全自动快速微生物检测系统在鉴定流感嗜血杆菌的应用研究

全自动快速微生物检测系统在鉴定流感嗜血杆菌的应用研究

张惠芬  ,崔琳

石嘴山市第二人民医院检验科   宁夏石嘴山市  753000

摘要：目的 观察全自动快速微生物检测（英文简称：VITEK MS）系统，应用于流感嗜血杆菌鉴定中的价值。方法 回顾性分析我院2020年8月10日/2022年6月30日（开始/结束）生化实验室收集的咽拭子或痰液标本2000份，经过细菌16SrDNA检查提取流感嗜血杆菌35株。针对获得的流感嗜血杆菌株使用M—H琼脂药敏试验、VITEK MS系统检测，比对两种方式流感嗜血杆菌检出率、检查情况。结果 VITEK MS系统流感嗜血杆菌检出率显著高于M—H琼脂药敏试验流感嗜血杆菌检出率（P＜0.05）。VITEK MS系统流感嗜血杆菌检查耗时短于M—H琼脂药敏试验流感嗜血杆菌检查耗时（P＜0.05）。结论 鉴定流感嗜血杆菌中采用全自动快速微生物检测系统价值较高，耗时短，检出率较高，可推广应用。

关键词：流感嗜血杆菌；全自动快速微生物检测系统；检查耗时；检出率

流感嗜血杆菌即费佛氏杆菌或拜菲尔氏菌等，是一种革兰阴性杆菌（无动力的），最早由费佛教授在流感（1892年，流行性感冒）瘟疫中发现。于人体呼吸道中可广泛寄居流感嗜血杆菌，可引起个体出现继发感染、急性化脓性感染等。针对流感嗜血杆菌感染导致疾病者，科学鉴别，以快速针对性治疗，帮助患者快速摆脱病魔困扰。在流感嗜血杆菌鉴别中，普遍认为16SrDNA检查为金标准，但此种方式耗时较长，无法快速鉴别患者情况，探究更为快速准确鉴别流感嗜血杆菌的手段尤为重要[1]。本文研究我院2020年8月10日～2022年3月30日生化实验室收集的咽拭子或痰液标本2000份，经过细菌16SrDNA检查提取流感嗜血杆菌35株为研究观察对象，观察全自动快速微生物质谱检测（英文简称：VITEK MS）系统检测价值，报告如下。

1一般资料与方法

1.1一般资料

2020年8月10日～2022年3月30日我院生化实验室收集的咽拭子或痰液标本2000份，经过细菌16SrDNA检查提取流感嗜血杆菌35株为研究观察对象，回顾性分析，所有流感嗜血杆菌株均行流感嗜血杆菌株使用M—H琼脂药敏试验、VITEK MS系统检测。

1.2方法

细菌16SrDNA检查：DNA提取试剂盒（准备流感嗜血杆菌）、PCR扩增试剂盒、离心机、PCR仪等，按照相关规范，进行菌株DNA测序，结果比对BLASET数据库序列，确定菌株。

VITEK MS系统检测：培养的无菌接种环，需要放置于质谱仪检测板上置，后滴加质谱样品1μL处理基质溶液，将溶液样品覆盖质谱仪检测板，干燥后，按照相关要求进行质谱仪鉴定。

M—H琼脂药敏试验：根据相关规范，进行X、V因子需求试验，选择菌落（待测）制成0.5麦氏浊度的菌悬液，将菌悬液于M-H琼脂平板上均匀涂布。遵照无菌操作规范，取X+V因子、X因子、V因子试片接种，后放置于培育箱（5%的CO2培育箱）中连续培养，培养时间24h，后判读结果[2]。

1.3观察指标

比对M—H琼脂药敏试验、VITEK MS系统检测流感嗜血杆菌检出率、检查情况（检查耗时）。流感嗜血杆菌检出率=确定流感嗜血杆菌株数量/35×100%。

1.4统计方法

研究所有数据行统计分析，(±s)表示符合正态分布的计量资料检查耗时、组间对比t检验，n（%）表示计数资料流感嗜血杆菌检出率，组间对比检验，P＜0.05，统计意义标准，工具SPSS 24.0软件。

