简介:摘要利用在原核生物中观察到的规律成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)与相关的Cas(CRISPR- associated proteins)蛋白构成CRISPR-Cas系统作为真核细胞中的基因编辑工具为近年研究热点。效应蛋白由多个Cas蛋白组成,包括两个大类五型系统。Cas蛋白结合特定的核酸序列,具有核酸酶的功能用于可编程基因组编辑和表观遗传调控,同时在疾病诊断方面也有很好的发展前景。其中Cas6是一种独立于金属的单转位酶,依附在crRNA裂解产物上,可识别并在crRNA转录前的重复序列中裂解单个磷酸二酯键。核糖核酸内切酶Cas9为RNA引导的DNA裂解酶,是目前应用最广泛的基因编辑工具,同时在感染性疾病检测、癌性病毒感染的消除或灭活、肿瘤免疫治疗、肿瘤基因组和表观基因组的调控等方面显示出巨大的应用前景。RNA引导的核酸内切酶Cas12a具有两种不同的核酸酶活性,且该双重催化活性已被用于多重基因编辑。Cas12a的显著特性使其应用于目标DNA与RNA快速检测,成为CRISPR-Cas基因组编辑工具包的补充。RNA引导的RNA靶向核酸内切酶Cas13a是RNA引导、RNA激活的RNA酶,已被开发为RNA检测、RNA成像和RNA调控的强大工具,同时利用Cas13a构建高灵敏度及特异度的检测方法也可为感染性疾病在诊断过程中提供重要的理论依据。由此展开对CRISPR-Cas系统相关的Cas蛋白的深入研究,同时对上述系统在不同疾病中的重要应用等进行阐述,有助于为各项研究提供新思路,新方法。
简介:基因治疗是为网膜的退化疾病的潜在地有效的治疗。定期聚类interspaced短palindromic重复(CRISPR)/CRISPR-associated蛋白质9(Cas9)系统在眼的研究作为一个新编辑染色体的工具被开发了。在研究的最近的进展证明CRISPR/Cas9在在视网膜炎pigmentosa(RP)和leber的vivo产生动物模型以及基因治疗被使用了先天的黑(LCA)。它被与象联系adeno的病毒(AAV)那样的另外的技术结合也为诊所作为一次潜在的尝试显示出并且导致pluripotent干细胞(iPSCs)。在这评论,我们加亮在指向网膜的退化使用CRISPR/Cas9的进一步的前景的主要的点。我们也在治疗网膜的退化疾病强调这种技术的潜在的应用程序。
简介:CRISPR/CAS系统,原核生物,尤其是细菌的免疫系统,在抵抗外源性遗传物质如噬菌体病毒和外源质粒的入侵中起着一定的作用。也为其提供了后天免疫的功能,类似于哺乳动物的二次免疫。当细菌被病毒或外源性质粒入侵时,它们产生"记忆",从而抵御反复入侵。本文就CRISPR/Cas免疫方面的功能与进展进行了大致的概括。
简介:有效教学已经成为深入人心的教学理念和教学研究的重要主题,但在有效教学的设计和实践中却暴露了不少问题和隐忧.基于复杂适应系统(CAS)理论,探讨提出能解决上述问题和隐忧的有效教学方式——“团队适应性竞争”教学法,并通过数学教学实践中的性质或公式探究型教学以及问题解决型教学这两类教学的案例进行说明.该教学法的提出,意在对新课改能够更好地实施和发展起到“抛砖引玉”的作用.
简介:Precisebaseeditingishighlydesiredinplantfunctionalgenomicresearchandcropmolecularbreeding.Inthisstudy,weconstructedarice-codonoptimizedadeninebaseeditor(ABE)-nCas9toolthatinducedtargetedA·TtoG·Cpointmutationofakeysinglenucleotidepolymorphismsiteinanimportantagriculturalgene.Combinedwiththemodifiedsingle-guideRNAvariant,ourplantABEtoolcanefficientlyachieveadeninebaseeditinginthericegenome.
