简介:摘要目的探讨高压氧(HBO)联合紫杉醇(PTX)对体外培养的人胃癌AGS细胞株增殖、活性氧水平(ROS)及细胞周期的影响。方法体外培养人胃癌AGS细胞完成后,将细胞分为4组:对照组、PTX组、HBO组和HBO+PTX组。采用CCK-8法检测HBO和PTX联用对胃癌AGS细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞内ROS水平和细胞周期阻滞情况,Western blotting实验检测AGS细胞内细胞周期相关蛋白的表达水平。结果HBO+PTX组AGS细胞存活率明显低于对照组和HBO组(P<0.01),也低于PTX组(P<0.05);HBO+PTX组AGS细胞内ROS水平明显高于对照组和HBO组(P<0.01),也高于PTX组(P<0.05)。PTX将AGS细胞周期阻滞在S期(P<0.05),同时发现HBO+PTX组S期占比略高于PTX组(P>0.05)。HBO+PTX组Cyclin A1表达量明显低于其他3组(P<0.05或P<0.01),CDK2表达量低于对照组和HBO组(P<0.05),略低于PTX组(P>0.05)。结论HBO能够有效增强PTX对AGS细胞的增殖抑制作用,提高AGS细胞内ROS水平,并阻滞细胞周期,从而抑制AGS细胞的分裂与增殖。
简介:摘要目的评价活性氧(ROS)在缺氧后处理激活大鼠心肌细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路中的作用。方法分离、培养成年大鼠原代心肌细胞,采用随机数字表法分成4组(n=20):正常组(N)、缺氧复氧组(HR组)、缺氧后处理组(HPO组)及HPO+ROS清除剂组(HPO+MPG)。采用缺氧45 min复氧60 min的方法制备心肌细胞缺氧复氧损伤模型;HPO组缺氧45 min后,行3个循环的氧合5 min-缺氧5 min处理,再复氧60 min;HPO+MPG组缺氧35 min时加入ROS清除剂N-(2-硫基丙酰)-甘氨酸(终浓度2 mmol/L)继续缺氧处理10 min,余同HPO组。于复氧末,检测心肌细胞内Ca2+水平和Nrf2活性,观察心肌细胞超微结构并进行线粒体Flameng评分;采用Western blot法和RT-PCR法分别检测心肌细胞Nrf2、醌氧化还原酶(NQO1)、SOD1、血红素加氧酶1(HO-1)及其mRNA表达。结果与N组比较,HR组心肌细胞内Ca2+水平、Nrf2活性和Flameng评分升高,Nrf2、NQO1、SOD1、HO-1及其mRNA表达下调(P<0.05);与HR组比较,HPO组心肌细胞内Ca2+水平和Flameng评分降低,Nrf2活性升高,Nrf2、NQO1、SOD1、HO-1及其mRNA表达上调(P<0.05);与HPO组比较,HPO+MPG组心肌细胞内Ca2+水平和Flameng评分升高,Nrf2活性降低,Nrf2、NQO1、SOD1、HO-1及其mRNA表达下调(P<0.05)。结论缺氧后处理激活大鼠心肌细胞Nrf2/ARE信号通路的机制可能与ROS有关。
简介:背景:临床治疗由创伤、感染、肿瘤以及先天性疾病导致的骨缺损仍然是一个挑战。骨组织工程的研究,为骨缺损的治疗提供了一种新的解决办法,对治疗骨缺损具有重要的指导意义。目的:回顾近年来间质干细胞在骨组织工程中的增殖和成骨活性、免疫特性、促血管化以及在体实验的成骨效果的研究进展。方法:检索万方数据库和PubMed数据库2008年至2016年文献,检索词分别为"间质干细胞、组织工程、成骨、免疫、血管化"和"mesencgymalstemcell,tissueengineering,osteogenesis,immuneproperty,angiogenesis"。纳入与间质干细胞、组织工程、成骨、免疫及血管化相关的研究,排除重复及陈旧文献。共检索到1772篇文章,按纳入和排除标准文献进行筛选,共纳入41篇文章进行综述分析。结果与结论:在骨组织工程中,骨髓间质干细胞与脂肪间质干细胞应用较为广泛。研究认为骨髓间质干细胞成骨活性高于脂肪间质干细胞。间质干细胞具有明显的免疫调节和组织修复能力,可减少损伤部位炎症反应,加快组织修复。间质干细胞免疫调节作用不只有免疫抑制作用,也有免疫促进作用,脂肪间质干细胞比骨髓间质干细胞具有较强的免疫调节性。低氧培养下的脂肪间质干细胞能够分泌更高的促血管生成因子,生成更多的血管结构。实验研究证实聚乳酸多孔纳米材料结合纳米碳生物材料可以明显促进骨髓间质干细胞的增殖和成骨。由于间质干细胞具有生物向性,可能成瘤分化,故间质干细胞的临床应用一直持谨慎态度。
