简介：近年来发现肿瘤组织相关糖蛋白的异常糖基化作用与肿瘤的发生，转移及免疫调控密切相关，本实验收集手术切除病人肝癌组织标本，应用Tris-HCl溶液抽提人肝癌组织中的碳水化合物，以ConA-Sepharose4B亲和层析方法，纯化人肝癌组织ConA相关的N-糖基化糖蛋白，经SDS-PAGE电泳后，考马斯亮兰染色，与低分子量标准蛋白比较，发现用ConA纯化的人肝癌组织糖蛋白有三条电泳带，分子量分别为70kd,30kd和20kd，细胞毒试验（LDH释放法）结果提示肝癌N-糖基糖蛋白对正常人NK和LAK细胞杀伤其靶细胞K562和H7402细胞性活有明显的抑制作用，但肝癌相关糖蛋白剂量增加抑制作用无明显增加。

简介：目的：研究miR-152分子对NK细胞杀伤JEG-3细胞效应的影响。方法：在滋养细胞肿瘤细胞系JEG-3细胞中分别转染pre-miR-152（实验组）,Cy3标记的pre-miRNA-control（阴性对照）,空白对照（NC）为未转染的JEG-3细胞。转染48h进行NK细胞的细胞毒测定,观察各组NK细胞对JEG-3细胞的杀伤效应。结果：与对照组相比,实验组NK细胞对JEG-3细胞的平均杀伤率显著增高（P〈0.05）,且随着效靶比的增高,杀伤率也增大。空白对照组与阴性对照组之间的NK细胞杀伤能力无显著差异（P〉0.05）。结论：miR-152可以提高NK细胞对滋养细胞的杀伤作用。

简介：摘要：目的：研究联合应用CIK细胞和NK细胞对肿瘤细胞的杀伤性。方法：于我院肿瘤患者中随机抽取20例，抽取外周血并对肿瘤细胞分离单个核细胞，用于制备CIK细胞以及NK细胞，分别检测CIK细胞组、NK细胞组以及联合应用CIK细胞和NK细胞组不同效靶比条件下的杀伤率。结果：在效靶比5:1条件下，联合组杀伤率（47.21±2.18）%，显著高于NK细胞组[（34.85±1.90）%]和CIK细胞组[（31.58±1.29）%]（P＜0.05）；在效靶比10:1条件下，联合组杀伤率（62.34±2.86）%，显著高于NK细胞组[（47.11±2.45）%]和CIK细胞组[（43.54±1.89）%]（P＜0.05）；在效靶比20:1条件下，联合组杀伤率（80.15±3.54）%，显著高于NK细胞组[（63.61±2.70）%]和CIK细胞组[（62.75±2.95）%]（P＜0.05）。结论：联合NKCIK和CIKNK细胞可提高杀伤肿瘤细胞效率，在肿瘤免疫治疗中联合应用两种细胞具有良好前景。

简介：已有明确的证据表明,我国新近开发的新抗生素多抗甲素在小鼠体内有显著的促进抗肿瘸免疫反应的作用。自然杀伤细胞(NK细胞)对多种肿瘤细胞均有直接杀伤活性,是机体抗肿瘤免疫反应中的主要效应细胞之一。为了进一步探讨多抗甲素的作用机

简介：摘要：目的：研究体外诱导扩增CIK和NK细胞效果并对比两种细胞活性。方法：于我院肿瘤细胞患者中随机抽取25例，取患者外周血单个核细胞，经过体外诱导扩增培养CIK以及NK细胞，对比扩增效果。并使用CCK-8方法测定两种细胞的杀伤活性。结果：经过体外诱导，NK细胞占比显著高于CIK细胞，培养7d后，NK细胞占比达到（38.56±4.73）%，扩增效果显著高于CIK细胞[（13.16±2.10）%]（P＜0.05）；培养14d后，NK细胞占比达到（62.80±7.28）%，扩增效果显著高于CIK细胞[（36.76±4.59）%]（P＜0.05）。在不同效靶比条件下，NK细胞组杀伤率显著优于CIK细胞组（P＜0.05）。在效靶比6:1条件下，NK细胞组杀伤率（20.15±1.36）%，显著高于CIK细胞组[（8.36±1.10）%]（P＜0.05）；在效靶比12:1条件下，NK细胞组杀伤率（41.39±2.68）%，显著高于CIK细胞组[（12.75±1.64）%]（P＜0.05）；在效靶比25:1条件下，NK细胞组杀伤率（67.31±2.85）%，显著高于CIK细胞组[（58.71±3.30）%]（P＜0.05）。结论：通过对CIK和NK细胞的体外诱导扩增，NK细胞的扩增效果好于CIK细胞，且对肿瘤细胞的杀伤能力强于CIK细胞。