简介:Differentfluxeswereusedtosynthesizelongpersistencephosphors,calciumsulfidesactivatedbyEu2+andTm3+,byconvenientsolid-statemethod.ThephosphorusingNH4Fasafluxhasgoodcrystallinityandlargeparticlesize,itsstabilityagainstwaterandotheratmosphericcomponentsisenhanced,anditsafterglowislongerandfluorescentintensityismoreintensethanthoseofthephosphorusingNH4Clasflux.TheirPLintensitiesvariedwithtimeinmoistairweremeasured,noremarkablechangewasfoundforthosepreparedwithNH4FfluxincontrastwithNH4Clasflux.SousingNH4Fasfluxisagoodmethodtoenhancethestabilityofalkalineearthsulfides.
简介:设计习俗的核酸酶技术例如定期聚类短palindromic重复(CRISPR)联系了的interspaced(Cas)系统提供为昆虫编辑工具的吸引人的染色体功能的遗传。指向的基因mutagenesis由CRISPR/Cas9系统调停了在包括的几份昆虫订单被完成了双翅目,鳞翅目和翘目。然而,小成功都没在这些由于genomic信息和胚胎的microinjection技术的缺乏在农业害虫被报导昆虫种类。这里,我们报导CRISPR/Cas9系统在重要鳞翅类的害虫Spodopteralitura导致了有效基因mutagenesis。我们指向了S。litura腹A(Slabd--一)是重要胚胎的发展基因并且在决定昆虫的腹的片断的身份起一个重要作用的基因。指导Cas9送信人RNA和Slabd-A-specific单人赛领队RNA(sgRNA)的注射进S。成功地导致的litura胚胎典型abd--缺乏的显型,它在幼虫的阶段期间显示出异常分割和宫外的色素沉着。聚合酶链基于反应的分析表明Cas9/sgRNA建筑群有效地在S导致了指向的mutagenesis。litura。这些结果证明CRISPR/Cas9系统是为在象S那样的鳞翅类的害虫的染色体操作的一个强大的工具。litura。
简介:摘要 利用植物分子生物学基因编辑技术可以有效地靶向DNA病毒和RNA病毒序列,提高寄主植物对病毒的抵抗力。此外,利用植物分子生物学基因编辑技术(CRISPR/Cas)靶向病毒侵染或复制所需的植物内源基因可研制新的抗病毒种质资源。本文论证了基因编辑技术(CRISPR/Cas)和利用其开展抗病毒研究的进展和实例,同时讨论了病毒诱导的基因编辑系统的应用前景,并对CRISPR/Cas基因编辑技术在植物病毒研究中的优势与挑战进行了展望,为利用基因编辑技术进行抗病毒种质创新提供了指导。
简介:摘要鉴于目前核酸分子检测技术逐步从临床实验室向现场检测转移的发展趋势,急需建立一种高灵敏、高特异、高效和便捷的新型核酸诊断工具来满足临床即时检测(POCT)的需要。基于规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白(Cas)的检测方法是一种有前景的新型核酸检测方法。该方法中Cas效应蛋白能够识别高度特异的核酸序列,通过联合高灵敏小型生物传感器运用于POCT,在满足高灵敏性和高特异性的同时具备了检测的高效、便捷的特点。本文综述了近几年基于CRISPR/Cas技术集成小型现场分析传感器相关领域的进展,并讨论了POCT相关检测的研究前景及挑战。
简介:摘要规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)和CRISPR相关蛋白9(CRISPR associated protein,Cas9)组成的CRISPR/Cas9系统是大多数细菌和古细菌的一种免疫系统。该系统在动物模型构建、基因治疗和基因表达调控等众多领域发挥着强大的作用。但该系统的脱靶效应等原因所导致的效率低下和安全性问题一直是人们研究的重点。本文主要对CRISPR/Cas9系统从sgRNA、Cas9蛋白、递送系统、DSB修复通路、脱靶检测手段以及碱基编辑技术六个方面提高其编辑效率的改进方法进行综述。