简介:摘要目的探讨干扰FSCN1基因表达对前列腺癌细胞凋亡、活性氧(ROS)水平影响及机制。方法以正常前列腺上皮细胞RWPE-1为对照细胞,通过RT-PCR及Western blot检测前列腺癌LNCaP、DU145和PC-3细胞中FSCN1 mRNA及蛋白表达;以LipofectamineTM 2000为载体,DU145细胞分为si-FSCN1组(靶向抑制FSCN1的小干扰RNAs转染DU145细胞)、阴性对照组(随机序列转染DU145细胞)及空白对照组(未转染的细胞),siRNA转染48 h,Western blot检测FSCN1、PCNA、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IKKα和p-IKKα的蛋白表达。CCK8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率及ROS水平。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。结果与RWPE-1细胞比较,LNCaP、DU145和PC-3细胞中FSCN1 mRNA (1比2.561±0.189、7.183±0.882、4.796±0.567、4.796±0.567)及蛋白表达(0.053±0.007比0.217±0.013、0.654±0.058、0.316±0.035)均升高,差异具有统计学意义(P均< 0.05)。与阴性对照组比较,si-FSCN1组FSCN1表达(0.473±0.052比0.086±0.010)降低,差异具有统计学意义(P均< 0.05)。与si-FSCN1组比较,空白对照组、阴性对照组细胞活力(0.302±0.033比0.787±0.069、0.764±0.063)均升高,凋亡率(24.54﹪±1.47﹪比3.04﹪ ± 0.36﹪、3.28﹪±0.40﹪)和ROS相对荧光强度(90.04±5.73比47.88±3.62、49.62±4.11)均降低,差异具有统计学意义(P均< 0.05)。与si-FSCN1组比较,空白对照组、阴性对照组PCNA (0.255±0.032比0.654±0.062、0.631±0.058)、NF-κB p65 (0.092±0.011比0.296±0.032、0.318±0.037)、p-NF-κB p65 (0.042± 0.008比0.155±0.018、0.151±0.016)、IKKα (0.112±0.01比0.172±0.020、0.192±0.023)和p-IKKα的蛋白表达(0.051±0.005比0.102±0.011、0.091± 0.009)均升高,Cleaved caspase3蛋白表达(0.206±0.018比0.074±0.009、0.085±0.010)均降低,差异具有统计学意义(P均< 0.05)。阴性对照组与空白对照组细胞活力、凋亡率、ROS水平及FSCN1、PCNA、Cleaved caspase3、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IKKα和p-IKKα的蛋白表达差异均无统计学意义(P > 0.05)。结论干扰FSCN1基因表达可降低前列腺癌细胞活力及诱导凋亡,机制可能与ROS水平升高及NF-κB信号下调有关。
