氨(NH3)总胆红素(TBiL)、谷丙转氨酶(ALT)变化;测试数字连接试验(NCT)及数字符号试验(DS),比较2组神志清醒时间和治疗总有效率。结果2组治疗7d后NH3、TBiL、ALT、NCT、DS较治疗前均有明显改善(P〈0.05),且治疗组较对照组改善更明显(P〈0.05)。治疗组神志清醒时间、总有效率亦明显高于对照组(P〈0.05)。结论醒脑静联合门冬氨酸鸟氨酸及支链氨基酸治疗HE可以显著降低血氨水平,保护肝功能及改善认知功能,疗效确切。
简介:为从小分子角度了解蝎子发挥营养及药用功效的物质基础,采用甲基叔丁基醚-甲醇-水体系提取样品,分别通过提取溶剂体系的上层有机相富集全蝎中的疏水化合物,下层水相提取极性小分子。提取物经气相色谱-质谱分析,在非极性组分中检测到30种脂肪酸,70%以上为不饱和脂肪酸;在其极性组分中检测到氨基酸类、有机酸类及糖类等化合物,以氨基酸类化合物为主,占总极性化合物50%以上。这些具有多种生物活性及营养价值的不饱和脂肪酸、氨基酸可能是全蝎发挥药效及食疗作用的物质基础。与文献报道全蝎中脂肪酸组成以饱和脂肪酸为主不同,检测到的脂肪酸主要是油酸和cis-9,cis-12-亚油酸,其次为棕榈酸和硬脂酸。在全蝎中发现的游离氨基酸共有13种蛋白质氨基酸和3种非蛋白质氨基酸,包括7种必需氨基酸(赖氨酸除外)和6种药效氨基酸。该工作为进一步研究全蝎的药用及食用价值提供了物质基础。
简介:本文探讨了牙本质龋损中胶原蛋白的变化持点,为临床牙本质龋的预防与治疗提供参考依据.实验采用氨基酸自动分析仪测量正常和二层龋坏牙本质龋胶原蛋白中18种氨基酸含量,结果表明:(1)正常与内层龋坏牙本质胶原蛋白中18种氨基酸含量无明显差别(P>0.05).(2)外层龋坏牙本质胶原蛋白除甘氨酸明显增高外,其余氨基酸含量明显低于正常及龋坏内层牙本质中的胶原蛋白(P<0.05).说明牙本质发生龋损时,内层龋坏牙本质中的胶原蛋白在其氨基酸含量及构成比上无显著改变,同正常牙本质胶原蛋白-样为Ⅰ型胶原;而外层龋坏牙本质中的胶原蛋白则发生了明显变化,非Ⅰ型胶原.本文研究结果同时也说明作为生命科学研究重要组成部分临床医学一个分支的口腔医学和分析仪器有着密切的关系,自动生化分析仪器氨基酸自动分析仪在口腔医学的研究中有看重要意义.
