简介:摘要目的探讨中、低剂量重组人凝血因子Ⅷ(rhFⅧ)预防治疗重型血友病A成年患者的疗效。方法选择2016年10月至2018年12月,于成都市第三人民医院血液科门诊接受rhFⅧ低剂量预防治疗1年后,继续接受中剂量rhFⅧ预防治疗1年的16例重型血友病A成年患者为研究对象。患者均为男性,中位年龄为30岁(20~37岁)。中剂量预防治疗方案为静脉注射rhFⅧ 15~ 18 IU/(kg·次)、1~3次/周,中位rhFⅧ剂量及频次分别为17 U/(kg·次)和2次/周;低剂量预防治疗方案为静脉注射rhFⅧ 10~12 IU/(kg·次)、1~3次/周,中位rhFⅧ剂量及频次分别为10 U/(kg·次)和2次/周。采用回顾性分析方法,收集患者于低、中剂量rhFⅧ预防治疗期间的年总出血次数(ABR),年关节出血次数(AJBR),双侧肘关节、膝关节、踝关节的超声总评分,血友病关节健康评分(HJHS),以及中剂量预防治疗期间FⅧ抑制物发生情况。患者低、中剂量rhFⅧ预防治疗期间的AJBR、关节超声总评分及HJHS等比较,采用配对t检验;ABR比较,采用Wilcoxon符号秩和检验。本研究遵循的程序符合成都市第三人民医院人体试验委员会制定的标准,经过该伦理委员会批准(批准文号:2021-S-23),并且与患者签署临床研究知情同意书。结果①本组16例重型血友病A成年患者接受低剂量rhFⅧ预防治疗期间,其中位ABR、AJBR和HJHS分别为20.5次(2.0~38.0次)、(17.9±8.6)次和(43.7±17.3)分,分别高于中剂量预防治疗期间的10.5次(3.0~ 36.0次)、(9.8±6.7)次和(37.3±15.3)分,并且差异均有统计学意义(Z=3.132、P=0.002,t=3.820、P=0.002,t=3.315、P=0.005)。②本组16例患者接受低、中剂量rhFⅧ预防治疗期间,其关节超声总评分分别为(26.9±14.1)分和(31.8±11.8)分,二者比较,差异无统计学意义(t=-4.88,P=0.064)。③中剂量rhFⅧ预防期间,患者的FⅧ抑制物均呈阴性。结论重型血友病A成年患者采用中剂量rhFⅧ预防治疗方案较低剂量预防治疗,可以明显减少患者ABR和AJBR,改善患者的关节功能,并且不增加其FⅧ抑制物的产生。
简介:摘要目的构建共表达P1和3CD的重组杆状病毒,利用昆虫细胞重组表达2型脊髓灰质炎病毒(poliovirus type 2,PV2)的病毒样颗粒(virus-like particle, VLP),制备PV2-VLP进行初步免疫原性研究。方法基于粉纹夜蛾细胞(High 5)密码子偏好性,将PV2的P1基因和3CD基因进行序列优化,并对P1基因进行稳定性突变,构建突变型rBac-PV2-P1s-3CD和野生型rBac-PV2-P1-3CD杆状病毒。Western blot分别检测目的蛋白表达量,离子交换层析纯化PV2-VLP,透射电镜观察VLP高级结构确定组装效率。免疫大鼠评估免疫原性。结果成功构建了可稳定表达P1s蛋白和3CD蛋白的重组杆状病毒。Western blot结果表明热稳定性突变后VLP产量相比野生型有所提高。电镜观察发现直径约30 nm的三维结构,表明VLP成功组装。动物实验结果表明,重组制备的PV2-VLP具有免疫原性,且能有效刺激产生中和抗体。结论用昆虫细胞-杆状病毒表达系统可成功制备有效的VLP类疫苗,为PV-VLP疫苗的研制提供参考。