简介:目的探讨三氧化二砷(As2O3)对人胶质瘤U251细胞的生长及端粒酶活性的影响。方法采用倒置显微镜和透射电镜观察As2O3处理后U251细胞形态变化;四甲基偶氮唑蓝比色法观察As2O3对U251细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;端粒重序列扩增酶联免疫吸附实验(TRAP-ELISA)结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(TRAP-PAGE)银染法检测As2O3处理后U251细胞端粒酶活性变化。结果倒置显微镜下观察到:As2O3处理后的U251细胞逐渐变圆、脱壁,细胞间接触变松,细胞质中颗粒增多,增殖变慢,细胞周围碎片增多;透射电镜下见较多典型凋亡细胞。1~8μmol/LAs2O3明显抑制U251细胞增殖,诱导其凋亡;并使端粒酶活性逐渐下降,该作用呈浓度和时间依赖性。结论As2O3对人胶质瘤U251细胞株生长具有显著抑制作用,其机制可能与As2O3能够抑制U251细胞的端粒酶活性密切相关。
简介:以植物乳杆菌CCFM8661及其酸耐受突变株LPV-30、LPV-48为研究对象,通过考察酸胁迫对其生理应激反应的影响而探索其可能的耐酸机制。研究结果表明:酸胁迫引起H^+-ATPase活性提高,胞内ATP含量降低,植物乳杆菌利用H^+-ATPase,通过消耗胞内ATP,将胞内H^+排出,从而保持胞内pH的动态平衡。与原始菌株相比,突变菌株都保持了较高的H^+-ATPase活性和胞内ATP水平。细胞膜脂肪酸分析表明:酸胁迫引起总饱和脂肪酸含量的减少,不饱和度和单不饱和脂肪酸的含量增加,并且突变菌株保持较高的饱和脂肪酸含量。本研究结果有助于了解植物乳杆菌的酸胁迫抗性机制。
简介:摘要目的分析去白细胞单采血小板保存期末的凝血因子活性及血栓弹力图(TEG),为指导去白细胞单采血小板临床输注提供参考。方法于2017年6月至2019年6月,采用随机抽样法选择日照市中心血站采集的65人份去白细胞单采血小板为研究对象。去白细胞血小板采用MCS+型血细胞分离机及其配套管路耗材采集。分别于去白细胞单采血小板保存前、(22±2)℃振荡保存第5天和第7天时,对其血小板计数、FⅧ活性、FⅨ活性和TEG进行检测。对以上指标3个不同保存时间点的总体比较,采用单因素重复测量方差分析;不同时间点的两两比较,采用最小显著性差异(LSD)法。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果①本研究65人份去白细胞单采血小板,于保存前、保存第5天和第7天时,血小板计数分别为(10.8±0.5)×1011/L、(8.7±1.1)×1011/L、(8.2±1.5)×1011/L,FⅧ活性分别为(105.9±38.2)%、(57.2±22.4)%、(30.5±17.5)%,FⅨ活性分别为(97.8±27.5)%、(54.9±19.7)%、(38.4±12.4)%。保存前、保存第5天和第7天时,上述3项指标分别总体比较,差异均有统计学意义(F=93.90,P<0.001;F=126.16,P<0.001;F=141.04,P<0.001);保存第5天与保存前分别比较,差异均有统计学意义(LSD-t=10.52,P<0.001;LSD-t=10.13,P<0.001;LSD-t=11.76,P<0.001),保存第7天与第5天分别比较,差异亦均有统计学意义(LSD-t=2.34,P=0.020;LSD-t=5.53,P<0.001;LSD-t=4.50,P<0.001)。② 65人份去白细胞单采血小板,于保存前、保存第5天和第7天时,TEG参数R值、K值、α角、MA值依次分别为(8.8±0.5)min、(14.1±0.7)min、(16.1±0.6)min,(1.7±0.1)min、(1.8±0.5)min、(1.9±0.6)min,(69.7±3.4)°、(69.1±1.8)°、(69.2±2.6)°,(86.7±2.6)mm、(82.2±3.1)mm、(80.5±3.3)mm;R值、K值、MA值分别总体比较,差异均有统计学意义(F=2 522.59,P<0.001;F=3.15,P=0.045;F=73.42,P<0.001)。其中,保存第5天与保存前比较,R值显著升高,MA值显著降低,并且差异均有统计学意义(LSD-t=49.90,P<0.001;LSD-t=8.51,P<0.001);保存第7天与第5天比较,R值亦显著升高,MA值亦显著降低,差异均有统计学意义(LSD-t=18.83,P<0.001;LSD-t=3.22,P=0.002)。结论去白细胞单采血小板于保存期末,即(22±2)℃振荡保存第5天时,其凝血活性成分明显损耗,凝血功能有所下降。临床输注去白细胞单采血小板时,应根据不同的治疗目的,选择使用不同保存期的去白细胞单采血小板。