简介：摘要目的HBV感染对NK细胞生物活性的影响。方法外周血标本来源于2018年1月至2018年12月在中山大学附属第三医院岭南医院经体外扩增培养NK细胞后回输的49例患者。患者均签署知情同意书，符合医学伦理学规定。其中男30例，女19例；年龄27～87岁，中位年龄60岁。根据患者有无HBV感染，将血标本分为HBV（+）组和HBV（-）组。体外扩增、培养CD3-CD56+的NK细胞和CD3+CD56+的NKT细胞。采用流式细胞术检测NK、NKT细胞百分率。两组细胞活性率和细胞凋亡等比较采用t检验。结果HBV（-）组细胞活性率为（94.4±1.2）%，明显高于HBV（+）组的（85.1±4.6）%（t=2.146，P<0.05）；而HBV（-）组细胞凋亡率为（3.2±0.9）%，明显低于HBV（+）组的（11.6±4.1）%（t=-2.220，P<0.05）。HBV（-）组NK细胞百分率为（55.8±4.4）%，明显高于HBV（+）组的（34.7±5.9）%（t=2.889，P<0.05）。结论HBV（-）患者来源的细胞体外扩增诱导可获得较多NK细胞。

简介：本文应用单细胞细胞毒试验及形态学观察,研究PAA对人外周血NK细胞活性的作用机理。结果表明:正常人外周血淋巴细胞(PBL)与靶细胞在体外结合迅速,15分钟,2及4小时无明显差异。食道癌患者PBL与靶细胞结合迟缓,各时间点的结合率(B％)明显低于正常人。食道癌患者PBL的杀伤率(K％)明显低于正常人。经PAA预处理后能增强食道癌患者PBL明显低下的B％和K％,也可增强正常人PBL的K％,但对正常人PBL

简介：摘要目的观察斑秃患者外周血自然杀伤（NK）细胞亚群和白细胞介素18（IL-18）变化，评估IL-18对NK细胞活性的调控。方法收集2019年12月至2021年1月在山西省人民医院就诊的67例斑秃患者和25例健康志愿者，分离外周血单个核细胞（PBMC）和血浆，采用流式细胞仪检测PBMC中NK细胞亚群比例，酶联免疫吸附试验检测血浆IL-18水平。使用重组人IL-18刺激PBMC，建立PBMC与721.221细胞、K562细胞、P815-Ab细胞共培养体系，检测NK细胞中CD107a表达细胞比例和CD16表达细胞荧光强度，评估NK细胞功能。组间比较采用t检验或配对t检验。结果斑秃组CD56+CD16-NK细胞比例（8.12% ± 3.14%）低于对照组（10.78% ± 4.08%，t = 3.33，P = 0.001），CD56+CD16+NK细胞比例（46.08% ± 15.21%）高于对照组（32.14% ± 10.45%，t = 4.22，P < 0.001），CD56-CD16+NK细胞比例（28.81% ± 8.65%）与对照组（27.09% ± 7.62%）比较差异无统计学意义（t = 0.88，P = 0.383）。斑秃组血浆IL-18水平（112.0 ± 23.72 pg/ml）高于对照组（99.34 ± 15.15 pg/ml，t = 2.48，P = 0.015）。斑秃组NK细胞与721.221细胞、K562细胞和P815-Ab细胞共培养后表达CD107a细胞比例（9.53% ± 1.70%、5.15% ± 1.35%、6.50% ± 1.64%）均高于对照组（5.00% ± 1.17%、4.40% ± 1.09%、5.13% ± 1.36%，均P < 0.05）。P815-Ab细胞刺激后，斑秃组CD16阳性NK细胞荧光强度（151.10% ± 59.30%）低于对照组（221.90% ± 93.56%，t = 4.31，P < 0.001）。IL-18刺激后，与721.221细胞共培养的NK细胞CD107a表达比例高于未刺激组（14.47% ± 2.67%、9.93% ± 1.94%，t = 6.00，P < 0.001）；与K562细胞和P815-Ab细胞共培养的NK细胞CD107a表达比例与未刺激组比较差异无统计学意义（P > 0.05）。结论斑秃患者IL-18通过增加自然杀伤毒性受体介导的细胞毒性，增强NK细胞活性。

