简介:目的探讨大鼠胰腺干细胞体外分离、纯化的实验条件及其定向分化潜能。方法应用胰腺原位灌注V型胶原酶消化大鼠胰腺组织,100目滤网滤过,Ficoll400浓度梯度离心法分离胰腺干细胞,采用添加表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(hFGF)的培养基行体外培养。运用荧光免疫染色法检测细胞表面CK-19、Fdx-1、Nestin、Insulin和Glucagon蛋白,计算阳性细胞率。双硫腙(DTZ)染色鉴定诱导分化后的细胞,光电酶标记法ELISA检测胰岛素分泌功能。结果本实验获取的胰腺干细胞,体外培养可稳定传代培养8代以上。细胞表面CK-19、Pdx-1和Nestin蛋白均呈阳性,阳性细胞率分别为(88.6±6.2)%、(84.6±8.6)%和(81.3±7.5)%。诱导分化后细胞经DTZ染色呈棕红色。在高糖刺激下,培养上清液中胰岛素含量增高。结论本法可获取高纯度、多数量的胰腺干细胞,在人工诱导下可定向分化为具有胰岛素分泌功能的胰岛样细胞团,为临床胰岛移植获得足量细胞来源提供实验基础。
简介:摘要:随着工业的快速发展,环境污染问题变得越来越明显,人们的健康状况正面临严重的威胁。随着国家经济水平和科学技术的不断提高,我国的制药行业也有了很大程度上的进步与发展,但由于受到多方面因素的影响,目前我国的制药行业还存在一些缺陷。为了解决这一难题,人们在药物制造领域进行了深入的研究,各种新型医药技术的研发为医药行业的进步提供了强大的推动力。在众多的制药技术中,生物工程技术作为一种新兴的技术受到广泛关注。在众多技术中,制药分离技术被视为最为关键的一环。由于药品成分复杂、含量高,所以必须要使用高效液相色谱法来测定其有效成分,以保证药品质量和疗效。目前市面上有大量的药物是通过口服方式服用的,并且这些药物中还含有一些不可溶解的成分。