简介:目的探讨急性冠状动脉综合征(acuteeomnarysyndrome,ACS)患者外周血单核细胞核因子-κB(nuclearfaetor-kappaB,NF-κB)活性的变化及其临床意见。方法分别采用免疫组织化学染色法和夹心酶联免疫吸附法测定54例ACS,42例稳定型冠心病(Sc皿)患者及36例对照组的外周血单核细胞NF-κB活性和血浆可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平,并分析NF-κB活性与sICAM-1浓度相关性。结果ASC组NF-κB活性和sICAM-1水平显著高于稳定型冠心病组和对照组(P〈0.01),而且ACS血NF-κB活性与sICAM-1水平显著正相关。但SCHD组NF-κB活性和sICAM-1水平与对照组比较,差异无显著性意义。结论急性冠状动脉综合征外周血单核细胞核因子.出活性明显升高,NF-κB是动脉粥样斑块不稳定的标志.并可能通过上调sICAM-1表达而促发ACS。
简介:摘要目的探讨非局限期结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)患者的临床特征及预后影响因素。方法回顾性分析北京协和医院2012年1月至2019年12月收治的51例Ⅲ~Ⅳ期ENKTL患者的临床资料。分析其临床特征、疗效、生存情况及预后影响因素,依据起病时是否存在鼻咽部受累分为鼻型与非鼻型,对比分析二者的差异,探讨EB病毒DNA(EBV-DNA)在疗效监测及预后评价中的意义。结果所有患者的中位发病年龄为42(14~67)岁,男女比例为2.9∶1。中位随访时间为30(1~78)个月,非局限期患者中位总生存(OS)时间为7个月,1年及3年无进展生存(PFS)率分别为34.1%和24.6%,1年及3年OS率分别为39.9%和26.6%。鼻型与非鼻型患者的比例为1.6∶1。非鼻型患者合并噬血细胞综合征的比例较鼻型患者高(65.0%对35.5%,P=0.039),非鼻型患者一线化疗的完全缓解(CR)率较鼻型患者低(10.0%对45.2%,P=0.008)。非局限期鼻型与非鼻型患者的中位OS时间分别为9个月和4个月,3年PFS率分别为36.0%和10.0%(P=0.029),3年OS率分别为37.9%和11.4%(P=0.050)。EBV-DNA的变化趋势与疗效有良好的相关性。基线EBV-DNA阴性与阳性患者生存曲线的差异无统计学意义。1个疗程化疗后EBV-DNA阴性与阳性患者的3年OS率分别为77.9%和8.1%,差异有统计学意义(P=0.002)。多因素分析结果显示,1个疗程化疗后EBV-DNA阳性为OS不良的独立预后因素。结论应用以培门冬酶为基础化疗方案的非局限期ENKTL患者的治疗有效率及远期生存仍较差。非鼻型患者在临床特征、化疗疗效及远期预后方面均较鼻型患者差。1个疗程化疗后EBV-DNA阳性为OS不良的独立预后因素,可用于早期预测疗效及预后。
简介:在早怀孕的子宫是在生来的杀手(NK)被充实的一个非淋巴的器官细胞。在母亲/胎儿的接口探讨这些丰富的人的NK房间的角色的研究在他们联系的胎儿的trophoblast房间上在他们对主要histocompatibility建筑群(MHC)的反应上集中了分子。属于有在怀孕的trophoblastMHC一级分子的像免疫球蛋白的受体(KIR)家庭能调整的漂亮房间的母亲的NK房间受体的相互作用为支持胎盘的开发的pro-angiogenic因素的分泌物的NK房间激活。这评论将在KIR2DL4上的母亲/胎儿的接口和焦点盖住KIR的角色,特别地被平衡由于它的ligand的限制表示在怀孕起一个作用的一个KIR家庭成员,由在怀孕早的胎儿的trophoblast房间的人的白血球抗原(HLA)-G,。KIR2DL4-HLA-G相互作用由导致NK房间和结果的角色的细胞的老朽的小径在脉管的改变的联系老朽的能分泌的显型(SASP)将在复制的上下文被讨论。