简介:摘要本研究利用液相色谱-质谱联用的方法对265例结直肠癌患者的外周血中氨基酸的代谢水平进行分析,结果表明结直肠癌患者中有淋巴结转移和无淋巴结转移患者之间18种血清氨基酸的代谢水平差异均有统计学意义(均P<0.05),而且利用筛选出的6种血清代谢物构建的诊断模型具有较高的诊断能力。这说明液相色谱-质谱联用的方法在预测结直肠癌的预后、个体化治疗及研究淋巴结转移机制方面具有一定的应用前景。
简介:摘要目的研究肠道病毒71型(enterovirus 71, EV71)中3D蛋白关键氨基酸突变对病毒增殖的影响,并根据3D三级结构模型推断突变影响病毒增殖能力的可能机制。方法以强毒株SDLY107构建的质粒pMD19T-SDLY107-EGFP为模板,利用定点突变和反向遗传学技术构建病毒突变株,对突变株增殖特性进行测定。同时对3D蛋白三级结构进行预测,根据3D蛋白的结构域功能特性推测突变影响病毒增殖能力的可能机制。结果经过双酶切鉴定和病毒基因测序证实已成功构建两株突变株病毒:EGFP-EV-A71(S37N)和EGFP-EV-A71(R142K)。两株突变株在RD细胞中的增殖速率均明显弱于亲本毒株。3D蛋白三级结构预测模型显示3D蛋白由"手指(finger)"、"拇指(thumb)"和"手掌(palm)"三个结构域构成握杯状右手结构,S37N位于"拇指"结构域,R142K位于"手指"结构域,而"拇指"和"手指"结构域对3D聚合酶的活性以及蛋白的稳定性具有重要影响。结论S37N和R142K突变降低了EV71的复制能力,这两个突变可能是通过改变3D蛋白聚合酶活性和结构域之间的相互作用,进而影响EV71病毒增殖。
简介:1病例报告患者,男,46岁,面颈躯干四肢中度烧伤入院治疗,2003年10月8日给予低分子右旋糖酐氨基酸注射液(长海长征富民药业公司,批号030623)250ml,vd.,在缓慢滴入5ml后,病人突然出现全身麻木,畏寒,
简介:摘要目的观察第四代高支链复方氨基酸-20AA注射液治疗肝硬化合并肝性脑病的疗效和安全性。方法49例肝硬化肝性脑病患者随机分成对照组23例、治疗组26例,两组均给予去除诱因,纠正电解质和酸碱平衡紊乱,乳果糖及保肝治疗。治疗组在对照组用药基础上加用复方氨基酸-20AA注射液500ml,每日一次,共用10d。监测治疗前后神志、karnofsky评分(KPS)、血氨、血清白蛋白(AIb)、丙氨酸转氨酶(ALT)及总胆红素(TBIL)变化。结果复方氨基酸-20AA注射液显著改善患者神志、karnofsky评分、血氨、ALT和TBIL,但血清AIb改善两组间无统计学意义。二组患者均未发现严重不良反应。结论第四代高支链复方氨基酸-20AA注射液治疗肝硬化合并肝性脑病安全、有效。
简介:摘要目的探讨PVL合并脑瘫患儿DTI、脑脊液氨基酸与肌张力的关系。方法选取脑MRI诊断为脑室周围白质软化症的患儿并肌张力为3、4的患儿15例作为病例组,同期选取10例脑MRI诊断为正常的小儿作为对照组,所用儿童用高效液相色谱一荧光法测定谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸含量,同时行MRI常规检查和DTI检查并测量FA值。结果①对照组脑脊液中谷氨酸、天门冬酸、甘氨酸分别为11.00±1.36umol/L、8.21±1.74umol/L、11.42±2.33umol/L,与对照组比较,病例组谷氨酸、天冬氨酸增高为13.05±1.70umol/L、13.05±1.70umol/L(P<0.05),甘氨酸降低为8.21±1.7433umol/L(P<0.05)。②线性相关分析发现PVL合并脑瘫患儿脑脊液中谷氨酸含量与肌张力呈等级正相关(r=0.66,P<0.05);甘氨酸、天冬氨酸的含量与肌张力无相关性;弥散张量成像中FA值与肌张力呈等级负相关(r=-0.598,P<0.05),较谷氨酸与肌张力相关性略降低。结论PVL合并脑瘫患儿弥散张量成像中FA值与肌张力略低于谷氨酸与患儿肌张力相关性,且DTI功能成像技术能够客观反映PVL合并脑瘫患儿肌张力变化,给临床医生提供一定的参考价值并有助于辅助临床医生进一步合理治疗等。