简介：目的建立非何杰金氏淋巴瘤来源的NK92细胞杀伤异种细胞的细胞模型。方法常规培养NK92细胞和猪内皮细胞(PEC)，利用MTT法检测NK92细胞对PEC细胞的杀伤效应，通过β-hexosaminidase释放实验显示杀伤过程中，NK92细胞的胞吐量。结果效靶比为10：1时作用时间6h，NK92细胞的胞吐量最大，对PEC的杀伤率为100％。结论NK92细胞杀伤异种细胞的细胞模型建立成功。

简介：目的探讨骨髓增生异常综合征患者红细胞天然免疫黏附功能及对自然杀伤细胞（NK细胞）杀伤活性的影响.方法选择我院骨髓增生异常综合征患者14例为试验组,20例健康人作为对照组,将2组外周血红细胞用柠檬酸钠抗凝,检测红细胞在自身血浆条件下对K562细胞的免疫黏附并计算黏附率;并用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色（MTT）法测定红细胞对正常NK细胞杀伤K562细胞活性的影响,并与未加红细胞时进行比较.结果试验组红细胞使K562细胞形成了＂玫瑰花＂样结合.对照组红细胞对K562细胞的免疫黏附结合率为（15.6±6.7）%,试验组红细胞对K562细胞的免疫黏附结合率为（8.5±7.0）%,2组比较差异有统计学意义（t=3.66,P＜0.01）.不加红细胞条件下,对照组外周静脉血NK细胞杀伤K562细胞活性杀伤率为64%～75%,加入红细胞后为79%～88%;试验组不加入红细胞为45%～56%,加入红细胞后为51%～58%.加入红细胞后,2组NK红细胞对K562细胞的杀伤率均增加（P＜0.01）,且对照组高于试验组（P＜0.01）.结论红细胞可增加NK细胞对K562细胞的杀伤率;骨髓增生异常综合征患者的红细胞对K562细胞的免疫黏附能力下降,并可减低NK细胞对K562细胞的杀伤率.

简介：摘要目的探讨上皮性卵巢癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性检测的临床意义。方法采用流式细胞仪测定上皮性卵巢癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性，以良性卵巢上皮性肿瘤及正常人作对照分析。结果上皮性卵巢癌患者外周血CD3+、CD4+、NK细胞数量及CD4+/CD8+比值较良性肿瘤组、正常对照组均明显下降(P<0.05)，而CD8+细胞水平显著升高。外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数量的改变与上皮性卵巢癌临床病理分期有关，分期越晚，CD3+、CD4+、NK细胞数量及CD4+/CD8+细胞比值越低，CD8+细胞水平越高；Ⅰ、Ⅱ期上皮性癌患者与Ⅲ、Ⅳ期患者之间有显著差异(P<0.05)。结论检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于上皮性卵巢癌患者的检测及免疫状态监测。

简介：目的研究蜂毒素与基因变构IL-2（melittin-^88ArgIL-2）嵌合蛋白，在体外对入卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用及对NK细胞的杀伤活性的影响。方法用甲基噻唑基四唑（methylthiazolyltetrazolium，MTT）法研究已经纯化制备的melittin-^88ArgIL-2嵌合蛋白，在体外对入卵巢癌细胞SKOV3生长抑制的作用，对NK细胞杀伤活性的影响。结果melittin-^88ArgIL-2嵌合蛋白在体外能抑制入卵巢癌细胞SKOV3的生长增殖，能增强NK细胞的杀伤活性。结论melittin-^88ArgIL-2嵌合蛋白在体外具有一定的增强免疫功能和抗肿瘤活性。为其在真核细胞系统的表达、纯化、体内的生物学活性研究以及大规模制备的中试放大研究和临床前期研究奠定了基础。