简介:增加的证据在有免疫力的反应显示leptin的一个角色,但是发信号的leptin是否涉及在骨头髓(BM)调整NK房间开发,仍然保持大部分不清楚。在这研究,我们在在prediabetic的缺乏的db/db老鼠上演的leptin受体的BM描绘了NK房间区别和成熟。尽管BM细胞质类似于控制值,NK房间的全部的数字严重地在变异的鼠标被减少。db/dbBM房间的流动cytometric分析揭示了在区别的各种各样的阶段开发NK房间的显著地减少的频率。显著地显示的BMdb/dbNK房间增加了apoptosis,但是维持了正常房间骑车地位和proliferative能力。而且,recombinantleptin能显著地在文化从野类型的老鼠提高NK房间的幸存。NK房间上的进一步的检查功能的活动证明db/dbNK房间与显著地增加的IL-10展出了正常内在的cytotoxicity生产。一起拿,我们的调查结果建议发信号的leptin经由在老鼠BM提高不成熟的NK房间的幸存调整NK房间开发。
简介:Inordertoclarifytheeffectsof17β-estradiol(E2)onnaturalkiller(NK)cellsandthepossiblyregulatorymechanisms,weobtainedhighlypurifiedandviableNKcellsfromC57BL/6Jmousespleenbyamagneticcellsorter(MACS).ThesecellsweretreatedwithE2andthentheircytotoxicityandproliferativecapacitywereexamined.TofurtherinvestigatethemechanismsontheeffectofE2onNKcells,expressionsofactivation-associatedmarkers(CD69,CD122)andinhibitoryreceptors(CD94,Ly49),andintracellularcytokineproductionwereanalyzed.Atlast,weperformedthecDNAmicroarraytoexplorethepossibleinvolvedgenes.WefoundthatE2couldsuppressNKcellcytotoxicityandproliferativecapacityinvitro.E2reducedNKcellcytotoxicityandproliferativecapacity,whichmaybethroughinfluencingthephenotypesandcytokineexpressionofNKcells,mainlyinvolvingCD94andIFN-γ.Furthermore,regulationofStat4,Fyn,Sh2d1a,Eat2,Cd244,Irf1,Runx1,Irf7,Irf5,EsrraandNr5a1genesmayberelatedtothecytotoxicity,proliferationandcytokineproductionofE2-mediatedpurifiedNKcells.
简介:摘要目的观察甘露聚糖对口腔粘膜病患者的临床疗效及淋巴细胞活性的影响。方法选取2014年6月—2015年11月在我院接受治疗的口腔粘膜病患者80例作为研究对象,并按数字随机法分为2组,对照组40例,采用常规治疗法;治疗组40例,在常规治疗法的基础上给予甘露聚糖肽口服治疗,观察2组患者治疗后的临床疗效、不良反应发生情况及淋巴细胞亚群的变化水平。结果治疗组显效27例,有效11例,无效2例,总有效率为95.0%;对照组显效13例,有17效例,无效10例,总有效率为75.0%,治疗组疗效显著优于对照组患者;治疗后,治疗组患者的T淋巴细胞CD3、CD4值明显高于对照组,CD8值明显低于对照组,2组比较差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组不良反应发生率为5.0%,对照组不良反应发生率为7.5%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论甘露聚糖肽可有效促进细胞免疫功能,达到治疗口腔粘膜疾病的目的,且不良反应发生率低,具有较好的临床疗效,值得临床推广应用。