2结果

流感嗜血杆菌检出率，VITEK MS系统检查、M—H琼脂药敏试验检查比较，前者更高，P＜0.05，差异有统计学意义（见表1）。

表1 不同方式流感嗜血杆菌检出率比较[n（%）]

VITEK MS系统流感嗜血杆菌检查耗时（8.12±0.23）min，M—H琼脂药敏试验流感嗜血杆菌检查耗时（1920.89±86.23）min，两种方式比较，t值=131.231，VITEK MS系统检查耗时更短，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3讨论

流感嗜血杆菌是导致老年群体、儿童群体出现呼吸道感染、化脓性脑膜炎的常见病菌类型。技术发展为流感嗜血杆菌准确鉴别提供支持，通过免疫学、生物学等技术准确鉴别流感嗜血杆菌[3-4]。鉴别中16SrDNA检查方式被认为是金标准，但该种方式耗时较长，影响快速分析患者情况。

流感嗜血杆菌鉴别中，可以采用M-H琼脂试验方式，但此种方式无论对技术人员还是对环境要求均比较高，若环境条件差、技术人员技能水平不足等，均可能导致流感嗜血杆菌检出率降低[5]。另外，M-H琼脂试验操整体操作较为繁琐，整个检查操作时间长，检查中流感嗜血杆菌可能因传代次数增加出现误诊情况，降低检出率。VITEK MS系统流感嗜血杆菌检查为一种新型检查方式，该种方式可以实现快速分析流感嗜血杆菌情况，缩短检查耗时。研究回顾性我院生化实验室收集的咽拭子或痰液标本2000份（经过细菌16SrDNA检查提取流感嗜血杆菌35株），结果显示VITEK MS系统流感嗜血杆菌检出率较之M—H琼脂药敏试验高（

P＜0.05），VITEK MS系统流感嗜血杆菌检查耗时较之M—H琼脂药敏试验更短（P＜0.05）。分析原因：菌株的传代次数也能够影响生化反应，导致检测结果出现生化反应不显著或生长不良等情况，影响流感嗜血杆菌检出率，VITEK MS系统检查时间短，系统可以自动判读结果，更加客观，检出率较高[6]。本研究选取菌株样本量有限，未深入分析不同全自动快速微生物检测系统鉴别流感嗜血杆菌价值，下次研究分析不同全自动快速微生物检测系统价值，为流感嗜血杆菌更为准确快速分析提供技术支持[7]。

综上所述，VITEK MS系统流感嗜血杆菌检查较高，流感嗜血杆菌检出率较高，可以快速检查，值得推广。

参考文献

[1]张海军,方海. b型流感嗜血杆菌疫苗纳入免疫规划的卫生经济学研究系统评价[J]. 中国疫苗和免疫,2020,26(4):455-459,473.

[2]秦淑国,许元元,赵萍萍,等. 全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的价值分析[J]. 热带病与寄生虫学,2022,20(2):94-95,102.

[3]韦海峰. 全自动快速微生物检测系统在鉴定流感嗜血杆菌的应用分析[J]. 医学美学美容,2019,28(17):71.

[4]陆伟桃,郭菁,邓晨晖,等. 探讨全自动快速微生物检测系统在鉴定流感嗜血杆菌的应用[J]. 检验医学与临床,2016,13(7):944-945.

[5]秦淑国,许元元,赵萍萍,等. 全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的价值分析[J]. 热带病与寄生虫学,2022,20(2):94-95,102.

[6]吕其凡. 全自动快速微生物检测系统在鉴定流感嗜血杆菌中的应用价值[J]. 中国医药指南,2019,17(33):38-39.

[7]袁君君. 全自动快速微生物质谱检测系统鉴定流感嗜血杆菌及其可靠性分析[J]. 检验医学与临床,2019,16(11):1555-1557.