简介:Objective:Toobservetheeffectsofthermalstressonproliferationofhumanvascularendothelialcells(VECs)andexploreitssignificance.Methods:ChangesofVECsproliferationwereinvestigatedwith3H-TdRincorporationmethodafterECV304wastreatedat43℃for2hours,whileexpressionsofintercellularadhesionmolecule-1(ICAM-1),inhibitorofdifferentiation-1(ID1),andP16andP21proteinsweredeterminedbyWesternBlotting.Results:TheeffectofinhibitionofVECsgrowthafterthermalstresswasdetectedby3H-TdRincorporationexperiment.WesternblottingshowedICAM-1,amarkerofactivatedendothelialcells,wasincreasedmarkedlyafterthermalstress.ExpressionofID1proteindeclinedgraduallywithincreasingexpressionsofitsdownstreamgenes,P16andP21followingthethermalstress.Conclusions:ThermalstresscouldstronglyactivateVECsandinhibitproliferationofVECsthroughID1,thusdownregulatingcyclin-dependentkinaseinhibitors,P16andP21,whichmightbeanessentialpathwayforrecoveryofVECsafterthermalstress.
简介:目的:探讨一例遗传性凝血因子VII(coagulationfactorVII,FVII)缺陷症家系基因突变类型。方法:检测凝血指标以明确诊断;用DNA直接测序法对先证者及其家庭成员FVII基因的全部外显子和其侧翼以及启动子进行分析,寻找基因突变;将含突变序列克隆入pGEMT-easy质粒载体中,对所得两条染色体相应序列分别测序,以确定不同突变在染色体上的分布。应用限制性内切酶MspI对先证者及家系成员相应基因片段进行酶切分析,证实测序所发现的突变。结果:先证者在8号外显子上有两种基因突变:11348位C→T突变和11349C→A突变。pGEMT-easy质粒克隆测序结果显示上述两种突变位于不同的染色体上。为不同染色体同一编码区Arg(CGG)304Trp(TGG)和Arg(CGG)304Gln(CAG)双重杂合性突变。其父亲、母亲分别为11349位G→A和11348位C→T杂合突变;先证者的弟弟FVII基因为正常野生型;其哥哥和3个子女均为杂合性突变。PCR辅助限制性酶切证实了先证者及其家系成员的基因突变。结论:先证者FVII基因突变为不同染色体同一编码区Arg304Trp和Arg304Gln双重杂合性突变,此种突变类型的组合尚属首例。
简介:2000年7月11日,高等法院原讼法庭暂委法官彭伟昌就HCA2187/2000一案颁发判案书。