简介:摘要目的探讨重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)治疗肺癌恶性胸腔积液的效果及安全性。方法选取2017年1月至2020年1月山西省煤炭中心医院血液肿瘤科收治的62例肺癌恶性胸腔积液患者,男33例,女29例,年龄(71.5±4.3)岁,年龄范围为65~90岁。采用随机数表法将患者随机分为顺铂组及rmhTNF组,每组31例,顺铂组采用顺铂治疗,rmhTNF组在顺铂组的基础上加用rmhTNF治疗,比较治疗4周后两组患者的治疗效果、治疗后生活质量、不良反应发生情况及生存期。结果rmhTNF组患者的缓解率[74.2%(23/31)]高于顺铂组[42.0%(13/31)],总生活质量[(70.56±6.71)分]优于顺铂组[(60.38±5.98)分],差异有统计学意义(P<0.05)。rmhTNF组患者出现4例不良反应,顺铂组出现6例不良反应。rmhTNF组患者无进展生存期、总生存期均长于顺铂组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论rmhTNF治疗肺癌恶性胸腔积液的缓解率高,生活质量好,值得在临床上推广应用。
简介:摘要目的探讨香菇多糖注射液联合重组人血管内皮抑制素在伴腹腔转移胃癌患者治疗中的临床效果。方法选择2017年1月至2019年12月在江苏省海安市人民医院治疗的伴腹腔转移胃癌患者80例,根据随机数字表法分为对照组与观察组,每组40例。对照组给予FOLFOX(奥沙利铂+亚叶酸钙+5-氟尿嘧啶)方案化疗联合重组人血管内皮抑制素进行治疗,观察组在对照组基础上联合香菇多糖注射液进行治疗。观察两组患者治疗后近期疗效、治疗前后肿瘤标志物、免疫功能、血管新生相关因子水平以及不良反应。结果治疗后,观察组近期有效率为67.5%(27/40),高于对照组的47.5%(19/40)(χ2=4.256,P<0.05);治疗后两组肿瘤特异性生长因子(TSGF)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原72-4(CA72-4)水平均较治疗前下降,且治疗后观察组TSGF、CEA、CA72-4水平均低于对照组[(48.99±3.14)U/ml比(55.17±3.68)U/ml,t=-8.080,P<0.01;(0.40±0.09)ng/ml比(0.47±0.10)ng/ml,t=-3.291,P=0.002;(3.51±1.14)U/ml比(8.42±2.57)U/ml,t=-11.045,P<0.01]。治疗后两组CD3+细胞比例、CD4+细胞比例及CD4+/CD8+比值均较治疗前下降,且治疗后观察组CD3+细胞比例、CD4+细胞比例及CD4+/CD8+比值均高于对照组[(38.53±5.12)%比(31.82±4.75)%,t=6.076,P<0.01;(25.36±4.39)%比(19.12±3.91)%,t=6.713,P<0.01;1.05±0.24比0.83±0.19,t=4.546,P<0.01]。治疗后两组血管新生相关因子p53、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)均较治疗前下降,且治疗后观察组p53、VEGF、TGF-β1水平均低于对照组[(132.86±31.24)ng/L比(163.24±33.27)ng/L,t=-4.210,P<0.01;(425.23±36.79)ng/L比(673.57±63.28)ng/L,t=-21.458,P<0.01;(35.87±4.03)ng/ml比(38.26±4.32)ng/ml,t=-2.559,P=0.012]。观察组Ⅲ~Ⅳ级不良反应发生率低于对照组[47.5%(19/40)比62.5%(25/40),χ2=6.142,P<0.05]。结论香菇多糖注射液联合重组人血管内皮抑制素治疗伴腹腔转移胃癌患者效果较好,安全有效,值得临床推广。