简介：摘要目的探讨人自然杀伤（NK）细胞在CD137抗体作用下通过抗体依赖性细胞毒性作用（ADCC）介导对乳腺癌细胞的杀伤作用。方法NK细胞表型和细胞因子检测实验分组：阴性对照组（未用人CD137抗体处理的NK细胞）、CD137抗体处理组（10 μg/mL人CD137抗体处理4 h的NK细胞）；NK细胞毒性检测实验分组：根据体系中是否添加NK细胞、人CD137抗体和西妥昔单抗分为8组。流式细胞术检测两组NK细胞表面CD16分子的表达情况，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测两组NK细胞培养上清液中干扰素（IFN）-γ和肿瘤坏死因子（TNF）-α的浓度，乳酸脱氢酶（LDH）法检测8组反应体系中表皮生长因子受体（EGFR）高表达乳腺癌细胞系MDA-MB-231和EGFR低表达乳腺癌细胞系MDA-MB-453的杀伤比例，并采用t检验或析因分析进行统计学分析。结果与阴性对照组比较，CD137抗体处理组CD16+NK细胞比例（79.57﹪ ±0.92﹪比90.43﹪±0.67﹪）、细胞因子IFN-γ浓度[（388.90±7.02） pg/ mL比（523.90±1.90）pg/ mL]和TNF-α浓度[（20.59±4.09）pg/mL比（47.22±2.14）pg/mL]均升高，差异有统计学意义（P < 0.05）；MDA-MB-231细胞杀伤的三因素析因分析结果显示：NK细胞、人CD137抗体和西妥昔单抗3个因素分别对MDA-MB-231细胞的杀伤都有作用（F = 5227.276、201.473、1792.242，P均< 0.001），3个因素两两之间的交互作用对MDA-MB-231细胞的杀伤也都有作用（F =183.903、1517.187、33.483，P均< 0.001），3个因素的二级交互作用差异有统计学意义（F = 41.505，P < 0.001）。结论人CD137抗体可增强NK细胞分泌细胞毒性因子IFN-γ和TNF-α的能力，同时可上调NK细胞表面CD16分子的表达，从而使得NK细胞可能通过西妥昔单抗介导的ADCC作用增强对表皮生长因子受体（EGFR）高表达乳腺癌细胞的杀伤作用。

简介：自然杀伤细胞（NK细胞）是机体抗肿瘤的第一道防线，是机体天然免疫的主要承担者，也是获得性细胞免疫的核心调节细胞。NK细胞对肿瘤的杀伤活性与其细胞表面受体和肿瘤细胞表面的配体密切相关，由于肿瘤细胞表面配体表达不同致使对NK细胞杀伤的敏感性有很大差异，临床疗效不一。我们简要介绍了影响肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性的机制，对目前提高肿瘤细胞敏感性的策略和方法进行了总结。

简介：摘要目的观察当归四逆汤对原发性痛经大鼠脾脏NK细胞活性作用。方法以原发性痛经大鼠脾脏NK细胞活性为观察指标，并与西药芬必得作对照观察。结果中药高剂量组NK细胞活性显著提高，效果优于西药（p<0.05）。结论当归四逆汤对原发性痛经大鼠具有提高大鼠脾脏NK细胞活性的作用，这可能是临床运用当归四逆汤治疗原发性痛经的内在机理之一。