简介:摘要目的通过对早产儿应用不同剂量小儿氨基酸的观察,评价大剂量输注小儿氨基酸的疗效和安全性。方法将2010年1月1日至2011年7月1日出生24小时内体重为1000-2000g进入我院NICU接受静脉营养治疗的早产儿共168例,随机分为两组,治疗组85例采用早期高剂量小儿氨基酸静脉营养治疗,对照组83例采用传统静脉营养治疗。分析两组患儿在胎龄,性别,体重及其他综合治疗方面的比较,无统计学意义差异。观察两组患儿的回复出生体重时间,静脉营养治疗天数,住院时间,肝功能,肾功能指标。结果85例观察组患儿体重生长速率明显高于对照组;在回复出生体重时间,需要静脉营养支持时间,住院天数上明显少于对照组;在肝肾功能血气PH值的监测方面两组差异无统计学意义。结论目前提倡的在静脉营养治疗中早期给予大剂量的小儿氨基酸相对传统治疗来说是安全的,而且更具有优势性,是安全可行的静脉营养方法。
简介:摘要目的观察复方氨基酸脂质体营养敷料在促进肛肠病术后创面修复中的作用。方法自2015年3月至2015年5月,将肛肠病术后患者40例随机分为治疗组与对照组各20例,分别应用复方氨基酸脂质体营养敷料和龙珠软膏换药治疗,观察2组疗效。结果治疗组与对照组治愈率比较有统计学意义(P<0.05),治疗组疗效明显优于对照组。结论复方氨基酸脂质体营养敷料能明显减轻术后疼痛,减少创面渗出,促进术后创面愈合。
简介:目的:建立测定复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中有关物质含量的高效液相色谱法。方法:采用UltimateAQ-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以0.01mol·L^-1磷酸氢二铵溶液(pH2.0)-甲醇(98:2)为流动相,流速为0.7mL·min^-1,检测波长为205nm,进样量为50μL。结果:在选定的色谱条件下,环-(甘氨酰谷氨酰胺)峰、焦谷氨酸峰和环-(甘氨酰酪氨酸)峰与各自相邻色谱峰可以有效分离;环-(甘氨酰谷氨酰胺)、焦谷氨酸、环-(甘氨酰酪氨酸)分别在7.863~52.42μg·mL^-1、5.256-35.04μg·mL^-1、0.9393~6.262μg·mL^-1的范围内线性关系良好(r=0.9999);精密度试验的RSD值均小于0.2%;重复性试验的RSD值均小于2.0%;环.(甘氨酰谷氨酰胺)、焦谷氨酸和环-(甘氨酰酪氨酸)定量限分别为3.15、14.0和7.5ng,检测限分别为0.95、7.0和2.5ng;加样回收率分别为103.0%、101.5%和103.3%(n=9),RSD值分别为1.0%、0.9%和0.9%。9批样品环-(甘氨酰谷氨酰胺)的量为383~492mg·L^-1,焦谷氨酸的量为191~315mg·L^-1,环-(甘氨酰酪氨酸)的量为39~49mg·L^-1。结论:该方法专属性强,结果准确,可用于复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中有关物质的测定,能有效地反应药品质量。
简介:研究半夏生物总碱(PTA)对青霉素慢性点燃癫痫模型大鼠的对抗作用,以及对海马区谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、GABA和GABAA受体mRNA表达的影响,并探讨其抗癫痫机制。通过青霉素慢性点燃癫痫模型大鼠观察PTA对癫痫潜伏期、发作程度的影响;采用高效液相色谱法测定海马区谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、GABA的含量。同时用逆转录PCR技术来分析PTA对大脑GABA_A受体mRNA表达的影响。与正常对照组相比,模型对照组大鼠GABA和甘氨酸水平减少,谷氨酸和天冬氨酸水平增加,GABAA受体mRNA表达减少;而高、低剂量PTA均可以延长青霉素诱发癫痫的潜伏期,并能减轻其发作程度,同时可显著增加GABA以及GABA_A受体mRNA水平,减少谷氨酸的水平,而对甘氨酸和天冬氨酸无明显影响。总之,PTA对大鼠青霉素慢性点燃模型有对抗作用,它可以增加γ-氨基丁酸含量和GABAA受体mRNA水平,以及降低谷氨酸含量。