简介:摘要目的以CpG1826作为疫苗佐剂评价其与铝佐剂对大肠埃希菌表达的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)亚单位疫苗免疫原性的协同增强效果。方法利用大肠埃希菌高效表达SARS-CoV-2亚单位抗原,纯化后加入CpG1826和铝佐剂。将BALB/c小鼠随机分成铝佐剂疫苗组、CpG+铝佐剂疫苗组和空白对照组,每组18只,于0、7和14 d进行腹腔注射免疫。分别于首针免疫后7、14和28 d采血和取脾检测小鼠血清IgG水平、中和抗体水平以及小鼠脾细胞上清中IFN-γ细胞因子水平。结果在首针免疫28 d后,3组小鼠的IgG、结合抗体抑制率和中和抗体水平差异均有统计学意义(F=21.440、159.400和8.470,P均<0.05),其中CpG+铝佐剂疫苗组分别为6.91±0.20、(91.01±4.60)%和65.33±51.70,均高于铝佐剂疫苗组(t=2.892、2.441和2.703,P均<0.05)。在首针免疫7、14和28 d后,3组的特异性IFN-γ的效应T细胞数比较差异有统计学意义(F=25.360、36.990和660.400,P均<0.01),CpG+铝佐剂疫苗组分别为179.68±69.26、395.58±139.64、563.50±43.79,均高于铝佐剂疫苗组(t=3.969、5.292和22.310,P均<0.01)。结论CpG1826能和铝佐剂协同增强大肠埃希菌表达的SARS-CoV-2亚单位疫苗诱导的体液及细胞免疫应答水平,显著提高其免疫原性,具有较强的临床意义。
简介:摘要:目的:研究重组人促红素联合静脉应用蔗糖铁治疗慢性肾衰竭肾性贫血的临床疗效。方法:选取2020年1月至2020年12月间皖南医学院第一附属医院肾内科收治的72例非透析慢性肾衰竭肾性贫血患者为研究对象,利用计算机数字随机模型对患者进行分组,观察组(n=36)与对照组(n=36),观察组予以重组人促红素联合静脉应用蔗糖铁治疗,对照组予以单独重组人促红素治疗,比较不同治疗模式下患者贫血的临床治疗效果。结果:临床总治疗有效率对比,观察组(97.22%)高于对照组(80.56%),(χ2=5.0625,P=0.0244);用药不良反应发生率对比,观察组(2.78%)高于对照组(19.44%),(χ2=6.2222,P=0.0126)。结论:重组人促红素联合静脉应用蔗糖铁治疗慢性肾衰竭肾性贫血的临床疗效显著,不良反应少,方案值得推广。
简介:[摘要]目的:分析宫腔灌注重组人粒细胞刺激因子治疗薄型子宫内膜的临床效果。方法:抽取我院2019年12月至2020年12月收治的70例薄型子宫内膜患者作为研究对象,根据治疗方式的不同将其划分为对照组和研究组,每组35例,对照组采用芬吗通(雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片)进行治疗,研究组采用宫腔灌注重组人粒细胞刺激因子治疗,对比两组治疗前后Em、RI、A型子宫内膜率,以及两组胚胎种植率、妊娠率。结果:治疗前两组的Em、RI、A型子宫内膜率均没有明显差异(P>0.05);治疗后,研究组的Em高于对照组,RI低于对照组,A型子宫内膜率低于对照组,差异均显著(P
简介:【摘要】目的 对重组人干扰素α-2b凝胶联合保妇康栓对宫颈糜烂治疗效果进行观察。方法 选取2019年2月—2020年2月本院收治的96例宫颈糜烂患者作为研究对象,计算机随机将其平均分成两组,每组48例。单纯使用保妇康栓进行治疗的定为对照组,将使用重组人干扰素α-2b凝胶联合保妇康栓进行治疗的定为观察组,观察和比较两组患者的临床治疗效果及连续用药8周后创面平均愈合时间及不良反应发生几率。结果 治疗八周后进行复查,观察组治疗总有效率(97.92)显著优于对照组(85.42%);观察组平均愈合时间(5.13±1.29)周显著优于对照组(7.62±1.32)周;观察组不良反应发生几率(6.25%)显著低于对照组(20.83%),差异均呈统计学意义(P<0.05)。结论 重组人干扰素α-2b凝胶和保妇康栓联合用药,治疗时间短、恢复情况好、用药安全性高,可进行临床大力推广。