简介：目的：观察葛根素作用前后细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）和结肠癌SW-620细胞生长情况及其作用前后细胞因子诱导的杀伤细胞对结肠癌SW-620细胞杀伤活性的影响,并探讨其发生机制。方法：分离健康者外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子诱导为细胞因子诱导的杀伤细胞,收集培养第8天的细胞因子诱导的杀伤细胞,不同浓度葛根素分别作用于细胞因子诱导的杀伤细胞和结肠癌SW-620细胞48小时,CCK8法检测细胞因子诱导的杀伤细胞增殖率;四甲基偶氮唑蓝法检测结肠癌SW-620细胞抑制率;流式细胞术检测葛根素作用前后细胞因子诱导的杀伤细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a的表达;流式细胞术检测葛根素作用前后结肠癌SW-620细胞表面MICA/B分子表达;乳酸脱氢酶释放法测定葛根素对细胞因子诱导的杀伤细胞杀伤结肠癌细胞株SW-620的活性影响。结果：葛根素在0.8~100μmol/L浓度范围内对细胞因子诱导的杀伤细胞生长具有促进作用,对SW-620细胞生长无明显促进作用,浓度≥100μmol/L葛根素可抑制SW-620生长;经浓度为0.8~100μmol/L的葛根素诱导后的细胞因子诱导的杀伤细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a的表达显著高于对照组,对结肠癌SW-620细胞的杀伤活性亦显著高于对照组;经浓度为3.1~50μmol/L的葛根素作用48小时后的结肠癌SW-620细胞,其表面的MICA/B的表达不同程度增加,显著高于对照组。结论：葛根素能够促进细胞因子诱导的杀伤细胞增殖,并增强其对结肠癌SW-620细胞的杀伤活性,其机制可能与上调细胞因子诱导的杀伤细胞表面穿孔素、颗粒酶B、CD107a的表达有关;葛根素上调结肠癌SW-620细胞表面MICA/B的表达可能增加细胞因子诱导的杀伤细胞对结肠癌SW-620细胞的杀伤活性。

简介：为初步探讨全氟辛烷磺酸（Perfluorooctanesulfonate,PFOS）的细胞免疫毒性,采用每天1次经口灌胃染毒的方法,研究了PFOS经口重复剂量染毒对C57BL/6小鼠淋巴细胞增殖功能和NK细胞活性的影响.选择雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为4组.实验组PFOS染毒剂量分别为5、10、20mg·kg-1（bw）,对照组给予2%Tween-80.每天1次经口灌胃染毒7d后,制备脾脏T淋巴细胞悬液,以刀豆蛋白A（ConA）和大肠杆菌脂多糖（LPS）作为刺激源,采用MTT法检测T、B淋巴细胞增殖功能,乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞活性.结果表明,10mg·kg-1和20mg·kg-1PFOS染毒组小鼠体重呈明显的下降趋势,且小鼠胸腺和脾脏指数显著低于对照组（p〈0.05）,而各PFOS染毒组小鼠肝脏指数均显著高于对照组（p〈0.05）.PFOS各染毒组T淋巴细胞的增殖功能均显著低于对照组（p〈0.05）;10mg·kg-1和20mg·kg-1PFOS染毒组小鼠NK细胞的活性显著降低（p〈0.05）.研究结果显示,PFOS暴露可降低小鼠淋巴细胞增殖功能和NK细胞活性,表明PFOS具有免疫抑制效应.

简介：目的观察粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）分泌型肝癌疫苗对移植性肝癌小鼠细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀伤活性的影响。方法取小鼠肝癌细胞株H22细胞1×10^6/只注入小鼠腹腔内，接种7d形成腹水瘤后再在小鼠体内传3代。取生长旺盛且无血性的腹水，在无菌条件下制成2×10^7/ml的细胞悬液，以2×10^6细胞/0.1ml/只接种于小鼠右前肢皮下。将肝癌细胞移植瘤动物分成3组。4天后，在右侧背部皮下进行免疫治疗，即制备GM-CSF分泌型H22肝癌瘤苗并免疫ICR小鼠（H22-GM-CSF组，n=5），同时设立无GM-CSF基因修饰H22肝癌瘤苗组（H22组，n=5）和PBs对照组（PBS组，n=5），测量各组小鼠肿瘤体积；采用细胞增殖计数法检测小鼠脾血CTL杀伤活性。结果随着效/靶比增加，各组CTL杀伤活性均增强。在效/靶比为50∶1时，GM-CSF-H22组CTL杀伤活性为60±6.1%，明显高于H22组（17.4±0.9%）和PBS组（12.2±0.6%，P〈0.01）；GM-CSF分泌型肝癌细胞瘤苗明显抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长。在21天时，H22-GM-CSF组、H22组和PBS组小鼠肿瘤体积分别为0.63±0.05mm3、1.47±0.75mm3和1.79±0.34mm3（P〈0.01）。结论GM-CSF分泌型肝癌细胞瘤苗可抑制肿瘤细胞生长,增强CTL杀伤活性。

简介：无

简介：