简介:建立免疫磁珠分离(ImmunomagneticSeparation,简称“IMS”)联合荧光定量聚合酶链式反应PCR(PolymeraseChainReaction,简称“PCR”)快速检测阪崎肠杆菌的方法。制备以生物素介导偶联的链霉亲和素免疫磁珠,优化偶联和捕获条件。合成阪崎肠杆菌ITS(InternalTranscribedSpacer简称“ITS”)靶基因序列的引物和探针,同时构建内参质粒(InternalAmplificationControl,简称“IAC”),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR反应体系。在1mL体系中添加粒径为80nm的链霉亲和素免疫磁珠0.3mg,孵育30min,可获得80.5%以上的捕获效率。建立的基于内参的荧光PCR体系针对质粒检测时,Ct值(Cyclethreshold,简称“Ct值”)与模板拷贝数有着良好的线性关系(R2=0.998),IMS-PCR检测体系对阪崎肠杆菌菌液的检测灵敏度为33.3CFU/mL,可在3h内完成。针对4株阪崎肠杆菌标准菌株和5株非阪崎肠杆菌菌株的检测也显示出较好的特异性和稳定性,人工模拟样品的检测结果与采用国标法检测的结果完全一致,可用于快速检测样品中的阪崎肠杆菌和疾病预防。
简介:通过文献分析法识别了建筑信息模型技术(BuildingInformationModeling,简称BIM)面临的10项挑战因素,基于对24位专家的问卷调查,运用决策实验室法分析了各挑战因素的关系和所处地位.研究表明,核心挑战因素是人才和技术培训的缺乏及相关法律政策的不健全.若通过高校开设BIM课程,使相关专业毕业生对BIM有深刻认识,并具备相应技能,则BIM技术面临的诸如培训费用高,传统模式难以改变,各参与方之间权责不明、合作混乱,相关人员对BIM工作流程不熟悉等问题都将迎刃而解.同时,政府应进一步颁布相关法律政策来规范、保护、激励BIM的健康可持续发展.