简介:摘要目的在毕赤酵母细胞中稳定表达经连接肽连接的HBsAg和水痘-带状疱疹病毒糖蛋白(glycoprotein,g)E的重组蛋白,并进行初步纯化及颗粒性验证。方法构建HBsAg-gE的四拷贝重组表达质粒,经酶切线性化后电转化至毕赤酵母KM71细胞中,甲醇诱导表达。采用免疫印迹法和ELISA检测表达的重组蛋白,经蔗糖密度梯度离心和凝胶排阻层析初步纯化后进行透射电子显微镜观察。结果HBsAg-gE四拷贝重组质粒经双酶切鉴定正确。表达的重组蛋白经免疫印迹法检测,可以与小鼠抗gE单克隆抗体及抗HBsAg多克隆抗体特异性结合,相对分子质量约90 000。经ELISA检测HBsAg呈阳性。蔗糖密度梯度离心后,重组蛋白聚集在40%至55%区带之间,在透射电子显微镜下观察到直径约20 nm左右的病毒样颗粒结构。结论成功在毕赤酵母中表达了HBsAg-gE病毒样颗粒,为在酵母系统中表达水痘-带状疱疹重组疫苗奠定了基础。
简介:摘要目的探讨重组人突触融合蛋白4(STX4)对脂多糖(LPS)诱导的胰岛β细胞INS-1损伤影响。方法胰岛β细胞INS-1分成Control组(空白对照)、LPS组(LPS处理)、LPS+NC组(转染阴性对照载体,LPS处理)、LPS+STX4组(转染pcDNA-STX4,LPS处理),RT-qPCR和Western blot检测STX4 mRNA和蛋白质表达,流式细胞术检测凋亡,DCFHDA法检测活性氧簇(ROS)水平、黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平、比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平、钼酸铵比色法检测过氧化氢酶(CAT)水平、硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平,ELISA法检测细胞分泌的白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和葡萄糖条件下胰岛素分泌水平,Western blot法检测Cleaved Caspase-3、Bax、p65蛋白质表达。用NF-κB信号通路激活剂处理上调STX4后的胰岛β细胞INS-1,给予LPS刺激,同样利用上述方法测定细胞凋亡、ROS、SOD、GSH-Px、CAT、MDA水平和分泌的IL-1β、TNF-α、胰岛素水平以及Cleaved Caspase-3、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p65蛋白质水平。结果与Control组比,LPS组胰岛β细胞中STX4 mRNA和蛋白质表达均减少,细胞凋亡率、ROS水平、MDA水平均升高,SOD、GSH-Px、CAT水平均降低,细胞分泌的IL-1β、TNF-α水平均升高,细胞分泌的胰岛素水平降低,Cleaved Caspase-3、Bax、p65蛋白质表达水平也升高。NF-κB信号通路激活剂处理逆转上调STX4对LPS条件下胰岛β细胞凋亡、ROS、SOD、GSH-Px、CAT、MDA水平和分泌的IL-1β、TNF-α、胰岛素水平以及Cleaved Caspase-3、Bax、p65蛋白质水平影响。结论上调STX4抑制LPS诱导的胰岛β细胞氧化损伤、细胞凋亡和炎症因子释放,机制与降低NF-κB信号通路激活水平有关。
简介:摘要目的探讨重组人干扰素-α(IFN-α)用于椎旁神经阻滞治疗对带状疱疹后神经痛(PHN)的免疫功能、炎症因子及睡眠质量的影响。方法选择2018年1月至2019年12月丹东市中心医院疼痛科收治的128例PHN患者,根据随机数字表法分成A组(n=63)和B组(n=65),两组患者均予以甲钴胺、加巴喷丁、维生素C等基础药物治疗,A组在椎旁神经阻滞药物中加入IFN-α,B组除未在椎旁神经阻滞药物中加入IFN-α外,其余治疗与A组一致。分别采用视觉模拟评分(VAS)、匹兹堡睡眠质量评分(PSQI)对治疗前后两组患者的疼痛程度、睡眠质量进行评价,测定治疗前后两组患者的免疫功能指标(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及炎症因子(IL-6、IL-10)水平的变化情况,并比较两组患者的临床疗效。结果治疗后,A组及B组的VAS评分、PSQI评分及IL-6水平均明显低于治疗前(P<0.05),且A组明显低于B组(P<0.05);A组、B组的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平及IL-10水平均明显高于治疗前(P<0.05),且A组明显高于B组(P<0.05);A组的总有效率明显高于B组(P<0.05)。结论重组人干扰素-α用于椎旁神经阻滞治疗带状疱疹后神经痛患者,可有效改善患者的疼痛症状及睡眠质量,提高临床疗效,可能与其调节患者的免疫功能及炎症因子指标有关。
简介:摘要目的探讨重组人干扰素-α(IFN-α)用于椎旁神经阻滞治疗对带状疱疹后神经痛(PHN)的免疫功能、炎症因子及睡眠质量的影响。方法选择2018年1月至2019年12月丹东市中心医院疼痛科收治的128例PHN患者,根据随机数字表法分成A组(n=63)和B组(n=65),两组患者均予以甲钴胺、加巴喷丁、维生素C等基础药物治疗,A组在椎旁神经阻滞药物中加入IFN-α,B组除未在椎旁神经阻滞药物中加入IFN-α外,其余治疗与A组一致。分别采用视觉模拟评分(VAS)、匹兹堡睡眠质量评分(PSQI)对治疗前后两组患者的疼痛程度、睡眠质量进行评价,测定治疗前后两组患者的免疫功能指标(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及炎症因子(IL-6、IL-10)水平的变化情况,并比较两组患者的临床疗效。结果治疗后,A组及B组的VAS评分、PSQI评分及IL-6水平均明显低于治疗前(P<0.05),且A组明显低于B组(P<0.05);A组、B组的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平及IL-10水平均明显高于治疗前(P<0.05),且A组明显高于B组(P<0.05);A组的总有效率明显高于B组(P<0.05)。结论重组人干扰素-α用于椎旁神经阻滞治疗带状疱疹后神经痛患者,可有效改善患者的疼痛症状及睡眠质量,提高临床疗效,可能与其调节患者的免疫功能及炎症因子指标有关。
简介:摘要目的融合穿梭肽和狂犬病单链抗体,优化在大肠杆菌中的表达条件,获得具有中和活性的重组穿梭肽-单链抗体。方法重新编码SO57抗体序列,在N端融合Arg12的穿梭肽,构建pET22(b)-rSO57表达载体,在大肠杆菌中重组表达。在菌体生长密度OD600、诱导时间、诱导温度和诱导剂浓度条件进行优化,获得较高的表达效果。使用固定化金属螯合层析对重组蛋白进行纯化,测定了重组单链抗体的相对亲和力,通过rSO57/CVS-11混合感染细胞和快速荧光灶抑制实验(rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT),验证重组单链抗体的中和作用。结果rSO57构建成功,在BL21(de3)中诱导表达,最优表达条件为菌体密度OD600在0.8时,使用0.4 mmol/ml的IPTG诱导,16 ℃下诱导24 h,rSO57以可溶形式表达,表达量占到了菌体可溶性蛋白的19.8%。层析纯化后,获得了纯度为84%的重组rSO57。ELISA实验显示,rSO57的相对亲和力系数Ka=4.3×105。当rSO57与CVS-11混合时,随着稀释的增加,细胞的感染率上升,表明重组抗体具有中和狂犬病病毒的能力。使用RFFIT进行测定,50 μg的rSO57相当于2.17IU的狂犬病中和血清。结论本实验重组表达了融合穿梭肽的重组单链抗体rSO57,且可以中和狂犬病病毒,以期制备可以用于狂犬病治疗的特异性和靶向性的抗病毒药物载体。